| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第1章 综述 | 第13-47页 |
| 1.1 运用斑马鱼进行ENU诱导的正向遗传筛选 | 第13-17页 |
| 1.2 造血干细胞 | 第17-30页 |
| 1.2.1 脊椎动物的造血过程 | 第17-23页 |
| 1.2.2 造血干细胞的起源-成血管造血细胞和造血内皮细胞 | 第23-27页 |
| 1.2.3 造血干细胞发育的遗传调控 | 第27-30页 |
| 1.3 P53信号途径 | 第30-35页 |
| 1.3.1 P53调控细胞代谢及肿瘤发育 | 第31-32页 |
| 1.3.2 P53调控细胞周期、凋亡和分化 | 第32-34页 |
| 1.3.3 P53信号途径与造血发育 | 第34-35页 |
| 1.4 核糖体合成 | 第35-41页 |
| 1.4.1 核糖体合成与P53信号途径 | 第36-39页 |
| 1.4.2 核糖体蛋白与DBA | 第39-40页 |
| 1.4.3 核糖体蛋白与5q-综合征 | 第40-41页 |
| 1.4.4 核糖体蛋白与X-连锁先天性角化不良 | 第41页 |
| 1.5 mTOR信号途径 | 第41-45页 |
| 1.5.1 mTOR复合物1 | 第42-44页 |
| 1.5.2 mTOR复合物2 | 第44页 |
| 1.5.3 mTOR与造血干细胞 | 第44-45页 |
| 1.6 本研究的目的 | 第45-47页 |
| 第2章 材料和方法 | 第47-65页 |
| 2.1 实验材料 | 第47-50页 |
| 2.1.1 斑马鱼品系 | 第47页 |
| 2.1.2 实验试剂、耗材和仪器 | 第47-48页 |
| 2.1.3 各类培养基和主要试剂的配制 | 第48-50页 |
| 2.2 实验方法 | 第50-65页 |
| 2.2.1 斑马鱼基因组的提取 | 第50页 |
| 2.2.2 斑马鱼总RNA的提取 | 第50-51页 |
| 2.2.3 利用斑马鱼总RNA反转录制备cDNA | 第51页 |
| 2.2.4 PCR反应,凝胶电泳,DNA纯化、酶切及连接 | 第51-55页 |
| 2.2.5 转化及感受态制备 | 第55-56页 |
| 2.2.6 探针的制备 | 第56-57页 |
| 2.2.7 显微注射 | 第57-58页 |
| 2.2.8 原位杂交 | 第58-59页 |
| 2.2.9 荧光原位杂交 | 第59-61页 |
| 2.2.10 抗体显色 | 第61-62页 |
| 2.2.11 细胞凋亡实验 | 第62页 |
| 2.2.12 EdU检测实验 | 第62-63页 |
| 2.2.13 胚胎热激实验 | 第63-65页 |
| 第3章 实验结果 | 第65-85页 |
| 3.1 前言 | 第65-66页 |
| 3.2 实验结果 | 第66-85页 |
| 3.2.1 斑马鱼cq42突变体定向造血发育存在缺陷 | 第66-69页 |
| 3.2.2 Urb2是cq42突变体的突变基因 | 第69-71页 |
| 3.2.3 斑马鱼中urb2突变不影响原始造血发育 | 第71-72页 |
| 3.2.4 斑马鱼中urb2突变不影响血管发育 | 第72-74页 |
| 3.2.5 斑马鱼Urb2蛋白可调控造血干细胞的细胞增殖和凋亡 | 第74-77页 |
| 3.2.6 斑马鱼Urb2蛋白通过调控P53信号途径来影响造血干细胞发育 | 第77-83页 |
| 3.2.7 Urb2可作用于mTORC1信号途径下游调控斑马鱼造血干细胞的发育 | 第83-85页 |
| 第4章 实验结论与讨论 | 第85-89页 |
| 4.1 实验结论 | 第85页 |
| 4.2 实验讨论 | 第85-89页 |
| 参考文献 | 第89-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 博士在读期间发表论文及科研工作 | 第119页 |
