| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 第一章 TGF-β1诱导大鼠肝星状细胞-T6细胞系活化及上皮间质转化 | 第15-52页 |
| 1 前言 | 第15-21页 |
| 1.1 肝硬化疾病的现状 | 第15-16页 |
| 1.2 肝纤维化与肝硬化的关系 | 第16页 |
| 1.3 肝星状细胞的起源与主要功能 | 第16-18页 |
| 1.3.1 肝星状细胞起源 | 第16-17页 |
| 1.3.2 肝星状细胞的主要功能 | 第17-18页 |
| 1.3.2.1 肝星状细胞和肝脏发育 | 第17页 |
| 1.3.2.2 肝星状细胞与肝纤维化发生 | 第17-18页 |
| 1.4 上皮-间质转化的特征 | 第18-20页 |
| 1.5 本研究的意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1 主要仪器与材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要实验试剂及耗材 | 第22-24页 |
| 2.2 细胞培养 | 第24-26页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第25页 |
| 2.2.2 细胞增殖及传代 | 第25-26页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第26页 |
| 2.3 主要实验方法 | 第26-35页 |
| 2.3.1 MTT法筛选TGF-β1的最适干预浓度 | 第26-27页 |
| 2.3.2 倒置相差显微镜观察细胞形态改变 | 第27-28页 |
| 2.3.3 免疫荧光染色法鉴定F-actin的表达 | 第28-29页 |
| 2.3.4 RT-qRCR检测α-SMA，N-cadherin,vimentin,E-cadherin, Smad4基因表达 | 第29-32页 |
| 2.3.5 Western blot检测α-SMA,N-cadherin,Vimentin,E-cadherin,Smad4蛋白表达 | 第32-34页 |
| 2.3.6 统计学分析方法 | 第34-35页 |
| 3 主要实验结果 | 第35-44页 |
| 3.1 不同浓度TGF-β1对HSC-T6存活率的影响 | 第35-36页 |
| 3.2 TGF-β1对细胞形态的影响 | 第36-37页 |
| 3.3 TGF-β1对细胞内F-actin的影响 | 第37-38页 |
| 3.4 RNA的完整性 | 第38-39页 |
| 3.5 TGF-β1对α-SMA和N-cadherin、vimentin、 E-cadherin mRNA表达影响 | 第39页 |
| 3.6 TGF-β1对HSC-T6中Smad4 mRNA表达影响 | 第39-41页 |
| 3.7 TGF-β1对α-SMA和N-cadherin、vimentin、E-cadherin蛋白表达影响 | 第41-42页 |
| 3.8 TGF-β1对HSC-T6中Smad4蛋白表达影响 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 第二章 microRNA-122对TGF-β1诱导大鼠肝星状细胞-T6细胞系上皮间质转化的调控作用研究 | 第52-64页 |
| 1 前言 | 第52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-56页 |
| 2.1 主要试剂与材料 | 第52-53页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第52-53页 |
| 2.1.2 主要材料 | 第53页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第53-56页 |
| 2.2.1 MicroRNA-122慢病毒载体的转染 | 第53-54页 |
| 2.2.2 荧光相差显微镜观察microRNA-122慢病毒载体的转染 | 第54页 |
| 2.2.3 RT-qRCR检测microRNA-122在细胞内转染后的表达 | 第54-55页 |
| 2.2.4 RT-qRCR检测转染后细胞中E-cadherin、Smad4基因表达 | 第55页 |
| 2.2.5 Western Blot法检测转染后细胞中N-cadherin蛋白表达 | 第55-56页 |
| 3 主要实验结果 | 第56-60页 |
| 3.1 MicroRNA-122慢病毒载体在细胞内的转染结果 | 第56-57页 |
| 3.2 转染后microRNA-122 mRNA在肝星状细胞内的表达 | 第57页 |
| 3.3 转染microRNA-122后,E-cadherin基因表达上调和Smad4基因表达下调 | 第57-58页 |
| 3.4 转染microRNA-122后,N-cadherin蛋白表达下调 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 6 不足与展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 附录 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
