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橡胶树白粉菌响应基因HbAPC10的分子调控机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 前言第10-24页
    1.1 橡胶树白粉病的研究进展第10页
    1.2 植物泛素-蛋白酶体系统的结构与功能第10-15页
        1.2.1 泛素-蛋白酶体系统(UPS)及其组成第10-12页
        1.2.2 UPS在植物生长发育中的功能第12-13页
        1.2.3 UPS在植物抗病和抗逆中的功能第13-15页
    1.3 APC复合酶体的结构和功能第15-19页
        1.3.1 APC/C的亚基组成和功能第15-16页
        1.3.2 APC/C结构与功能第16-18页
        1.3.3 不同物种中Apc10的功能第18-19页
    1.4 天然橡胶合成过程第19-22页
        1.4.1 橡胶树胶乳中的类异戊二烯生物合成第19-21页
        1.4.2 天然橡胶对橡胶树的保护作用第21-22页
    1.5 本研究的背景及目的和意义第22-23页
    1.6 技术路线第23-24页
2 材料和方法第24-44页
    2.1 材料和试剂第24-27页
        2.1.1 植物材料第24页
        2.1.2 载体及菌株第24页
        2.1.3 生化试剂及实验仪器第24-25页
        2.1.4 培养基配制第25-26页
        2.1.5 试剂配制及物品准备第26-27页
    2.2 实验方法及步骤第27-44页
        2.2.1 橡胶树不同组织总RNA提取第27-28页
        2.2.2 cDNA合成第28-30页
        2.2.3 HbAPC10表达模式分析第30-31页
        2.2.4 HbAPC10结构与功能分析第31-37页
        2.2.5 cDNA文库构建第37-39页
        2.2.6 HbAPC10毒性检测第39-40页
        2.2.7 基于酵母双杂交筛选HbAPC10互作蛋白第40-41页
        2.2.8 点对点酵母双杂交验证HbAPC10与互作蛋白的互作关系第41-42页
        2.2.9 HbAPC10与HbPRS4互作验证第42-43页
        2.2.10 HbPRS4表达分析第43-44页
3 结果与分析第44-65页
    3.1 橡胶树白粉菌响应基因HbAPC10的克隆及其表达模式分析第44-49页
        3.1.1 HbAPC10基因克隆与分析第44-46页
        3.1.2 HbAPC10同源性分析及进化树分析第46-47页
        3.1.3 HbAPC10表达模式分析第47-49页
    3.2 HbAPC10亚细胞定位及其在酵母突变体中的功能互补验证第49-52页
        3.2.3 HbAPC10亚细胞定位第49-51页
        3.2.4 HbAPC10能够恢复温度敏感型裂殖酵母突变体apc10ts的功能第51页
        3.2.5 HbAPC10与细胞分裂的关系鉴定第51-52页
    3.3 橡胶树胶乳均一化酵母双杂交cDNA文库构建及其质量分析第52-53页
        3.3.1 总RNA提取第52页
        3.3.2 ds-cDNA的合成第52-53页
        3.3.3 均一化酵母双杂交文库构建及质量评价第53页
    3.4 基于酵母双杂交筛选与HbAPC10互作的蛋白及其互作关系验证第53-61页
        3.4.1 HbAPC10酵母表达双杂交诱饵载体构建和自激活检测第53-54页
        3.4.2 HbAPC10互作蛋白筛选第54-55页
        3.4.3 HbAPC10互作蛋白基因克隆与酵母表达载体构建第55-60页
        3.4.4 点对点酵母双杂交验证HbAPC10与互作蛋白的互作关系第60-61页
    3.5 HbAPC10互作蛋的表达模式分析第61-65页
        3.5.1 HbPRS4组织表达差异第61-62页
        3.5.2 HbPRS4在橡胶树白粉菌处理时的表达模式第62-63页
        3.5.3 HbPRS4不同激素处理的表达模式第63-65页
4 讨论第65-69页
    4.1 APC10是APC/C的一个亚基,不同物种APC10序列比较保守橡胶树HbAPC10能够互补酵母突变体的功能,具有功能的保守性第65页
    4.2 HbSRPP与HbAPC10互作直接调控天然橡胶合成和防御反应过程第65-66页
    4.3 HbPRS4与HbAPC10互作调控橡胶树的能量和物质代谢过程第66-67页
    4.4 HbAPC10参与对白粉菌等胁迫响应和激素信号传导过程第67-69页
5 结论第69-70页
6 创新点第70-71页
参考文献第71-84页
缩略词第84-85页
附录第85-86页
致谢第86页

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