基金资助 | 第1-6页 |
致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-12页 |
Abstract | 第12-18页 |
英文缩略词表 | 第18-21页 |
第一章 绪论 | 第21-39页 |
·人细胞色素P450简介 | 第21-22页 |
·CYP2A13简介 | 第22-37页 |
·CYP2A13的基因 | 第22页 |
·CYP2A13的组织分布 | 第22-23页 |
·CYP2A13的功能及其在环境毒物代谢活化中的作用 | 第23-25页 |
·CYP2A13参与代谢活化的环境毒物 | 第25-30页 |
·CYP2A13的基因多态性 | 第30-33页 |
·P450基因多态性作用研究中的常用方法 | 第33-37页 |
·结语 | 第37-39页 |
第二章 野生型CYP2A13及其突变株的构建及表达 | 第39-67页 |
·前言 | 第39页 |
·实验材料及基本操作 | 第39-48页 |
·菌株、细胞株及质粒 | 第39-40页 |
·分子生物学试剂、生化试剂与化学试剂 | 第40页 |
·实验仪器 | 第40-41页 |
·细菌,细胞培养基的配制 | 第41-42页 |
·相关溶液的配制 | 第42-44页 |
·基本分子生物学实验操作 | 第44-48页 |
·实验步骤与方法 | 第48-59页 |
·野生型CYP2A13基因的的制备 | 第48-49页 |
·CYP2A13突变体的构建 | 第49-52页 |
·pFastBac~(TM)-CYP2A13s重组质粒的构建、转化及筛选 | 第52-53页 |
·Bacmid-CYP2A13s重组质粒的制备及验证 | 第53-54页 |
·Bacmid-CYP2A13s转染Sf9细胞及病毒扩增 | 第54-57页 |
·CYP2A13s重组蛋白的表达及鉴定 | 第57-59页 |
·实验结果 | 第59-64页 |
·CYP2A13s重组病毒的构建 | 第59-62页 |
·CYP2A13s重组蛋白的表达及鉴定 | 第62-64页 |
·实验讨论 | 第64-67页 |
第三章 CYP2A13野生型及其突变型蛋白对香豆素的代谢研究 | 第67-85页 |
·前言 | 第67-68页 |
·实验材料 | 第68-70页 |
·细胞株 | 第68页 |
·分子生物学试剂、化学试剂与标准品 | 第68页 |
·实验仪器及软件 | 第68-69页 |
·相关溶液的配制 | 第69页 |
·基本操作 | 第69-70页 |
·实验步骤与方法 | 第70-73页 |
·重组蛋白的收集与微粒体制备 | 第70页 |
·香豆素的代谢孵育方法及其代谢物HPLC分析条件 | 第70页 |
·7-羟基香豆素的色谱方法学考察 | 第70-71页 |
·香豆素代谢酶动力学参数测定条件的选择 | 第71页 |
·CYP2A13s代谢香豆素的酶动力学参数测定 | 第71-72页 |
·CYP2A13s代谢香豆素的分子动力学模拟 | 第72-73页 |
·实验结果 | 第73-81页 |
·重组蛋白的收集与微粒体制备 | 第73-74页 |
·7-羟基香豆素的色谱方法学考察 | 第74-77页 |
·香豆素代谢酶动力学参数测定条件的选择 | 第77页 |
·重组CYP2A13野生型和突变型蛋白代谢香豆素的酶动力学参数及比较 | 第77-78页 |
·CYP2A13s代谢香豆素的分子动力学模拟分析 | 第78-81页 |
·讨论 | 第81-85页 |
第四章 CYP2A13基因多态性在中国汉族人群中的分布及CYP2A13基因多态性与肺癌易感性的关联分析 | 第85-101页 |
·前言 | 第85-86页 |
·实验材料 | 第86-88页 |
·分子生物学试剂、化学试剂 | 第86页 |
·实验仪器 | 第86页 |
·相关溶液的配制 | 第86-87页 |
·基本操作 | 第87-88页 |
·实验步骤与方法 | 第88-93页 |
·血液样本的获取和基因组DNA的分离 | 第88-89页 |
·正常中国汉族人群和癌症人群中CYP2A13基因多态性的检测 | 第89-93页 |
·数据分析 | 第93页 |
·实验结果 | 第93-98页 |
·基因组提取 | 第93-94页 |
·正常汉族人群和癌症人群中CYP2A13基因多态性的检测 | 第94-95页 |
·数据分析 | 第95-98页 |
·讨论 | 第98-101页 |
结论 | 第101-105页 |
参考文献 | 第105-119页 |
在读期间主要研究成果 | 第119-120页 |