摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 引言 | 第10-26页 |
第一节 蓝藻的信号转导系统 | 第10-18页 |
1 蓝藻中的二元信号转导系统 | 第11-16页 |
·二元信号转导系统的主要组成蛋白 | 第12-13页 |
·二元信号转导系统的作用模式 | 第13页 |
·二元信号转导系统在蓝藻中的分布 | 第13-16页 |
2 蓝藻中的真核型Ser/Thr 激酶系统 | 第16-18页 |
第二节 蓝藻的遗传操作 | 第18-23页 |
1 蓝藻的基因转移系统 | 第18-21页 |
·遗传转化 | 第18-19页 |
·接合转移 | 第19-20页 |
·物理导入法 | 第20-21页 |
2 影响蓝藻转化效率的因素 | 第21-22页 |
·自然转化效率的影响因素 | 第21-22页 |
·诱导转化效率的影响因素 | 第22页 |
·电击转化效率的影响因素 | 第22页 |
·结合转移效率的影响因素 | 第22页 |
3 蓝藻的质粒载体 | 第22-23页 |
第三节 半定量RT-PCR 法检测基因表达水平 | 第23-24页 |
1 半定量RT-PCR | 第23-24页 |
2 半定量RT-PCR 的具体方法 | 第24页 |
第四节 本论文研究目的及意义 | 第24-26页 |
第二章 聚球藻PCC7942 Ser/Thr 激酶功能的研究 | 第26-51页 |
第一节 聚球藻PCC7942 Ser/Thr 激酶突变株的构建及生理检测 | 第26-44页 |
1 材料与方法 | 第26-36页 |
·材料 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-36页 |
2 结果与分析 | 第36-44页 |
·聚球藻基因组DNA 提取s,tk011/196/537/547/724 基因上下游片段的扩增及卡那抗性基因kna 的扩增 | 第36-38页 |
·同源重组载体的鉴定 | 第38-40页 |
·聚球藻转化子的获得 | 第40-41页 |
·聚球藻转化子的PCR 检测 | 第41-42页 |
·聚球藻PCC7942 突变株生长情况检测 | 第42-44页 |
3 讨论 | 第44页 |
第二节 聚球藻PCC7942 中四个Ser/Thr 激酶基因的表达调控分析 | 第44-50页 |
1 材料与方法 | 第45-48页 |
·材料 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-48页 |
2 结果与分析 | 第48-49页 |
·聚球藻PCC7942 总RNA 的提取 | 第48页 |
·不同诱导条件下stk011、stk196、stk537 和stk547 的表达特征 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-50页 |
本章小结 | 第50-51页 |
第三章 钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)四个跨膜Ser/Thr 蛋白激酶基因对不同温度诱导的响应 | 第51-63页 |
1 材料与方法 | 第51-57页 |
·材料 | 第51-52页 |
·藻种 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51-52页 |
·数据来源 | 第52页 |
·所用的软件、程序 | 第52页 |
·实验方法 | 第52-57页 |
·钝顶螺旋藻培养方法 | 第52-53页 |
·钝顶螺旋藻stk 序列的获得及蛋白结构的预测 | 第53页 |
·相关实验参数的确定 | 第53-54页 |
·半定量RT-PCR 分析四个Ser/Thr 蛋白激酶基因的表达 | 第54-57页 |
2 结果与分析 | 第57-61页 |
·钝顶螺旋藻stk 序列的获得及蛋白结构的预测 | 第57-58页 |
·相关实验参数的确定 | 第58-59页 |
·钝顶螺旋藻最适培养温度的确定 | 第58页 |
·Ser/Thr 蛋白激酶基因和内标基因PCR 循环数的确定 | 第58-59页 |
·半定量RT-PCR 分析四个stk 基因的表达 | 第59-61页 |
·提取的五个诱导样品及对照组的总RNA 的检测 | 第59页 |
·不同温度诱导后四个stk 基因表达的半定量RT-PCR 结果 | 第59-61页 |
3 讨论 | 第61-62页 |
本章小结 | 第62-63页 |
结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
发表及完成文章 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |