摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一部分 文献综述 | 第10-23页 |
第一章 柑橘黄龙病的研究概况 | 第11-15页 |
1 发生与分布 | 第11-12页 |
2 柑橘黄龙病流行规律及危害 | 第12页 |
3 柑橘黄龙病的防治 | 第12-15页 |
3.1 严格实施检疫 | 第12-13页 |
3.2 培育和推广使用无病苗木 | 第13页 |
3.3 及时挖除病株 | 第13页 |
3.4 严格防除柑橘木虱 | 第13页 |
3.5 加强管理 | 第13-15页 |
第二章 植物病原菌检测技术研究进展 | 第15-21页 |
1 传统检测技术 | 第15页 |
2 血清学检测技术 | 第15-16页 |
2.1 酶联免疫吸附测定法(ELISA) | 第15页 |
2.2 免疫荧光技术 | 第15-16页 |
2.3 免疫金银染色 | 第16页 |
3 分子生物学检测技术 | 第16-21页 |
3.1 分子杂交检测技术 | 第16页 |
3.2 基因芯片技术 | 第16-17页 |
3.3 PCR技术 | 第17-19页 |
3.4 环介导等温扩增技术(LAMP) | 第19-20页 |
3.5 Padlock探针 | 第20-21页 |
第三章 生物信息学与分子检测靶点的发掘 | 第21-23页 |
1 生物信息学简介 | 第21页 |
2 生物信息数据库 | 第21页 |
3 序列分析方法 | 第21-23页 |
3.1 序列比对 | 第21-22页 |
3.2 序列比对工具 | 第22-23页 |
第二部分 研究内容 | 第23-59页 |
第一章 发掘韧皮部杆菌亚洲种分子检测靶点 | 第25-29页 |
1 方法与流程 | 第25-27页 |
1.1 软件工具 | 第25页 |
1.2 本地基因组数据库构建 | 第25-26页 |
1.3 柑橘黄龙病菌亚洲种核酸序列来源 | 第26页 |
1.4 BLASTN自动比对 | 第26页 |
1.5 比对结果筛选 | 第26-27页 |
2 结果与分析 | 第27页 |
3 讨论与结论 | 第27-29页 |
第二章 经典PCR检测柑橘黄龙病菌 | 第29-41页 |
1 材料与方法 | 第29-37页 |
1.1 样品 | 第29页 |
1.2 参试菌株 | 第29-31页 |
1.3 培养基 | 第31-32页 |
1.4 抗生素的制备和显色剂 | 第32页 |
1.5 实验试剂与仪器 | 第32页 |
1.6 方法 | 第32-37页 |
1.7 标准品的制备 | 第37页 |
1.8 实际样品检测 | 第37页 |
2 结果与分析 | 第37-39页 |
2.1 引物的特异性验证 | 第37-38页 |
2.2 引物灵敏度验证 | 第38-39页 |
2.3 实际样品检测 | 第39页 |
3 讨论与结论 | 第39-41页 |
第三章 TaqMan探针荧光定量PCR检测黄龙病菌 | 第41-49页 |
1 材料与方法 | 第41-44页 |
1.1 样品 | 第41页 |
1.2 参试菌株 | 第41页 |
1.3 培养基 | 第41-42页 |
1.4 实验试剂与仪器 | 第42页 |
1.5 方法 | 第42-44页 |
1.6 实际样品检测 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-48页 |
2.1 标准质粒的构建 | 第45页 |
2.2 标准曲线的建立 | 第45页 |
2.3 特异性实验 | 第45-46页 |
2.4 灵敏度实验 | 第46-47页 |
2.5 重复性试验 | 第47页 |
2.6 实际样品检测 | 第47-48页 |
3 讨论与结论 | 第48-49页 |
第四章 梨火疫病菌T6SS核心基因clpV的功能初析 | 第49-59页 |
1 材料与方法 | 第50-56页 |
1.1 实验涉及的菌株及质粒 | 第50页 |
1.2 培养基、培养条件及抗生素 | 第50-51页 |
1.3 酶、抗生素和化学试剂抗生素 | 第51页 |
1.4 方法 | 第51-55页 |
1.5 梨幼果致病性的测定 | 第55-56页 |
1.6 CPC法测定梨火疫毒素(amylovoran) | 第56页 |
2 结果与分析 | 第56-57页 |
2.1 T6SS影响梨火疫病菌的致病性 | 第56页 |
2.2 T6SS影响梨火疫毒素的产量 | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-59页 |
全文总结 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第67-69页 |
致谢 | 第69页 |