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强化脂肪酸合成途径促进酿酒酵母合成己酸乙酯的研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 前言第10-23页
    1.1 白酒概况第10-11页
    1.2 白酒的分类及其风味物质概述第11-16页
        1.2.1 白酒的分类第11-13页
        1.2.2 白酒的风味物质第13-14页
        1.2.3 酯类对白酒风味的影响第14-16页
    1.3 己酸乙酯的主要合成途径及机理第16-20页
        1.3.1 酯化反应途径第17页
        1.3.2 醇酰基转移酶途径第17-19页
        1.3.3 影响酯类形成的主要因素第19-20页
    1.4 调控酿酒酵母己酸乙酯合成的研究进展第20-21页
    1.5 本论文的立题依据及研究内容第21-23页
        1.5.1 立题依据第21页
        1.5.2 研究内容第21-23页
2 材料与方法第23-45页
    2.1 实验材料与仪器第23-29页
        2.1.1 菌株与质粒第23-24页
        2.1.2 主要仪器第24页
        2.1.3 主要试剂第24-26页
        2.1.4 主要培养基第26-27页
        2.1.5 主要溶液第27-29页
    2.2 实验方法第29-41页
        2.2.1 引物设计第29-32页
        2.2.2 目的片段的获取及纯化第32-34页
        2.2.3 重组质粒的构建第34-37页
        2.2.4 酵母转化第37-38页
        2.2.5 KanMX筛选标记的去除第38页
        2.2.6 实时荧光定量PCR第38-41页
        2.2.7 生长曲线的测定第41页
        2.2.8 玉米原料液态白酒发酵工艺第41页
    2.3 分析方法第41-45页
        2.3.1 发酵速度的测定第41页
        2.3.2 酒精度测定第41-42页
        2.3.3 残余还原糖测定第42页
        2.3.4 乙酰辅酶A的测定方法第42-43页
        2.3.5 高级醇和酯类含量的测定第43-44页
        2.3.6 脂肪酸测定第44-45页
3 结果与讨论第45-69页
    3.1 FAA1和OPI1基因缺失酿酒酵母菌株的构建第45-51页
        3.1.1 FAA1基因缺失酿酒酵母菌株的构建第45-47页
        3.1.2 OPI1基因缺失酿酒酵母菌株的构建第47-48页
        3.1.3 突变株与亲本菌株生长性能的比较第48-49页
        3.1.4 玉米原料液态白酒发酵实验第49-51页
        3.1.5 小结第51页
    3.2 ACC1过表达突变株的构建第51-62页
        3.2.1 重组质粒YPA1K的构建和验证第51-53页
        3.2.2 过表达ACC1同时缺失FAA1基因突变株的构建第53-56页
        3.2.3 过表达ACC1同时缺失OPI1基因突变株的构建第56-58页
        3.2.4 突变株与亲本菌株生长性能的比较第58-59页
        3.2.5 玉米原料液态白酒发酵实验第59-61页
        3.2.6 ACC1基因表达水平的测定第61-62页
        3.2.7 小结第62页
    3.3 FAS1和FAS2基因分别过表达突变株的构建第62-69页
        3.3.1 重组质粒YPF1K和YPF2K的构建和验证第62页
        3.3.2 过表达FAS1同时缺失FAA1基因突变株的构建第62页
        3.3.3 过表达FAS1同时缺失OPI1基因突变株的构建第62页
        3.3.4 过表达FAS2同时缺失FAA1基因突变株的构建第62页
        3.3.5 过表达FAS2同时缺失OPI1基因突变株的构建第62页
        3.3.6 突变株与亲本菌株生长性能的比较第62-63页
        3.3.7 玉米原料液态白酒发酵实验第63-66页
        3.3.8 FAS1和FAS2基因表达水平的测定第66-67页
        3.3.9 乙酸、乙酰辅酶A和乙酸乙酯含量比较第67-68页
        3.3.10 小结第68-69页
4 结论第69-70页
5 展望第70-71页
6 参考文献第71-77页
7 攻读硕士学位期间发表论文第77-78页
8 致谢第78页

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