摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 蓖麻(Ricinus communisL.)的生物学特征 | 第11-12页 |
1.2 生育酚合成代谢研究进展 | 第12-20页 |
1.2.1 生育酚的结构与生物功能 | 第12-14页 |
1.2.2 生育酚合成代谢相关基因研究进展 | 第14-20页 |
1.3 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
2 实验材料与方法 | 第21-34页 |
2.1 实验材料 | 第21-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第21-22页 |
2.1.2 载体和菌株 | 第22-23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
2.1.4 主要仪器 | 第23-24页 |
2.1.5 引物 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-34页 |
2.2.1 蓖麻不同发育时期种子的获取 | 第25页 |
2.2.2 蓖麻生育酚的提取和测定 | 第25-26页 |
2.2.3 蓖麻果实总RNA的提取,检测与反转录 | 第26-28页 |
2.2.4 qPCR检测蓖麻不同组织中RcGGR-1、RcGGR-2表达水平 | 第28页 |
2.2.5 拟南芥的种植 | 第28-30页 |
2.2.6 基因克隆与表达载体的构建 | 第30-32页 |
2.2.7 拟南芥的遗传转化 | 第32页 |
2.2.8 转基因阳性转化种子的筛选及播种 | 第32-33页 |
2.2.9 拟南芥总DNA的提取 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-55页 |
3.1 蓖麻GGR的同源性分析 | 第34-35页 |
3.2 蓖麻不同组织GGR表达量分析及其叶片、种子生育酚含量测定 | 第35-38页 |
3.2.1 蓖麻不同组织中RcGGR1/RcGGR2表达量分析 | 第35页 |
3.2.2 蓖麻不同叶龄叶片、不同发育时期种子生育酚含量测定 | 第35-38页 |
3.3 植物表达载体的构建 | 第38-48页 |
3.3.1 组成型超表达载体的构建 | 第38页 |
3.3.2 种子特异性单基因超表达载体的构建 | 第38-43页 |
3.3.3 双价基因表达载体的构建 | 第43-48页 |
3.4 RcGGR功能互补拟南芥ggr突变体检测及后代种子中生育酚含量的测定 | 第48-51页 |
3.4.1 土壤和皿上种植的T2互补植株鉴定 | 第48-50页 |
3.4.2 超表达RcGGR生育酚含量的测定 | 第50-51页 |
3.5 HPPD对拟南芥种子中生育酚含量的影响 | 第51-52页 |
3.5.1 pBinGlyRed3AtHPPD转基因系种子中生育酚含量的测定 | 第51-52页 |
3.5.2 pBinGlyRed3CHPPD转基因系种子中生育酚含量的测定 | 第52页 |
3.6 HPT对拟南芥种子中生育酚含量的影响 | 第52-53页 |
3.6.1 pBinGlyRed3AtHPT转基因系种子中生育酚含量的测定 | 第52-53页 |
3.6.2 pBinGlyRed3CHPT转基因系种子中生育酚含量的测定 | 第53页 |
3.7 双价基因表达载体对拟南芥种子中生育酚含量的影响 | 第53-55页 |
3.7.1 pBinGlyRed3CHPPD+BetaConAtHPT转基因系种子中生育酚含量的测定 | 第53-54页 |
3.7.2 pBinGlyRed3CHPPD+OleosinAtHPT转基因系种子中生育酚含量的测定 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
4.1 蓖麻等非光合型种子中生育酚含量的影响 | 第55页 |
4.2 HPPD和HPT基因对种子中生育酚含量的影响 | 第55-56页 |
5 展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62页 |