| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 抗生素 | 第10-17页 |
| 1.1.1 抗生素和四环素 | 第10-11页 |
| 1.1.2 抗生素的滥用及残留情况 | 第11-14页 |
| 1.1.3 抗生素的残留的危害 | 第14-15页 |
| 1.1.3.1 细菌耐药性及耐药性基因 | 第14页 |
| 1.1.3.2 生态毒性 | 第14-15页 |
| 1.1.3.3 人体健康副作用 | 第15页 |
| 1.1.4 抗生素残留处理方法 | 第15-17页 |
| 1.2 微生物筛选与鉴定方法 | 第17-18页 |
| 1.3 抗生素细胞毒性研究方法 | 第18-21页 |
| 1.3.1 MTT法 | 第18-19页 |
| 1.3.2 血球计数法 | 第19页 |
| 1.3.3 MTS法 | 第19页 |
| 1.3.4 Annexin V-EGFP/PI双染法结合流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第19-20页 |
| 1.3.5 细胞周期试剂盒分析细胞周期 | 第20-21页 |
| 1.4 本研究的目的与主要内容 | 第21-23页 |
| 1.4.1 研究的目的 | 第21-22页 |
| 1.4.2 研究的主要内容 | 第22-23页 |
| 第二章 四环素降解菌的筛选、驯化及鉴定 | 第23-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.2 培养基 | 第24页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第24-25页 |
| 2.1.3.1 四环素母液 | 第24页 |
| 2.1.3.2 TE缓冲液 | 第24-25页 |
| 2.1.3.3 菌种基因提取液配制 | 第25页 |
| 2.1.4 土壤来源 | 第25页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 四环素降解菌种的选育 | 第26-27页 |
| 2.2.1.1 土壤采集 | 第26页 |
| 2.2.1.2 富集培养 | 第26页 |
| 2.2.1.3 驯化 | 第26-27页 |
| 2.2.1.4 分离纯化 | 第27页 |
| 2.2.2 降解率的测定及菌种确认 | 第27-28页 |
| 2.2.3 降解菌种的鉴定 | 第28-30页 |
| 2.2.3.1 菌株形态学实验 | 第28页 |
| 2.2.3.2 16SrRNA的鉴定 | 第28-30页 |
| 2.2.4 菌种生长曲线的测定 | 第30-31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-40页 |
| 2.3.0 四环素标准曲线 | 第31页 |
| 2.3.1 四环素降解菌的筛选 | 第31-34页 |
| 2.3.2 菌种鉴定 | 第34-40页 |
| 2.3.2.1 菌株形态学实验 | 第34页 |
| 2.3.2.2 16SrRNA鉴定 | 第34-40页 |
| 2.3.3 菌种生长曲线绘制 | 第40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-42页 |
| 第三章 四环素降解菌的降解性能的优化 | 第42-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第42页 |
| 3.1.2 培养基 | 第42-43页 |
| 3.1.3 四环素母液 | 第43页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第43页 |
| 3.1.5 菌种 | 第43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 3.2.1 培养条件的优化 | 第44页 |
| 3.2.1.1 培养基C源的优化 | 第44页 |
| 3.2.1.2 培养基N源的优化 | 第44页 |
| 3.2.1.3 培养基微量元素的优化 | 第44页 |
| 3.2.2 降解条件的优化 | 第44-46页 |
| 3.2.2.1 降解时间的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.2.2 降解初始pH的影响 | 第45页 |
| 3.2.2.3 降解温度的影响 | 第45页 |
| 3.2.2.4 降解时恒温摇床转速的影响 | 第45页 |
| 3.2.2.5 接种量的影响 | 第45页 |
| 3.2.2.6 四环素初始浓度的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.3 优化后降解效果试验 | 第46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-53页 |
| 3.3.1 培养条件优化 | 第46-48页 |
| 3.3.1.1 培养基C源的优化 | 第46-47页 |
| 3.3.1.2 培养基N源的优化 | 第47页 |
| 3.3.1.3 培养基微量元素的优化 | 第47-48页 |
| 3.3.2 降解条件优化 | 第48-52页 |
| 3.3.2.1 降解初始pH的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.2.2 降解温度的影响 | 第50页 |
| 3.3.2.3 降解时恒温摇床转速的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.2.4 接种量的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.2.5 四环素初始浓度的影响 | 第52页 |
| 3.3.3 降解效果最优试验 | 第52-53页 |
| 3.4 本章小结 | 第53-55页 |
| 第四章 四环素降解前后的细胞毒性研究 | 第55-66页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-57页 |
| 4.1.1 实验材料与试剂 | 第55-56页 |
| 4.1.2 实验仪器设备 | 第56页 |
| 4.1.3 供体细胞 | 第56页 |
| 4.1.4 细胞培养基 | 第56页 |
| 4.1.5 溶液配制 | 第56-57页 |
| 4.1.5.1 PBS溶液 | 第56-57页 |
| 4.1.5.2 MTT溶液 | 第57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第57-58页 |
| 4.2.1.1 复苏 | 第57页 |
| 4.2.1.2 传代培养 | 第57页 |
| 4.2.1.3 加药培养 | 第57-58页 |
| 4.2.2 细胞毒性MTT法分析 | 第58页 |
| 4.2.3 Annexin V-EGFP/PI双染液法流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第58-59页 |
| 4.2.4 细胞周期分析 | 第59页 |
| 4.3 实验结果 | 第59-65页 |
| 4.3.1 细胞毒性MTT法分析 | 第59-61页 |
| 4.3.2 细胞凋亡流式细胞仪分析 | 第61-63页 |
| 4.3.3 细胞周期试验 | 第63-65页 |
| 4.4 本章小结 | 第65-66页 |
| 总结与展望 | 第66-68页 |
| 总结 | 第66-67页 |
| 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 个人简历、在读期间已发表和录用的论文 | 第77页 |