摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
英文缩略词 | 第8-11页 |
第一部分 前言 | 第11-12页 |
1.研究背景 | 第11页 |
2.研究目的和意义 | 第11-12页 |
第二部分 文献综述 | 第12-19页 |
1.骨血管概述 | 第12-13页 |
1.1.骨血管生成 | 第12页 |
1.2 骨血管的结构 | 第12-13页 |
2.骨血管的调节因子 | 第13-18页 |
2.1 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF) | 第13-14页 |
2.1.1 VEGF简介 | 第13页 |
2.1.2 VEGF对骨血管的调节作用 | 第13-14页 |
2.2 EGFL | 第14-15页 |
2.2.1 EGFL简介 | 第14页 |
2.2.2 EGFL对骨血管的调节作用 | 第14-15页 |
2.3 NPNT | 第15-16页 |
2.3.1 NPNT简介 | 第15-16页 |
2.3.2 NPNT对骨代谢及骨血管的调控作用 | 第16页 |
2.4 MMPs对骨血管的调节作用 | 第16-17页 |
2.5 HIF及FGFs对骨血管的调节作用 | 第17页 |
2.6 其他因子对骨血管的调节作用 | 第17-18页 |
3.小结 | 第18-19页 |
第三部分 实验 | 第19-44页 |
1.实验材料 | 第19-20页 |
1.1 主要仪器 | 第19页 |
1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
1.3 相关试剂配置方法 | 第20页 |
2.实验方法 | 第20-24页 |
2.1 小鼠原代成骨细胞提取方案 | 第20页 |
2.2 机械牵张干预方案 | 第20-21页 |
2.2.1 MC3T3-E1成骨细胞干预方案 | 第20页 |
2.2.2 C57BL/6 小鼠原代成骨细胞干预方案 | 第20-21页 |
2.3 Real-time PCR检测相关基因m RNA的表达情况 | 第21-22页 |
2.3.1 总RNA的提取 | 第21页 |
2.3.2 总RNA逆转录成c DNA | 第21页 |
2.3.3 Real-time PCR测试 | 第21-22页 |
2.4 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色 | 第22页 |
2.5 免疫组织化学染色 | 第22-23页 |
2.6 划痕伤口愈合试验 | 第23页 |
2.7 免疫蛋白印记(Western Blot)检测相关蛋白的表达水平 | 第23-24页 |
2.7.1 蛋白样本的制备 | 第23页 |
2.7.2 BCA法测定蛋白样品的蛋白浓度 | 第23-24页 |
2.7.3 Western Blot上样蛋白样品的准备 | 第24页 |
2.7.4 Western Blot | 第24页 |
3.统计方法 | 第24-25页 |
4.技术路线图 | 第25-27页 |
4.1 技术路线图 1 | 第25-26页 |
4.2 技术路线图 2 | 第26-27页 |
5.实验结果 | 第27-34页 |
5.1 机械牵张MC3T3-E1成骨细胞对其分化及NPNT表达的影响。 | 第27-29页 |
5.1.1 PCR结果 | 第27-28页 |
5.1.2 Western blot结果 | 第28-29页 |
5.2 机械牵张原代成骨细胞对其分化及NPNT表达的影响 | 第29-32页 |
5.2.1 PCR结果 | 第29-31页 |
5.2.2 ALP染色结果 | 第31页 |
5.2.3 Western blot结果 | 第31-32页 |
5.2.4 免疫组织化学染色结果 | 第32页 |
5.3 机械牵张成骨细胞对SVEC细胞增殖与迁移的影响 | 第32-34页 |
6 讨论 | 第34-37页 |
6.1 机械牵张MC3T3-E1成骨细胞对其分化的影响 | 第34-35页 |
6.2 机械牵张原代成骨细胞对其分化的影响 | 第35页 |
6.3 机械牵张成骨细胞对NPNT表达的影响 | 第35-36页 |
6.4 机械牵张成骨细胞对SVEC细胞增殖与迁移的影响 | 第36-37页 |
7.结论 | 第37页 |
8.参考文献 | 第37-44页 |
附录 | 第44-45页 |
致谢 | 第45页 |