摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 前言 | 第10-24页 |
1.1 橡胶树白粉病的研究进展 | 第10页 |
1.2 植物泛素-蛋白酶体系统的结构与功能 | 第10-15页 |
1.2.1 泛素-蛋白酶体系统(UPS)及其组成 | 第10-12页 |
1.2.2 UPS在植物生长发育中的功能 | 第12-13页 |
1.2.3 UPS在植物抗病和抗逆中的功能 | 第13-15页 |
1.3 APC复合酶体的结构和功能 | 第15-19页 |
1.3.1 APC/C的亚基组成和功能 | 第15-16页 |
1.3.2 APC/C结构与功能 | 第16-18页 |
1.3.3 不同物种中Apc10的功能 | 第18-19页 |
1.4 天然橡胶合成过程 | 第19-22页 |
1.4.1 橡胶树胶乳中的类异戊二烯生物合成 | 第19-21页 |
1.4.2 天然橡胶对橡胶树的保护作用 | 第21-22页 |
1.5 本研究的背景及目的和意义 | 第22-23页 |
1.6 技术路线 | 第23-24页 |
2 材料和方法 | 第24-44页 |
2.1 材料和试剂 | 第24-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 载体及菌株 | 第24页 |
2.1.3 生化试剂及实验仪器 | 第24-25页 |
2.1.4 培养基配制 | 第25-26页 |
2.1.5 试剂配制及物品准备 | 第26-27页 |
2.2 实验方法及步骤 | 第27-44页 |
2.2.1 橡胶树不同组织总RNA提取 | 第27-28页 |
2.2.2 cDNA合成 | 第28-30页 |
2.2.3 HbAPC10表达模式分析 | 第30-31页 |
2.2.4 HbAPC10结构与功能分析 | 第31-37页 |
2.2.5 cDNA文库构建 | 第37-39页 |
2.2.6 HbAPC10毒性检测 | 第39-40页 |
2.2.7 基于酵母双杂交筛选HbAPC10互作蛋白 | 第40-41页 |
2.2.8 点对点酵母双杂交验证HbAPC10与互作蛋白的互作关系 | 第41-42页 |
2.2.9 HbAPC10与HbPRS4互作验证 | 第42-43页 |
2.2.10 HbPRS4表达分析 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-65页 |
3.1 橡胶树白粉菌响应基因HbAPC10的克隆及其表达模式分析 | 第44-49页 |
3.1.1 HbAPC10基因克隆与分析 | 第44-46页 |
3.1.2 HbAPC10同源性分析及进化树分析 | 第46-47页 |
3.1.3 HbAPC10表达模式分析 | 第47-49页 |
3.2 HbAPC10亚细胞定位及其在酵母突变体中的功能互补验证 | 第49-52页 |
3.2.3 HbAPC10亚细胞定位 | 第49-51页 |
3.2.4 HbAPC10能够恢复温度敏感型裂殖酵母突变体apc10ts的功能 | 第51页 |
3.2.5 HbAPC10与细胞分裂的关系鉴定 | 第51-52页 |
3.3 橡胶树胶乳均一化酵母双杂交cDNA文库构建及其质量分析 | 第52-53页 |
3.3.1 总RNA提取 | 第52页 |
3.3.2 ds-cDNA的合成 | 第52-53页 |
3.3.3 均一化酵母双杂交文库构建及质量评价 | 第53页 |
3.4 基于酵母双杂交筛选与HbAPC10互作的蛋白及其互作关系验证 | 第53-61页 |
3.4.1 HbAPC10酵母表达双杂交诱饵载体构建和自激活检测 | 第53-54页 |
3.4.2 HbAPC10互作蛋白筛选 | 第54-55页 |
3.4.3 HbAPC10互作蛋白基因克隆与酵母表达载体构建 | 第55-60页 |
3.4.4 点对点酵母双杂交验证HbAPC10与互作蛋白的互作关系 | 第60-61页 |
3.5 HbAPC10互作蛋的表达模式分析 | 第61-65页 |
3.5.1 HbPRS4组织表达差异 | 第61-62页 |
3.5.2 HbPRS4在橡胶树白粉菌处理时的表达模式 | 第62-63页 |
3.5.3 HbPRS4不同激素处理的表达模式 | 第63-65页 |
4 讨论 | 第65-69页 |
4.1 APC10是APC/C的一个亚基,不同物种APC10序列比较保守橡胶树HbAPC10能够互补酵母突变体的功能,具有功能的保守性 | 第65页 |
4.2 HbSRPP与HbAPC10互作直接调控天然橡胶合成和防御反应过程 | 第65-66页 |
4.3 HbPRS4与HbAPC10互作调控橡胶树的能量和物质代谢过程 | 第66-67页 |
4.4 HbAPC10参与对白粉菌等胁迫响应和激素信号传导过程 | 第67-69页 |
5 结论 | 第69-70页 |
6 创新点 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-84页 |
缩略词 | 第84-85页 |
附录 | 第85-86页 |
致谢 | 第86页 |