| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 主要符号对照表 | 第16-17页 |
| 文献综述 | 第17-32页 |
| 第一章 绒山羊毛囊周期性调控及毛囊再生的研究进展 | 第17-27页 |
| 1.1 绒山羊毛囊基本结构 | 第17-19页 |
| 1.1.1 毛囊结构 | 第17-18页 |
| 1.1.2 绒山羊毛囊与毛囊群结构 | 第18-19页 |
| 1.2 毛囊周期调控 | 第19-27页 |
| 1.2.1 毛囊的周期性生长变化 | 第19-22页 |
| 1.2.2 毛囊干细胞参与毛囊再生 | 第22-25页 |
| 1.2.3 毛乳头细胞参与毛囊再生 | 第25-27页 |
| 第二章 外泌体及转录组测序对毛囊周期性调控的研究进展 | 第27-32页 |
| 2.1 外泌体简介 | 第27-28页 |
| 2.2 外泌体对毛囊周期性调控的研究进展 | 第28-29页 |
| 2.3 转录组测序在绒山羊毛囊周期性调控研究中的应用进展 | 第29-30页 |
| 2.4 研究目的与意义 | 第30-32页 |
| 试验研究 | 第32-98页 |
| 第三章 陕北白绒山羊毛囊干细胞的分离培养及鉴定 | 第32-40页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-34页 |
| 3.1.1 主要试剂与仪器 | 第33页 |
| 3.1.2 陕北白绒山羊HFSCs的分离培养 | 第33页 |
| 3.1.3 陕北白绒山羊HFSCs的纯化 | 第33页 |
| 3.1.4 透射电镜观察 | 第33-34页 |
| 3.1.5 陕北白绒山羊HFSCs增殖能力检测 | 第34页 |
| 3.1.6 陕北白绒山羊HFSCs的鉴定 | 第34页 |
| 3.2 结果与分析 | 第34-38页 |
| 3.2.1 陕北白绒山羊HFSCs形态学特征 | 第34-35页 |
| 3.2.2 陕北白绒山羊HFSCs增殖能力检测 | 第35-36页 |
| 3.2.3 陕北白绒山羊HFSCs鉴定 | 第36-38页 |
| 3.3 讨论 | 第38-39页 |
| 3.4 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 陕北白绒山羊毛囊干细胞和毛囊细胞差异m RNA和mi RNA的联合分析 | 第40-70页 |
| 4.1 材料与方法 | 第40-46页 |
| 4.1.1 样品采集 | 第40页 |
| 4.1.2 总RNA提取与鉴定 | 第40-41页 |
| 4.1.3 mRNA及miRNA分析流程 | 第41页 |
| 4.1.4 mRNA和miRNA联合分析方案 | 第41-42页 |
| 4.1.5 文库构建及测序 | 第42-43页 |
| 4.1.6 测序数据质控 | 第43-44页 |
| 4.1.7 测序数据比对分析 | 第44页 |
| 4.1.8 基因结构分析 | 第44页 |
| 4.1.9 基因水平分析 | 第44页 |
| 4.1.10 miRNA分类注释 | 第44-45页 |
| 4.1.11 mRNA及miRNA差异表达分析 | 第45页 |
| 4.1.12 miRNA靶基因预测 | 第45页 |
| 4.1.13 转录组数据差异基因功能分析及差异mi RNA靶基因富集分析 | 第45-46页 |
| 4.1.14 实时定量PCR验证RNA-seq数据的可靠性 | 第46页 |
| 4.2 结果与分析 | 第46-67页 |
| 4.2.1 测序数据的质量评控 | 第46-49页 |
| 4.2.2 测序数据比对分析 | 第49-51页 |
| 4.2.3 基因结构分析 | 第51-53页 |
| 4.2.4 基因水平分析 | 第53-55页 |
| 4.2.5 miRNA分类注释 | 第55-58页 |
| 4.2.6 mRNA及miRNA差异基因联合分析 | 第58-60页 |
| 4.2.7 基因功能分析 | 第60-63页 |
