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柑橘黄龙病菌分子检测技术的建立应用及梨火疫病菌T6SS核心基因clpV的功能初析

摘要第7-8页
ABSTRACT第8-9页
第一部分 文献综述第10-23页
    第一章 柑橘黄龙病的研究概况第11-15页
        1 发生与分布第11-12页
        2 柑橘黄龙病流行规律及危害第12页
        3 柑橘黄龙病的防治第12-15页
            3.1 严格实施检疫第12-13页
            3.2 培育和推广使用无病苗木第13页
            3.3 及时挖除病株第13页
            3.4 严格防除柑橘木虱第13页
            3.5 加强管理第13-15页
    第二章 植物病原菌检测技术研究进展第15-21页
        1 传统检测技术第15页
        2 血清学检测技术第15-16页
            2.1 酶联免疫吸附测定法(ELISA)第15页
            2.2 免疫荧光技术第15-16页
            2.3 免疫金银染色第16页
        3 分子生物学检测技术第16-21页
            3.1 分子杂交检测技术第16页
            3.2 基因芯片技术第16-17页
            3.3 PCR技术第17-19页
            3.4 环介导等温扩增技术(LAMP)第19-20页
            3.5 Padlock探针第20-21页
    第三章 生物信息学与分子检测靶点的发掘第21-23页
        1 生物信息学简介第21页
        2 生物信息数据库第21页
        3 序列分析方法第21-23页
            3.1 序列比对第21-22页
            3.2 序列比对工具第22-23页
第二部分 研究内容第23-59页
    第一章 发掘韧皮部杆菌亚洲种分子检测靶点第25-29页
        1 方法与流程第25-27页
            1.1 软件工具第25页
            1.2 本地基因组数据库构建第25-26页
            1.3 柑橘黄龙病菌亚洲种核酸序列来源第26页
            1.4 BLASTN自动比对第26页
            1.5 比对结果筛选第26-27页
        2 结果与分析第27页
        3 讨论与结论第27-29页
    第二章 经典PCR检测柑橘黄龙病菌第29-41页
        1 材料与方法第29-37页
            1.1 样品第29页
            1.2 参试菌株第29-31页
            1.3 培养基第31-32页
            1.4 抗生素的制备和显色剂第32页
            1.5 实验试剂与仪器第32页
            1.6 方法第32-37页
            1.7 标准品的制备第37页
            1.8 实际样品检测第37页
        2 结果与分析第37-39页
            2.1 引物的特异性验证第37-38页
            2.2 引物灵敏度验证第38-39页
            2.3 实际样品检测第39页
        3 讨论与结论第39-41页
    第三章 TaqMan探针荧光定量PCR检测黄龙病菌第41-49页
        1 材料与方法第41-44页
            1.1 样品第41页
            1.2 参试菌株第41页
            1.3 培养基第41-42页
            1.4 实验试剂与仪器第42页
            1.5 方法第42-44页
            1.6 实际样品检测第44页
        2 结果与分析第44-48页
            2.1 标准质粒的构建第45页
            2.2 标准曲线的建立第45页
            2.3 特异性实验第45-46页
            2.4 灵敏度实验第46-47页
            2.5 重复性试验第47页
            2.6 实际样品检测第47-48页
        3 讨论与结论第48-49页
    第四章 梨火疫病菌T6SS核心基因clpV的功能初析第49-59页
        1 材料与方法第50-56页
            1.1 实验涉及的菌株及质粒第50页
            1.2 培养基、培养条件及抗生素第50-51页
            1.3 酶、抗生素和化学试剂抗生素第51页
            1.4 方法第51-55页
            1.5 梨幼果致病性的测定第55-56页
            1.6 CPC法测定梨火疫毒素(amylovoran)第56页
        2 结果与分析第56-57页
            2.1 T6SS影响梨火疫病菌的致病性第56页
            2.2 T6SS影响梨火疫毒素的产量第56-57页
        3 讨论第57-59页
全文总结第59-61页
参考文献第61-67页
攻读学位期间发表论文情况第67-69页
致谢第69页

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