摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩略语表 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-23页 |
1.1 松褐天牛与松褐天牛肿腿蜂 | 第16-17页 |
1.2 天敌昆虫对寄主的定位 | 第17页 |
1.3 气味结合蛋白和化学感受蛋白 | 第17-20页 |
1.3.1 化学感受蛋白和气味结合蛋白的特征 | 第17-18页 |
1.3.2 化学感受蛋白 | 第18-19页 |
1.3.3 气味结合蛋白 | 第19-20页 |
1.4 荧光猝灭 | 第20-21页 |
1.5 圆二色谱法 | 第21-22页 |
1.6 研究目的与意义 | 第22-23页 |
技术路线 | 第23-24页 |
第二章 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2的功能分析 | 第24-48页 |
2.1 SspCSP2基因的克隆与时空表达 | 第24-32页 |
2.1.1 材料与方法 | 第25-29页 |
2.1.1.1 实验材料 | 第25页 |
2.1.1.2 样品RNA的提取 | 第25-26页 |
2.1.1.3 cDNA第一条链的合成 | 第26-27页 |
2.1.1.4 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2基因的克隆 | 第27-28页 |
2.1.1.5 荧光定量PCR引物的设计 | 第28-29页 |
2.1.1.6 荧光定量PCR反应 | 第29页 |
2.1.2 结果与分析 | 第29-31页 |
2.1.2.1 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2基因的克隆 | 第29-30页 |
2.1.2.2 SspCSP2基因的表达模式分析 | 第30-31页 |
2.1.3 讨论 | 第31-32页 |
2.2 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2的表达与纯化 | 第32-36页 |
2.2.1 材料与方法 | 第32-35页 |
2.2.1.1 实验材料 | 第32-33页 |
2.2.1.2 原核表达载体的构建 | 第33页 |
2.2.1.3 融合蛋白的诱导表达 | 第33-34页 |
2.2.1.4 融合蛋白的纯化 | 第34-35页 |
2.2.2 结果与分析 | 第35-36页 |
2.2.2.1 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2原核表达 | 第35页 |
2.2.2.2 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2的纯化 | 第35-36页 |
2.2.3 讨论 | 第36页 |
2.3 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2与配体的结合机制 | 第36-48页 |
2.3.1 实验材料与方法 | 第37-42页 |
2.3.1.1 实验材料 | 第37-39页 |
2.3.1.2 蛋白浓度测定 | 第39页 |
2.3.1.3 荧光探针适合性的检测 | 第39页 |
2.3.1.4 荧光竞争性结合 | 第39-40页 |
2.3.1.5 荧光猝灭实验 | 第40页 |
2.3.1.6 数据处理 | 第40-42页 |
2.3.2 结果与分析 | 第42-46页 |
2.3.2.1 荧光探针的适合性检测 | 第42页 |
2.3.2.2 SspCSP2与气味物质的结合特性 | 第42-44页 |
2.3.2.3 SspCSP2与四种电生理物质间的相互作用 | 第44-46页 |
2.3.3 讨论 | 第46-48页 |
第三章 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7与配体的结合机制 | 第48-72页 |
3.1 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7与气味分子间相互作用力分析 | 第48-53页 |
3.1.2 实验材料与方法 | 第48-49页 |
3.1.2.1 实验方法 | 第49页 |
3.1.3 结果与分析 | 第49页 |
3.1.4 讨论 | 第49-53页 |
3.2 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7的结构分析 | 第53-61页 |
3.2.1 材料与方法 | 第54-55页 |
3.2.1.1 实验材料 | 第54页 |
3.2.1.2 SspOBP7二级结构测定 | 第54页 |
3.2.1.3 同源建模 | 第54-55页 |
3.2.1.4 分子对接 | 第55页 |
3.2.2 结果与分析 | 第55-60页 |
3.2.2.1 SspOBP7二级结构分析 | 第55-57页 |
3.2.2.2 同源建模模板的选择 | 第57-58页 |
3.2.2.3 同源建模结果评价 | 第58-59页 |
3.2.2.4 SspOBP7三维结构预测及结合腔特性分析 | 第59-60页 |
3.2.3 讨论 | 第60-61页 |
3.3 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7与配基的结合机制 | 第61-72页 |
3.3.1 材料与方法 | 第61-63页 |
3.3.1.1 实验材料 | 第61页 |
3.3.1.2 突变位点的分析 | 第61-62页 |
3.3.1.3 突变基因的克隆及突变蛋白的表达与纯化 | 第62-63页 |
3.3.1.4 突变蛋白Y105F与气味分子间相互作用分析 | 第63页 |
3.3.1.5 突变蛋白Y105F三维结构的预测 | 第63页 |
3.3.2 结果与分析 | 第63-70页 |
3.3.2.1 突变蛋白的基因克隆、表达与纯化 | 第63-64页 |
3.3.2.2 突蛋白与气味分子的结合能力 | 第64-67页 |
3.3.2.3 突变蛋白与气味分子间的相互作用 | 第67-68页 |
3.3.2.4 突变蛋白三维结构的预测及结合腔的分析 | 第68-70页 |
3.3.3 讨论 | 第70-72页 |
第四章 结论与展望 | 第72-75页 |
4.1 结论 | 第72-73页 |
4.1.1 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2的功能 | 第72页 |
4.1.2 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7的结构和结合机制 | 第72-73页 |
4.2 展望 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-86页 |
硕士期间发表的学术论文 | 第86-87页 |
致谢 | 第87页 |