摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
1 前言 | 第16-34页 |
1.1 乳杆菌的研究进展 | 第16-22页 |
1.1.1 乳杆菌分类 | 第16-17页 |
1.1.2 乳杆菌的生理功能 | 第17-19页 |
1.1.3 干酪乳杆菌的应用 | 第19-22页 |
1.2 乳杆菌噬菌体研究概述 | 第22-27页 |
1.2.1 乳杆菌噬菌体的分类 | 第22-23页 |
1.2.2 乳杆菌噬菌体的分离 | 第23-24页 |
1.2.3 乳杆菌噬菌体的分子特征 | 第24-25页 |
1.2.4 干酪乳杆菌噬菌体的研究进展 | 第25-26页 |
1.2.5 乳杆菌噬菌体的危害及防治 | 第26-27页 |
1.3 细菌与噬菌体相互作用研究进展 | 第27-32页 |
1.3.1 噬菌体感染细菌的相关机理 | 第27-28页 |
1.3.2 噬菌体感染对宿主细胞的影响 | 第28-29页 |
1.3.3 宿主菌抗噬菌体机制的研究进展 | 第29-32页 |
1.4 研究目的与意义 | 第32-34页 |
2 材料与方法 | 第34-61页 |
2.1 材料 | 第34-36页 |
2.1.1 菌株、噬菌体和载体 | 第34页 |
2.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第34页 |
2.1.3 试验动物及抗体制剂 | 第34-35页 |
2.1.4 引物 | 第35页 |
2.1.5 主要实验仪器与设备 | 第35-36页 |
2.1.6 培养基配制 | 第36页 |
2.1.7 主要溶液配制 | 第36页 |
2.2 方法 | 第36-61页 |
2.2.1 乳酸菌菌种活化和乳杆菌噬菌体的繁殖 | 第36-37页 |
2.2.2 乳杆菌噬菌体LJ基因组测序及分析 | 第37-40页 |
2.2.3 干酪乳杆菌噬菌体抗性菌株的分离 | 第40页 |
2.2.4 噬菌体抗性菌株的鉴定 | 第40-43页 |
2.2.5 噬菌体抗性菌株溶源性分析 | 第43-44页 |
2.2.6 噬菌体抗性菌株与噬菌体的相互作用分析 | 第44-50页 |
2.2.7 噬菌体抗性菌株差异表达基因的验证 | 第50-61页 |
3 结果 | 第61-124页 |
3.1 干酪乳杆菌噬菌体LJ基因组测序分析结果 | 第61-69页 |
3.1.1 干酪乳杆菌噬菌体LJ基因组分段PCR扩增结果 | 第61页 |
3.1.2 干酪乳杆菌噬菌体基因组的生物信息学分析 | 第61-69页 |
3.2 乳杆菌噬菌体抗性菌株的分离结果 | 第69-70页 |
3.3 乳杆菌噬菌体抗性菌株的鉴定结果 | 第70-77页 |
3.3.1 噬菌体抗性菌株菌体形态检测 | 第70页 |
3.3.2 噬菌体抗性菌株生化特征测定结果 | 第70-71页 |
3.3.3 噬菌体抗性菌株基因型鉴定结果 | 第71-72页 |
3.3.4 噬菌体抗性菌株培养特性 | 第72-75页 |
3.3.5 噬菌体抗性菌株的发酵性能 | 第75-76页 |
3.3.6 抗性菌株对噬菌体抗性测定结果 | 第76-77页 |
3.4 噬菌体抗性菌株溶源性分析结果 | 第77-81页 |
3.4.1 噬菌体抗性菌株释放噬菌体测定结果 | 第77-78页 |
3.4.2 噬菌体抗性菌株基因组中噬菌体LJ基因的检测结果 | 第78-79页 |
3.4.3 抗性菌株噬菌体基因整合位点分析结果 | 第79页 |
3.4.4 噬菌体抗性菌株噬菌体基因整合位点验证结果 | 第79-81页 |
3.5 噬菌体抗性菌株与噬菌体的相互作用测定结果 | 第81-102页 |
3.5.1 抗性菌CRISPR系统的检测结果 | 第81-82页 |
3.5.2 抗性菌R/M防御系统的检测结果 | 第82-83页 |
3.5.3 噬菌体吸附抗性菌株特性测定结果 | 第83-84页 |
3.5.4 噬菌体DNA注入抗性菌株的测定结果 | 第84-85页 |
3.5.5 噬菌体侵染抗性菌株一步生长曲线的测定结果 | 第85-86页 |
3.5.6 噬菌体基因在抗性菌株菌体内转录的测定 | 第86-88页 |
3.5.7 噬菌体侵染敏感菌及抗性菌差异基因表达分析 | 第88-102页 |
3.6 干酪乳杆菌噬菌体抗性菌株的抗性机制验证 | 第102-124页 |
3.6.1 选定功能性分析的差异表达基因 | 第102-105页 |
3.6.2 目的基因的克隆与序列测定 | 第105-110页 |
3.6.3 CⅠ和M蛋白多克隆抗体的制备 | 第110-112页 |
3.6.4 重组干酪乳杆菌表达载体的构建 | 第112-113页 |
3.6.5 重组干酪乳杆菌的构建 | 第113-116页 |
3.6.6 重组干酪乳杆菌蛋白表达鉴定 | 第116-119页 |
3.6.7 重组乳酸菌噬菌体敏感性分析 | 第119-121页 |
3.6.8 噬菌体对重组菌生长影响的测定 | 第121-122页 |
3.6.9 噬菌体侵染重组菌一步生长曲线的测定 | 第122页 |
3.6.10 RT-qPCR检测噬菌体侵染重组乳酸菌时基因表达结果 | 第122-124页 |
4 讨论 | 第124-132页 |
4.1 噬菌体LJ基因组学分析 | 第124-126页 |
4.2 干酪乳杆菌噬菌体抗性菌株的筛选及其生物学特性 | 第126-128页 |
4.3 溶源性干酪乳杆菌噬菌体抗性机制分析 | 第128-132页 |
5 结论 | 第132-133页 |
致谢 | 第133-135页 |
参考文献 | 第135-148页 |
附录 | 第148-161页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第161页 |