摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4页 |
前言 | 第8-9页 |
第1章 文献综述 | 第9-19页 |
1.1 虾青素 | 第9-12页 |
1.1.1 虾青素简介 | 第9-10页 |
1.1.2 虾青素的生物合成 | 第10-12页 |
1.2 酿酒酵母比较基因组学研究现状 | 第12-14页 |
1.2.1 酿酒酵母的基因组结构 | 第12-13页 |
1.2.2 基因组差异类型 | 第13-14页 |
1.3 基因组重排概述 | 第14-16页 |
1.3.1 基因组重排的研究进展 | 第14-15页 |
1.3.2 合成型酵母的基因组重排 | 第15-16页 |
1.4 本研究的意义和内容 | 第16-19页 |
第2章 材料与方法 | 第19-35页 |
2.1 菌株 | 第19-20页 |
2.1.1 酿酒酵母 | 第19页 |
2.1.2 大肠杆菌 | 第19-20页 |
2.2 仪器 | 第20-21页 |
2.3 试剂及配置 | 第21-24页 |
2.3.1 实验试剂 | 第21-22页 |
2.3.2 常用试剂配制 | 第22-24页 |
2.4 培养基配置 | 第24-25页 |
2.5 基因操作方法 | 第25-33页 |
2.5.1 目的片段的扩增 | 第25-26页 |
2.5.2 目的片段的回收 | 第26-27页 |
2.5.3 DNA的限制酶消化 | 第27页 |
2.5.4 DNA的连接 | 第27-28页 |
2.5.5 大肠杆菌转化 | 第28页 |
2.5.6 转化子的筛选 | 第28-29页 |
2.5.7 大肠质粒提取 | 第29-30页 |
2.5.8 酿酒酵母转化 | 第30-31页 |
2.5.9 酿酒酵母菌落PCR验证 | 第31页 |
2.5.10 酿酒酵母基因组提取 | 第31-32页 |
2.5.11 酵母交配型的验证 | 第32页 |
2.5.12 构建二倍体酵母细胞 | 第32-33页 |
2.5.13 酵母高效生孢 | 第33页 |
2.5.14 酵母拆孢 | 第33页 |
2.6 发酵培养与产物提取 | 第33-35页 |
2.6.1 摇瓶发酵培养 | 第33页 |
2.6.2 虾青素提取 | 第33-34页 |
2.6.3 产物检测 | 第34-35页 |
第3章 虾青素突变株比较基因组重分析及靶点验证 | 第35-53页 |
3.1 引言 | 第35页 |
3.2 对照菌基因组重测序的基本信息 | 第35-38页 |
3.3 对照菌与突变菌基因组比较结果 | 第38-41页 |
3.3.1 基因变异的基本信息 | 第38-39页 |
3.3.2 编码区变异分析 | 第39-41页 |
3.4 验证提高虾青素产量的靶点 | 第41-47页 |
3.4.1 发现靶点 | 第41-42页 |
3.4.2 靶点敲除对细胞生长和虾青素产量的影响 | 第42-45页 |
3.4.3 敲除CSS1 对细胞膜组分以及能量代谢的影响 | 第45-47页 |
3.5 发酵罐(5L)分批补料发酵提高虾青素产量 | 第47-51页 |
3.5.1 发酵罐(5L)分批补料发酵 | 第48-50页 |
3.5.2 发酵罐(5L)类胡萝卜素组成趋势 | 第50-51页 |
3.6 小结 | 第51-53页 |
第4章 基因组重排提高产虾青素酿酒酵母产量 | 第53-63页 |
4.1 引言 | 第53页 |
4.2 二倍体酿酒酵母基因组重排 | 第53-59页 |
4.2.1 合成型酿酒酵母与产虾青素酿酒酵母细胞融合 | 第53-56页 |
4.2.2 基因组重排质粒的构建 | 第56-57页 |
4.2.3 二倍体酿酒酵母基因组重排 | 第57-59页 |
4.3 基因组重排酵母菌株的发酵 | 第59页 |
4.4 二倍体酿酒酵母细胞拆孢和单倍体孢子发酵 | 第59-61页 |
4.4.1 基因组重排二倍体酿酒酵母细胞拆孢 | 第59-60页 |
4.4.2 单倍体孢子发酵 | 第60-61页 |
4.5 小结 | 第61-63页 |
第5章 结论与展望 | 第63-65页 |
5.1 结论 | 第63-64页 |
5.2 展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-75页 |
附录 | 第75-81页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第81-83页 |
致谢 | 第83页 |