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HIV-1整合酶活性检测方法建立和应用研究

主要英文缩略词第1-6页
摘要第6-9页
ABSTRACT第9-16页
第1章 绪论第16-44页
   ·HIV 和艾滋病概述第16-21页
     ·艾滋病的流行现状第16-17页
     ·HIV-1 的结构第17-18页
     ·HIV-1 的生活周期与致病过程第18-21页
   ·艾滋病防治的研究进展第21-27页
     ·艾滋病的化学药物治疗第21-23页
     ·艾滋病疫苗研制进展第23-25页
     ·中草药在艾滋病防治中的应用第25-27页
     ·基因治疗及其他防治艾滋病的方法第27页
   ·以整合酶为靶点的抗艾滋病药物研究进展第27-33页
     ·整合酶的结构和功能第28-30页
     ·整合酶抑制剂的研究进展第30-33页
   ·以整合酶为靶标的抑制剂筛选方法研究进展第33-44页
     ·放射自显影方法第34-38页
     ·基于微孔板的酶联免疫吸附测定法第38-41页
     ·基于荧光共振能量转移方法第41-43页
     ·其他检测方法第43-44页
第2章 整合酶蛋白表达纯化及3′加工活性高通量检测方法的建立第44-64页
   ·引言第44-45页
   ·材料与方法第45-54页
     ·实验材料第45-48页
     ·实验方法第48-54页
   ·结果与讨论第54-62页
     ·重组整合酶蛋白表达质粒pNL-IN 的构建第54-56页
     ·重组整合酶蛋白的表达纯化及功能鉴定第56-59页
     ·整合酶3′加工反应活性高通量检测方法的建立第59-62页
     ·应用整合酶3′加工反应活性高通量检测方法测定整合酶抑制剂第62页
   ·本章小结第62-64页
第3章 整合酶链转移活性高通量检测方法的建立及应用第64-88页
   ·引言第64-65页
   ·材料与方法第65-66页
     ·实验材料第65页
     ·实验方法第65-66页
   ·结果与讨论第66-86页
     ·整合酶链转移反应活性高通量ELISA 检测的原理第66-67页
     ·整合酶链转移反应活性高通量ELISA 检测的结果第67-70页
     ·应用高通量ELISA 研究金属离子对整合酶链转移反应的影响第70-73页
     ·应用高通量ELISA 筛选整合酶抑制剂的有效性第73-74页
     ·应用高通量ELISA 从真菌代谢产物中筛选整合酶抑制剂第74-81页
     ·应用高通量ELISA 测定合成化合物对整合酶活性抑制效果第81-85页
     ·高通量ELISA 的统计分析结果第85-86页
   ·本章小结第86-88页
第4章 整合酶去整合活性高通量检测方法的建立第88-102页
   ·引言第88-89页
   ·材料和方法第89-92页
     ·PCR 引物合成第89-90页
     ·寡核苷酸链底物合成修饰第90页
     ·实验方法第90-92页
   ·结果与讨论第92-101页
     ·野生型整合酶和整合酶核心区蛋白的表达纯化及活性鉴定第92-96页
     ·去整合高通量ELISA 的灵敏度和特异性第96-98页
     ·应用去整合高通量ELISA 研究金属辅助离子的选择偏好性第98-99页
     ·应用去整合高通量ELISA 测定抑制剂对整合酶活性的影响第99-101页
   ·本章小结第101-102页
第5章 整合酶核心区野生型和F185K 可溶性突变型活性和溶解性研究第102-118页
   ·引言第102-103页
   ·材料和方法第103-105页
     ·分子生物学实验第103-104页
     ·整合酶核心区模型搭建第104页
     ·分子动力学模拟第104-105页
   ·结果与讨论第105-117页
     ·野生型和F185K 突变型整合酶核心区溶解性和活性比较第105-108页
     ·分子动力学模拟结果分析第108-111页
     ·溶剂可接近面积与氢键分析第111-114页
     ·整合酶核心区蛋白的结构分析第114-117页
   ·本章小结第117-118页
结论与展望第118-122页
 主要结论第118-119页
 论文创新点第119-120页
 展望及建议第120-122页
参考文献第122-144页
攻读博士学位期间发表的学术论文和申请专利第144-148页
致谢第148-149页

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