| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 综述 | 第10-27页 |
| 1.1 αHL纳米孔的结构特征 | 第11-12页 |
| 1.2 αHL纳米孔蛋白组装机理 | 第12-14页 |
| 1.3 αHL七聚体纳米孔的制备 | 第14-16页 |
| 1.4 αHL纳米孔通道工作原理 | 第16-17页 |
| 1.5 αHL七聚体纳米孔通道在单分子检测中的应用 | 第17-20页 |
| 1.5.1 无机离子的检测 | 第17-18页 |
| 1.5.2 有机分子的检测 | 第18页 |
| 1.5.3 DNA测序 | 第18-20页 |
| 1.6 本文研究意义 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-27页 |
| 第二章 α-溶血素半胱氨酸突变体纳米孔的制备 | 第27-53页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 实验部分 | 第28-37页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.3 实验试剂配制 | 第30-32页 |
| 2.2.3.1 实验所用菌株 | 第30页 |
| 2.2.3.2 溶液配制 | 第30-32页 |
| 2.2.4 半胱氨酸定点突变反应 | 第32页 |
| 2.2.5 氯化钙法制备感受态细胞 | 第32-33页 |
| 2.2.6 质粒的转化 | 第33页 |
| 2.2.7 αHL蛋白的表达及纯化 | 第33-35页 |
| 2.2.7.1 αHL体外表达及纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.7.2 αHL体内表达及纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.8 αHL单体蛋白浓度的测定 | 第35页 |
| 2.2.9 αHL单体蛋白溶血活性检测 | 第35-36页 |
| 2.2.9.1 兔血红细胞及兔血红细胞膜的制备 | 第35-36页 |
| 2.2.9.2 溶血分析 | 第36页 |
| 2.2.10 αHL单体在兔血红细胞膜上的聚合以及切胶法纯化 | 第36-37页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第37-50页 |
| 2.3.1 αHL蛋白的定点突变 | 第37-41页 |
| 2.3.2 αHL蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 2.3.3 αHL蛋白的纯化 | 第42-45页 |
| 2.3.4 αHL单体蛋白浓度的测定 | 第45-46页 |
| 2.3.5 αHL单体蛋白溶血活性分析 | 第46-47页 |
| 2.3.6 αHL单体蛋白的聚合 | 第47-50页 |
| 2.4 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 第三章 α-溶血素蛋白在单层膜上的组装 | 第53-62页 |
| 3.1 引言 | 第53页 |
| 3.2 实验部分 | 第53-54页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第53-54页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第54页 |
| 3.2.3 野生型单体蛋白的制备 | 第54页 |
| 3.2.4 单通道电流记录 | 第54页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第54-60页 |
| 3.3.1 单层膜的构建以及稳定性研究 | 第54-55页 |
| 3.3.2 αHL在单层膜界面组装情况 | 第55-57页 |
| 3.3.3 单层膜聚合温度和时间的探索 | 第57-58页 |
| 3.3.4 七聚体单通道性质检测 | 第58-59页 |
| 3.3.5 七聚体纳米孔的热稳定性分析 | 第59-60页 |
| 3.4 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63-69页 |
| 攻读硕士学位期间获得的科研成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |