| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-34页 |
| ·东海原甲藻与赤潮 | 第15-21页 |
| ·海洋浮游藻 | 第15页 |
| ·赤潮 | 第15-18页 |
| ·东海原甲藻 | 第18-21页 |
| ·浮游藻生长率的研究 | 第21-26页 |
| ·传统的研究方法 | 第21-22页 |
| ·细胞周期法 | 第22-26页 |
| ·本研究相关基因的介绍 | 第26-32页 |
| ·增殖细胞核抗原(PCNA)基因 | 第26-29页 |
| ·细胞色素b(Cyt b)基因 | 第29-32页 |
| ·课题的提出及立项依据 | 第32-34页 |
| 第二章 东海原甲藻PCNA基因的克隆与序列分析 | 第34-57页 |
| ·实验材料与方法 | 第34-46页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR及其产物的克隆测序 | 第36-40页 |
| ·3’RACE克隆东海原甲藻PCNA基因cDNA 3’末端片段 | 第40-43页 |
| ·5’RACE克隆东海原甲藻PCNA基因cDNA 5’末端片段 | 第43-45页 |
| ·序列分析 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-55页 |
| ·RT-PCR扩增及克隆结果 | 第46-47页 |
| ·RACE扩增和测序结果 | 第47-52页 |
| ·东海原甲藻PCNA全长cDNA的获得和特征分析 | 第52-53页 |
| ·序列比对分析和系统进化分析 | 第53-55页 |
| ·讨论与小结 | 第55-57页 |
| 第三章 东海原甲藻Cyt b基因的克隆与序列分析 | 第57-72页 |
| ·实验材料与方法 | 第57-60页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·RT-PCR及其产物的克隆测序 | 第57-58页 |
| ·3’RACE克隆东海原甲藻Cyt b基因cDNA 3’末端片段 | 第58-59页 |
| ·5’RACE克隆东海原甲藻Cyt b基因cDNA 5’末端片段 | 第59-60页 |
| ·序列分析 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-70页 |
| ·RT-PCR扩增及克隆结果 | 第60-63页 |
| ·RACE扩增和测序结果 | 第63-66页 |
| ·Cyt b基因的全长cDNA的获得和特征分析 | 第66-68页 |
| ·序列比对和系统进化分析 | 第68-70页 |
| ·讨论与小结 | 第70-72页 |
| 第四章 东海原甲藻PCNA基因实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第72-87页 |
| ·材料与方法 | 第72-76页 |
| ·实验材料 | 第72-74页 |
| ·质粒标准样品的制备 | 第74页 |
| ·RFQ-PCR标准曲线的建立 | 第74-75页 |
| ·标准曲线准确性的验证 | 第75页 |
| ·特异性验证 | 第75-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-85页 |
| ·质粒提取和酶切 | 第76-77页 |
| ·RFQ-PCR引物的验证 | 第77-78页 |
| ·染料法建立的标准曲线 | 第78-81页 |
| ·探针法建立的标准曲线 | 第81-83页 |
| ·特异性验证 | 第83-85页 |
| ·讨论与小结 | 第85-87页 |
| 第五章 东海原甲藻Cyt b基因实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第87-95页 |
| ·材料与方法 | 第87-88页 |
| ·质粒标准样品的制备 | 第87页 |
| ·RFQ-PCR标准曲线的建立 | 第87-88页 |
| ·标准曲线准确性的验证 | 第88页 |
| ·结果与分析 | 第88-94页 |
| ·质粒提取和酶切 | 第88页 |
| ·RFQ-PCR引物的验证 | 第88-89页 |
| ·染料法建立的标准曲线 | 第89-92页 |
| ·探针法建立的标准曲线 | 第92-94页 |
| ·讨论与小结 | 第94-95页 |
| 第六章 东海原甲藻PCNA基因相对表达量与生长率关系的研究 | 第95-111页 |
| ·材料与方法 | 第95-98页 |
| ·主要仪器 | 第95-96页 |
| ·主要试剂 | 第96页 |
| ·实验仪器的洗涤与处理 | 第96页 |
| ·东海原甲藻的培养与收集 | 第96-97页 |
| ·细胞生长率测定 | 第97页 |
| ·PCNA与Cyt b基因表达量的测定 | 第97-98页 |
| ·结果与分析 | 第98-106页 |
| ·第一组实验结果 | 第98-103页 |
| ·第二组实验结果 | 第103-106页 |
| ·讨论 | 第106-110页 |
| ·Cyt b基因作为内参基因的可行性 | 第106-107页 |
| ·PCNA的表达量作为细胞分裂增值指标的潜能 | 第107页 |
| ·PCNA基因的相对表达量(REL)与生长率(μ)的关系 | 第107-110页 |
| ·小结 | 第110-111页 |
| 第七章 东海原甲藻PCNA基因与细胞周期的关系 | 第111-117页 |
| ·材料与方法 | 第111-113页 |
| ·主要仪器 | 第111页 |
| ·主要试剂 | 第111-112页 |
| ·东海原甲藻的培养与样品收集 | 第112页 |
| ·细胞周期检测 | 第112页 |
| ·流式细胞仪分析 | 第112页 |
| ·REL检测 | 第112-113页 |
| ·结果与分析 | 第113-115页 |
| ·东海原甲藻的细胞周期分析 | 第113-114页 |
| ·东海原甲藻不同细胞周期REL的检测 | 第114-115页 |
| ·讨论 | 第115-116页 |
| ·小结 | 第116-117页 |
| 总结 | 第117-119页 |
| 展望 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-130页 |
| 攻读博士学位期间取得的学术成果 | 第130-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
