| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-24页 |
| ·牛病毒性腹泻概述 | 第11-17页 |
| ·病原体 | 第11-16页 |
| ·病原生物型 | 第16-17页 |
| ·持续性感染及流行病学 | 第17-19页 |
| ·持续性感染 | 第17-18页 |
| ·流行病学 | 第18-19页 |
| ·诊断方法研究进展 | 第19-22页 |
| ·血清学诊断方法 | 第19-21页 |
| ·分子生物学技术 | 第21-22页 |
| ·牛病毒性腹泻的防治及根除措施 | 第22-23页 |
| ·研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-31页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·细胞、病毒株、菌株、重组质粒及实验动物 | 第24页 |
| ·血清及抗体 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-31页 |
| ·重组E2 蛋白的制备及纯化 | 第25-26页 |
| ·重组E2 蛋白多克隆抗体的制备 | 第26页 |
| ·重组E2 蛋白多克隆抗体的鉴定 | 第26-27页 |
| ·间接ELISA 操作程序 | 第27页 |
| ·牛病毒性腹泻E2-ELISA 诊断方法相关条件的优化 | 第27-28页 |
| ·牛病毒性腹泻E2-ELISA 阴阳性判断标准的确定 | 第28页 |
| ·特异性试验 | 第28-29页 |
| ·重复性试验 | 第29页 |
| ·比较试验 | 第29-30页 |
| ·牛病毒性腹泻间接 E2-ELISA 的初步应用 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-42页 |
| ·重组E2 蛋白原核表达载体鉴定及表达产物的 SDS-PAGE 与Western blot 分析 | 第31-32页 |
| ·重组E2 蛋白多克隆抗体的鉴定 | 第32-34页 |
| ·兔源重组E2 蛋白多克隆抗体病毒中和效价的检测 | 第32页 |
| ·兔源重组E2 蛋白多克隆抗体的免疫荧光检测 | 第32-34页 |
| ·兔源E2 蛋白多克隆抗体的免疫印迹检测 | 第34页 |
| ·牛病毒性腹泻E2-ELISA 相关条件优化的结果 | 第34-37页 |
| ·抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度的确定结果 | 第34页 |
| ·封闭液的确定 | 第34页 |
| ·封闭液时间的确定 | 第34页 |
| ·血清最佳作用时间的确定结果 | 第34-36页 |
| ·二抗最佳工作浓度与最佳作用时间的确定结果 | 第36-37页 |
| ·底物最佳显色时间的确定结果 | 第37页 |
| ·牛病毒性腹泻E2-ELISA 阴阳性判定标准确定结果 | 第37-38页 |
| ·特异性试验结果 | 第38-39页 |
| ·阻断试验结果 | 第38页 |
| ·交叉试验结果 | 第38-39页 |
| ·重复性试验结果 | 第39-40页 |
| ·批内重复性试验结果 | 第39页 |
| ·批间重复性试验结果 | 第39-40页 |
| ·比较试验 | 第40-41页 |
| ·与中和试验检测结果的比较 | 第40页 |
| ·与瑞典全病毒ELISA 检测试剂盒检测结果的比较 | 第40-41页 |
| ·应用建立的诊断方法检测国内部分地区样品的结果 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-46页 |
| ·牛病毒性腹泻病毒 E2 蛋白的表达及纯化 | 第42页 |
| ·BVDV E2 蛋白兔源多克隆抗体的制备 | 第42-43页 |
| ·蛋白兔源多克隆抗体的鉴定及应用 | 第43页 |
| ·BVDV E2 间接 ELISA 反应条件的优化 | 第43-44页 |
| ·BVDV E2 间接 ELISA 诊断方法判定标准的确定 | 第44-45页 |
| ·BVDV E2 间接 ELISA 诊断方法的初步应用及前景 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 附录 | 第55-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58页 |
