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松褐天牛肿腿蜂SspCSP2和SspOBP7的功能分析

摘要第8-11页
Abstract第11-14页
缩略语表第15-16页
第一章 文献综述第16-23页
    1.1 松褐天牛与松褐天牛肿腿蜂第16-17页
    1.2 天敌昆虫对寄主的定位第17页
    1.3 气味结合蛋白和化学感受蛋白第17-20页
        1.3.1 化学感受蛋白和气味结合蛋白的特征第17-18页
        1.3.2 化学感受蛋白第18-19页
        1.3.3 气味结合蛋白第19-20页
    1.4 荧光猝灭第20-21页
    1.5 圆二色谱法第21-22页
    1.6 研究目的与意义第22-23页
技术路线第23-24页
第二章 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2的功能分析第24-48页
    2.1 SspCSP2基因的克隆与时空表达第24-32页
        2.1.1 材料与方法第25-29页
            2.1.1.1 实验材料第25页
            2.1.1.2 样品RNA的提取第25-26页
            2.1.1.3 cDNA第一条链的合成第26-27页
            2.1.1.4 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2基因的克隆第27-28页
            2.1.1.5 荧光定量PCR引物的设计第28-29页
            2.1.1.6 荧光定量PCR反应第29页
        2.1.2 结果与分析第29-31页
            2.1.2.1 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2基因的克隆第29-30页
            2.1.2.2 SspCSP2基因的表达模式分析第30-31页
        2.1.3 讨论第31-32页
    2.2 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2的表达与纯化第32-36页
        2.2.1 材料与方法第32-35页
            2.2.1.1 实验材料第32-33页
            2.2.1.2 原核表达载体的构建第33页
            2.2.1.3 融合蛋白的诱导表达第33-34页
            2.2.1.4 融合蛋白的纯化第34-35页
        2.2.2 结果与分析第35-36页
            2.2.2.1 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2原核表达第35页
            2.2.2.2 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2的纯化第35-36页
        2.2.3 讨论第36页
    2.3 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2与配体的结合机制第36-48页
        2.3.1 实验材料与方法第37-42页
            2.3.1.1 实验材料第37-39页
            2.3.1.2 蛋白浓度测定第39页
            2.3.1.3 荧光探针适合性的检测第39页
            2.3.1.4 荧光竞争性结合第39-40页
            2.3.1.5 荧光猝灭实验第40页
            2.3.1.6 数据处理第40-42页
        2.3.2 结果与分析第42-46页
            2.3.2.1 荧光探针的适合性检测第42页
            2.3.2.2 SspCSP2与气味物质的结合特性第42-44页
            2.3.2.3 SspCSP2与四种电生理物质间的相互作用第44-46页
        2.3.3 讨论第46-48页
第三章 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7与配体的结合机制第48-72页
    3.1 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7与气味分子间相互作用力分析第48-53页
        3.1.2 实验材料与方法第48-49页
            3.1.2.1 实验方法第49页
        3.1.3 结果与分析第49页
        3.1.4 讨论第49-53页
    3.2 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7的结构分析第53-61页
        3.2.1 材料与方法第54-55页
            3.2.1.1 实验材料第54页
            3.2.1.2 SspOBP7二级结构测定第54页
            3.2.1.3 同源建模第54-55页
            3.2.1.4 分子对接第55页
        3.2.2 结果与分析第55-60页
            3.2.2.1 SspOBP7二级结构分析第55-57页
            3.2.2.2 同源建模模板的选择第57-58页
            3.2.2.3 同源建模结果评价第58-59页
            3.2.2.4 SspOBP7三维结构预测及结合腔特性分析第59-60页
        3.2.3 讨论第60-61页
    3.3 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7与配基的结合机制第61-72页
        3.3.1 材料与方法第61-63页
            3.3.1.1 实验材料第61页
            3.3.1.2 突变位点的分析第61-62页
            3.3.1.3 突变基因的克隆及突变蛋白的表达与纯化第62-63页
            3.3.1.4 突变蛋白Y105F与气味分子间相互作用分析第63页
            3.3.1.5 突变蛋白Y105F三维结构的预测第63页
        3.3.2 结果与分析第63-70页
            3.3.2.1 突变蛋白的基因克隆、表达与纯化第63-64页
            3.3.2.2 突蛋白与气味分子的结合能力第64-67页
            3.3.2.3 突变蛋白与气味分子间的相互作用第67-68页
            3.3.2.4 突变蛋白三维结构的预测及结合腔的分析第68-70页
        3.3.3 讨论第70-72页
第四章 结论与展望第72-75页
    4.1 结论第72-73页
        4.1.1 松褐天牛肿腿蜂SspCSP2的功能第72页
        4.1.2 松褐天牛肿腿蜂SspOBP7的结构和结合机制第72-73页
    4.2 展望第73-75页
参考文献第75-86页
硕士期间发表的学术论文第86-87页
致谢第87页

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