摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第1章 文献综述 | 第14-34页 |
1 鱼类精巢和精子发生 | 第14-19页 |
1.1 鱼类精巢结构 | 第14-15页 |
1.2 鱼类精子发生过程 | 第15-19页 |
2 鱼类卵巢和卵子发生 | 第19-22页 |
2.1 鱼类卵巢结构 | 第19-20页 |
2.2 鱼类卵子发生过程 | 第20-22页 |
3 Tsp1国内外研究现状 | 第22-32页 |
3.1 TSP概述 | 第22-25页 |
3.2 Tsp1的组织表达模式 | 第25-26页 |
3.3 Tsp1体内合成分解 | 第26-27页 |
3.4 Tsp1的生理功能 | 第27-30页 |
3.5 Tsp1敲除研究 | 第30-31页 |
3.6 Tsp1与人类疾病 | 第31-32页 |
4 科学问题的提出和本研究的目的意义 | 第32-34页 |
第2章 tsp1a和tsp1b突变对尼罗罗非鱼配子发生的影响 | 第34-66页 |
1 前言 | 第34-35页 |
2 材料、仪器与方法 | 第35-44页 |
2.1 实验动物 | 第35页 |
2.2 实验试剂 | 第35-36页 |
2.3 实验仪器 | 第36页 |
2.4 tsp1a和tsp1b在性腺发育过程中表达模式检测 | 第36-38页 |
2.5 gRNA和Cas9mRNA的合成 | 第38-39页 |
2.6 显微注射 | 第39-40页 |
2.7 受精卵基因组DNA提取、目的片段的扩增及酶切检测 | 第40页 |
2.8 性腺免疫组织学观察 | 第40-42页 |
2.9 精子巴氏染色 | 第42页 |
2.10 EIA激素测定 | 第42页 |
2.11 精子扫描电镜观察 | 第42-43页 |
2.12 受精率统计 | 第43-44页 |
2.13 TUNEL染色 | 第44页 |
3 结果 | 第44-62页 |
3.1 tsp1a和tsp1b在性腺发育过程中的表达分析 | 第44页 |
3.2 CRISPR/Cas9成功突变tsp1a和tsp1b | 第44-46页 |
3.3 突变阳性鱼的筛选和突变率统计 | 第46-49页 |
3.4 tsp1a和tsp1b突变对F0代阳性鱼精子形态和运动能力的影响 | 第49-53页 |
3.5 tsp1a和tsp1b突变F0代阳性鱼性腺免疫组织学观察 | 第53-59页 |
3.6 tsp1b突变对鞘膜细胞和雌二醇的影响 | 第59-62页 |
4 讨论 | 第62-66页 |
4.1 tsp1a和tsp1b突变导致精子形态异常及运动能力受损 | 第62-63页 |
4.2 tsp1a和tsp1b突变对精子发生的影响 | 第63-64页 |
4.3 tsp1a和tsp1b突变导致精巢生殖细胞和卵巢鞘膜细胞凋亡 | 第64页 |
4.4 tsp1b突变导致卵巢雌二醇激素水平下降 | 第64-66页 |
结论 | 第66-67页 |
展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-82页 |
致谢 | 第82-84页 |
在读期间发表论文 | 第84页 |
在读期间参加科研情况 | 第84页 |