| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 植物MYB家族转录因子研究进展 | 第13-19页 |
| 1.1 植物MYB家族转录因子的结构特点及分类 | 第13-15页 |
| 1.2 植物MYB家族转录因子的起源与进化 | 第15页 |
| 1.3 植物MYB家族转录因子的生物学功能 | 第15-19页 |
| 1.3.1 植物苯丙烷类次生代谢的调节 | 第15-18页 |
| 1.3.2 植物细胞形态和模式建成的调控 | 第18页 |
| 1.3.3 植物激素合成及信号传导的调控 | 第18-19页 |
| 1.3.4 植物生物和非生物胁迫的应答调控 | 第19页 |
| 2 植物抗蚜性研究进展 | 第19-24页 |
| 2.1 植物抗蚜性机制的研究 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物抗蚜性机制类型 | 第20-21页 |
| 2.1.2 蚜虫诱导的植物防御途径 | 第21-22页 |
| 2.1.3 蚜虫诱导的植物免疫反应 | 第22页 |
| 2.2 植物抗蚜性基因工程研究进展 | 第22-23页 |
| 2.3 菊花抗蚜性研究进展 | 第23-24页 |
| 2.3.1 菊花的主要危害蚜虫—菊姬长管蚜的生物学特性 | 第23页 |
| 2.3.2 菊花抗蚜性生理与分子生物学研究进展 | 第23-24页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 菊花CmMYBs转录因子的克隆和序列分析 | 第25-35页 |
| 1 材料与方法 | 第25-30页 |
| 1.1 植物材料 | 第25页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第25-26页 |
| 1.2.1 试剂及菌株 | 第25-26页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第26页 |
| 1.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 1.3.1 总RNA的提取 | 第26页 |
| 1.3.2 1st-Strand cDNA的合成及检测 | 第26-27页 |
| 1.3.3 特异性引物的设计 | 第27页 |
| 1.3.4 3'RACE PCR | 第27页 |
| 1.3.5 5'RACE PCR | 第27-28页 |
| 1.3.6 cDNA全长和ORF序列的获得 | 第28-29页 |
| 1.3.7 序列分析及系统进化树构建 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-34页 |
| 2.1 菊花CmMYB58.1和CmMYB58.2基因的克隆 | 第30-31页 |
| 2.1.1 目的基因中间片段的获得 | 第30-31页 |
| 2.1.2 3'RACE和5'RACE-PCR结果 | 第31页 |
| 2.1.3 目的基因cDNA全长及ORF的获得 | 第31页 |
| 2.2 菊花CmMYB58.1和CmMYB58.2基因序列分析及系统进化关系 | 第31-34页 |
| 2.2.1 序列分析 | 第31-32页 |
| 2.2.2 氨基酸序列同源性比对 | 第32-33页 |
| 2.2.3 系统进化树构建 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 CmMYB58.1和CmMYB58.2的表达特性及转录激活活性分析 | 第35-47页 |
| 1 材料与方法 | 第36-39页 |
| 1.1 植物材料 | 第36页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第36页 |
| 1.2.1 试剂及菌株 | 第36页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第36页 |
| 1.3 实验方法 | 第36-39页 |
| 1.3.1 表达特性分析 | 第36-37页 |
| 1.3.2 转录激活活性分析 | 第37-38页 |
| 1.3.3 亚细胞定位分析 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| 2.1 蚜虫和机械伤处理后CmMYB58.1和CmMYB58.2的表达分析 | 第39-40页 |
| 2.2 CmMYB58.1和CmMYB58.2在不同组织器官中的表达分析 | 第40页 |
| 2.3 转录激活活性和亚细胞定位分析 | 第40-44页 |
| 2.3.1 pENTR1A-CmMYB58.1/CmMYB58.2载体的获得 | 第40-41页 |
| 2.3.2 重组载体pGBKT7-CmMYB58.1/CmMYB58.2的构建 | 第41-42页 |
| 2.3.3 重组载体pMDC43-CmMYB58.1/CmMYB58.2的构建 | 第42页 |
| 2.3.4 转录激活活性分析 | 第42-43页 |
| 2.3.5 亚细胞定位分析 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| 第四章 CmMYB58.1和CmMYB58.2的抗蚜性功能鉴定及其抗蚜性机制解析 | 第47-61页 |
| 1 材料与方法 | 第48-51页 |
| 1.1 植物材料 | 第48页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第48页 |
| 1.2.1 试剂及菌株 | 第48页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第48页 |
| 1.3 实验方法 | 第48-51页 |
| 1.3.1 遗传转化菊花'神马' | 第48-49页 |
| 1.3.2 转基因株系抗蚜性鉴定 | 第49页 |
| 1.3.3 转基因株系抗蚜机制研究 | 第49-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-58页 |
| 2.1 转基因株系的潮霉素检测 | 第51-52页 |
| 2.2 转基因株系的qRT-PCR检测 | 第52-53页 |
| 2.3 转基因株系的抗蚜性鉴定 | 第53-56页 |
| 2.3.1 转CmMYB58.1株系抗蚜性鉴定 | 第53-55页 |
| 2.3.2 转CmMYB58.2株系抗蚜性鉴定 | 第55-56页 |
| 2.4 CmMYB58.1和CmMYB58.2调节抗蚜性的机制研究 | 第56-58页 |
| 2.4.1 木质素自发荧光的观察 | 第56-57页 |
| 2.4.2 转基因株系中木质素生物合成相关基因的变化 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-61页 |
| 全文结论 | 第61-63页 |
| 创新之处 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录 | 第73-83页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
