摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第16-28页 |
1.1 雷公藤研究进展 | 第16-18页 |
1.1.1 概述 | 第16-17页 |
1.1.2 雷公藤的主要化学成分 | 第17-18页 |
1.2 植物内生菌研究进展 | 第18-25页 |
1.2.1 植物内生菌的概念 | 第18页 |
1.2.2 植物内生菌的普遍存在性和生物多样性 | 第18-20页 |
1.2.3 植物内生菌的生物学功能 | 第20-22页 |
1.2.4 植物内生菌活性代谢产物研究进展 | 第22-25页 |
1.3 雷公藤内生菌农用活性研究进展 | 第25-26页 |
1.4 选题依据及研究思路 | 第26-28页 |
第二章 雷公藤内生菌F4-20固体培养的优化 | 第28-34页 |
2.1 材料 | 第28页 |
2.1.1 试验菌株 | 第28页 |
2.1.2 主要仪器 | 第28页 |
2.1.3 主要试剂 | 第28页 |
2.2 方法 | 第28-29页 |
2.2.1 培养基的制备 | 第28-29页 |
2.2.2 接种方法 | 第29页 |
2.2.3 培养条件对菌落生长的影响 | 第29页 |
2.2.4 菌落生长的观察与测量 | 第29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-32页 |
2.3.1 不同培养温度对菌落生长的影响 | 第29-30页 |
2.3.2 不同碳源对菌落生长的影响 | 第30页 |
2.3.3 不同氮源对菌落生长的影响 | 第30-31页 |
2.3.4 不同初始pH对菌落生长的影响 | 第31-32页 |
2.3.5 不同生长素对菌落生长的影响 | 第32页 |
2.4 小结与讨论 | 第32-34页 |
第三章 雷公藤内生菌F4-20液体发酵基础培养基的筛选 | 第34-42页 |
3.1 材料 | 第34-35页 |
3.1.1 菌株 | 第34页 |
3.1.2 主要仪器 | 第34页 |
3.1.3 培养基 | 第34-35页 |
3.1.4 主要试剂 | 第35页 |
3.2 试验方法 | 第35-37页 |
3.2.1 内生菌的培养 | 第35页 |
3.2.2 胞内代谢产物的提取 | 第35页 |
3.2.3 菌丝生物量测定 | 第35页 |
3.2.4 菌丝粗提物对三龄蚊幼和月季长管蚜活性的测定 | 第35-36页 |
3.2.5 高效液相(HPLC)检测 | 第36-37页 |
3.2.6 液相色谱—质谱/质谱联用(LC-MS/MS)检测 | 第37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-39页 |
3.3.1 不同培养基对F4-20菌丝干重的影响 | 第37-38页 |
3.3.2 不同培养基对F4-20杀虫活性的影响 | 第38页 |
3.3.3 高效液相(HPLC)与液相色谱—质谱/质谱联用(LC-MS/MS)检测 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-42页 |
第四章 F4-20发酵培养基及发酵条件优化 | 第42-56页 |
4.1 F4-20发酵培养基的优化 | 第42-49页 |
4.1.1 材料 | 第42页 |
4.1.2 试验方法 | 第42-43页 |
4.1.3 结果与分析 | 第43-47页 |
4.1.4 讨论 | 第47-49页 |
4.2 摇瓶发酵条件的优化 | 第49-56页 |
4.2.1 材料 | 第49页 |
4.2.2 试验方法 | 第49-50页 |
4.2.3 结果与分析 | 第50-55页 |
4.2.4 讨论 | 第55-56页 |
第五章 不同诱导子对F4-20菌株生长和雷公藤吉碱生物合成的影响 | 第56-61页 |
5.1 材料 | 第56-57页 |
5.1.1 菌株 | 第56页 |
5.1.2 主要仪器 | 第56-57页 |
5.1.3 主要试剂 | 第57页 |
5.2 试验方法 | 第57页 |
5.2.1 内生菌培养 | 第57页 |
5.2.2 胞内代谢产物提取 | 第57页 |
5.2.3 高效液相(HPLC)检测 | 第57页 |
5.3 试验结果 | 第57-59页 |
5.3.1 MeJA、SA、H_2O_2、GSH对F4-20的生长影响 | 第57-58页 |
5.3.2 四种诱导分子对F4-20雷公藤吉碱的影响 | 第58-59页 |
5.4 讨论与结论 | 第59-61页 |
5.4.1 讨论 | 第59-60页 |
5.4.2 结论 | 第60-61页 |
第六章 雷公藤内生菌F4-20发酵罐条件初步优化 | 第61-69页 |
6.1 材料 | 第61页 |
6.1.1 供试菌株 | 第61页 |
6.1.2 主要仪器 | 第61页 |
6.1.3 培养基 | 第61页 |
6.2 试验方法 | 第61-62页 |
6.2.1 内生菌培养 | 第61页 |
6.2.2 发酵过程参数检测 | 第61-62页 |
6.2.3 菌丝粗提物对月季长管蚜活性的测定 | 第62页 |
6.3 结果与分析 | 第62-67页 |
6.3.1 5L发酵罐不同条件下F4-20生长情况 | 第62-64页 |
6.3.2 不同培养条件下F4-20杀虫活性 | 第64页 |
6.3.3 不同培养条件下F4-20营养消耗的变化 | 第64-65页 |
6.3.4 F4-20在15L发酵罐中的发酵 | 第65-66页 |
6.3.5 F4-20在70L发酵罐中的发酵 | 第66-67页 |
6.4 结果与讨论 | 第67-69页 |
第七章 雷公藤内生菌F4-20分子鉴定研究 | 第69-72页 |
7.1 材料 | 第69-70页 |
7.1.1 菌株 | 第69页 |
7.1.2 培养基 | 第69页 |
7.1.3 试剂 | 第69页 |
7.1.4 仪器 | 第69-70页 |
7.1.5 PCR扩增引物 | 第70页 |
7.2 试验方法 | 第70-71页 |
7.2.1 内生菌的培养 | 第70页 |
7.2.2 CTAB法提取内生菌F4-20的DNA | 第70页 |
7.2.3 PCR扩增16SrDNA序列 | 第70-71页 |
7.2.4 16S rDNA全序列测定 | 第71页 |
7.2.5 16S rDNA序列分析和系统发育树的构建 | 第71页 |
7.3 结果与分析 | 第71页 |
7.4 讨论 | 第71-72页 |
第八章 结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |
附图 | 第81-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
作者简介 | 第84页 |