| 4.2.8 影响HFSCs增殖分化的重要信号通路基因 | 第63-65页 |
| 4.2.9 候选mi RNA网络调控图谱 | 第65-66页 |
| 4.2.10 实时定量PCR验证m RNA及mi RNA测序数据 | 第66-67页 |
| 4.3 讨论 | 第67-69页 |
| 4.3.1 全转录组研究必要性及有效性 | 第67页 |
| 4.3.2 差异miRNA鉴定及表达分析 | 第67-68页 |
| 4.3.3 mRNA-miRNA联合分析可行性 | 第68页 |
| 4.3.4 候选miRNA和差异表达基因的选取及功能分析 | 第68-69页 |
| 4.4 小结 | 第69-70页 |
| 第五章 陕北白绒山羊毛乳头细胞及其分泌的外泌体mi RNA测序分析 | 第70-86页 |
| 5.1 材料与方法 | 第70-72页 |
| 5.1.1 试验动物及样品采集 | 第70-71页 |
| 5.1.2 皮肤样品切片制作与H&E染色 | 第71页 |
| 5.1.3 DPCs来源的外泌体的分离鉴定及Di I标记 | 第71页 |
| 5.1.4 Di I标记的DPCs及其外泌体与HFSCs共培养 | 第71页 |
| 5.1.5 总RNA提取与鉴定 | 第71页 |
| 5.1.6 文库制备及测序分析 | 第71-72页 |
| 5.2 结果与分析 | 第72-83页 |
| 5.2.1 陕北白绒山羊毛生长期和休止期皮肤样品H&E染色观察毛囊结构 | 第72页 |
| 5.2.2 陕北白绒山羊来源外泌体的分离及鉴定 | 第72-73页 |
| 5.2.3 陕北白绒山羊DPCs来源外泌体的运输及功能 | 第73-74页 |
| 5.2.4 陕北白绒山羊DPCs及其分泌的外泌体的总RNA样品质量检测 | 第74-75页 |
| 5.2.5 small RNA的文库构建及库检 | 第75-77页 |
| 5.2.6 miRNA的差异表达和靶基因预测及功能分析 | 第77-83页 |
| 5.3 讨论 | 第83-84页 |
| 5.4 小结 | 第84-86页 |
| 第六章 毛乳头细胞来源外泌体mi RNA225p和let-7b-5p在毛囊干细胞中的功能研究 | 第86-98页 |
| 6.1 试验材料与方法 | 第86-89页 |
| 6.1.1 主要试剂与仪器 | 第86-87页 |
| 6.1.2 靶基因与靶位点的验证 | 第87-88页 |
| 6.1.3 miR225p和let-7b-5p影响陕北白绒山羊HFSCs增殖的检测 | 第88-89页 |
| 6.1.4 miR225p和let-7b-5p影响陕北白绒山羊HFSCs分化的检测 | 第89页 |
| 6.2 结果与分析 | 第89-96页 |
| 6.2.1 成功构建了mi R225p相关靶基因的双荧光素酶报告载体 | 第89-91页 |
| 6.2.2 双荧光素酶报告试验分析mi R225p和let-7b-5p与其靶基因的靶向关系 | 第91-92页 |
| 6.2.3 过表达mi R225p经由AKT信号通路抑制HFSCs的增殖 | 第92-93页 |
| 6.2.4 过表达mi R225p对HFSCs向毛囊分化的影响 | 第93-94页 |
| 6.2.5 过表达let-b-5p经由AKT信号通路抑制HFSCs的增殖 | 第94-95页 |
| 6.2.6 过表达let-7b-5p促进HFSCs的向毛囊细胞分化 | 第95-96页 |
| 6.3 讨论 | 第96-97页 |
| 6.3.1 mi RNA225p对HFSCs的增殖分的影响 | 第96页 |
| 6.3.2 let-7b-5对HFSCs的增殖分化的影响 | 第96-97页 |
| 6.4 小结 | 第97-98页 |
| 结论 | 第98-99页 |
| 创新点 | 第99-100页 |
| 还需进一步深入研究的问题 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-117页 |
| 附录 | 第117-190页 |
| 致谢 | 第190-191页 |
| 个人简历 | 第191-194页 |
