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多倍体构建及基因组重排对提高酿酒酵母乙醇产量的研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 文献综述第8-23页
   ·燃料乙醇的国内外发展状况第8-9页
   ·发酵法生产乙醇第9-10页
   ·乙醇发酵菌株研究进展第10-13页
     ·酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)第10-11页
     ·运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)第11-12页
     ·大肠埃希氏菌(Escherichia coli)第12页
     ·其他微生物第12-13页
   ·酵母改造策略第13-14页
   ·诱变育种第14-17页
     ·突变和诱变剂第15-16页
     ·诱变育种的一般过程第16-17页
   ·酿酒酵母基因组、交配型及染色体倍数第17-23页
     ·酿酒酵母的基因组第17页
     ·酿酒酵母的交配型第17-21页
     ·多倍体酿酒酵母第21-23页
第二章 实验材料及方法第23-41页
   ·实验材料第23-29页
     ·菌株与质粒第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·主要试剂第24-27页
     ·培养基第27-28页
     ·主要溶液第28-29页
   ·实验方法第29-35页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第29-30页
     ·小规模提取大肠杆菌质粒法(CTAB法)第30页
     ·酵母染色体的快速分离第30-31页
     ·PCR扩增反应第31页
     ·DNA的限制酶消化第31-32页
     ·DNA的连接反应第32页
     ·DNA的琼脂糖凝胶电泳第32-33页
     ·酵母交配型的验证第33页
     ·不同交配型酵母细胞之间的杂交第33-34页
     ·产孢及四分体孢子拆分第34页
     ·酵母EMS诱变第34页
     ·酵母高效产孢法第34-35页
     ·孢子纯化方法第35页
   ·发酵过程的准备及主要分析方法第35-41页
     ·发酵培养基制备第35-36页
     ·菌种扩大培养与接种第36页
     ·发酵条件第36-37页
     ·发酵样品的收集及细胞生长状态的测定第37页
     ·DNS法测定还原糖的测定第37-38页
     ·HPLC测定发酵液中组分第38-40页
     ·美兰(次甲基蓝)染色法测定活细胞浓度第40-41页
第三章 结果与讨论第41-62页
   ·多倍体酿酒酵母菌株的构建以及发酵研究第41-53页
     ·由工业菌株双倍体酿酒酵母CN1 出发拆孢子得到单倍体菌株第41-44页
     ·交配型为MATa/a和MATα/α的双倍体酵母菌株的构建第44-46页
     ·多倍体菌株的构建第46-49页
     ·不同染色体组倍数酿酒酵母系列菌株性能比较第49-53页
   ·使用EMS诱变和基因组重排技术获得高产乙醇酿酒酵母菌株第53-62页
     ·最佳诱变剂剂量的确定第53-54页
     ·突变文库的构建第54页
     ·基因组有性重排第54-56页
     ·基因组重排后优势菌株的富集第56-57页
     ·富集后菌株的初筛第57-59页
     ·复筛第59-62页
第四章 总结与展望第62-64页
   ·工作总结第62页
   ·工作展望第62-64页
参考文献第64-69页
致谢第69页

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