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鸭源鸡杆菌的生物被膜形成能力及对鸡原代输卵管上皮细胞作用的初步研究

致谢第4-8页
英文缩写表第8-9页
摘要第9-11页
文献综述第11-23页
    1 鸡杆菌概述第11-13页
        1.1 鸡杆菌分类地位的确立第11页
        1.2 病原特征第11-12页
        1.3 流行病学第12页
        1.4 传播途径第12-13页
    2 鸡杆菌的致病性第13-16页
    3 鸡杆菌毒力因子第16-20页
        3.1 黏附素第16-17页
        3.2 溶血素第17-18页
        3.3 外膜蛋白第18-19页
        3.4 外膜囊泡通道第19-20页
        3.5 金属蛋白酶第20页
        3.6 荚膜多糖第20页
    4 小结第20-23页
试验一 鸭源鸡杆菌生物被膜形成能力的测定第23-31页
    引言第23-24页
    1 材料与方法第24-26页
        1.1 菌株第24页
        1.2 试剂和器材第24页
        1.3 鸭源鸡杆菌的复苏第24页
        1.4 生物被膜形成能力定性测定第24-25页
        1.5 生物被膜定量检测第25页
        1.6 不同鸭源鸡杆菌分离株生物被膜形成能力的测定第25页
        1.7 鸭源鸡杆菌被膜形成的影响因素第25-26页
        1.8 扫描电镜第26页
    2 结果与分析第26-29页
        2.1 鸭源鸡杆菌生物被膜形成能力的检测第26页
        2.2 定性检测不同培养时间对BF的影响第26-27页
        2.3 定量检测不同培养时间对BF的影响第27-28页
        2.4 定量检测不同营养成分对BF的影响第28-29页
        2.5 生物被膜的扫描电镜第29页
    3 结论与讨论第29-31页
试验二 鸡原代输卵管上皮细胞体外分离培养与鉴定第31-41页
    引言第31页
    1 材料与方法第31-33页
        1.1 试验动物第31-32页
        1.2 主要试剂第32页
        1.3 鸡原代输卵管上皮细胞的制备与培养条件优化第32页
        1.4 鸡原代输卵管上皮细胞的培养条件优化第32页
        1.5 形态学观察第32页
        1.6 姬姆萨染色观察第32页
        1.7 电镜观察第32-33页
        1.8 鸡输卵管上皮原代细胞传代第33页
    2 结果与分析第33-37页
        2.1 鸡原代输卵管上皮细胞分离与培养条件优化第33-34页
        2.2 鸡输卵管上皮原代细胞生长状态和形态变化第34-36页
        2.3 姬姆萨染色结果第36页
        2.4 鸡输卵管上皮原代细胞透射电镜观察第36-37页
        2.5 鸡输卵管上皮原代细胞传代结果观察第37页
    3 结论与讨论第37-41页
试验三 鸭源鸡杆菌对鸡原代输卵管上皮细胞的作用第41-51页
    引言第41-42页
    1 材料与方法第42-43页
        1.1 菌株第42页
        1.2 主要试剂第42页
        1.3 细菌的培养第42页
        1.4 鸡原代输卵管上皮细胞的制备与培养第42页
        1.5 鸭源鸡杆菌对原代输卵管上皮细胞的黏附和侵袭试验第42页
        1.6 用胰蛋白酶处理菌体后对细胞黏附力的影响第42页
        1.7 姬姆萨染色观察细菌黏附情况第42-43页
        1.8 透射电镜观察细菌侵袭细胞情况第43页
        1.9 鸭源鸡杆菌感染原代输卵管上皮细胞后对上皮细胞产生细胞因子的测定第43页
        1.10 统计分析第43页
    2 结果与分析第43-49页
        2.1 鸭源鸡杆菌对原代输卵管上皮细胞活力的影响第43页
        2.2 鸭源鸡杆菌感染量的确定第43-44页
        2.3 鸭源鸡杆菌对输卵管上皮细胞的黏附第44-45页
        2.4 用胰蛋白酶处理鸭源鸡杆菌后对输卵管上皮细胞的黏附第45页
        2.5 鸭源鸡杆菌对输卵管上皮细胞的侵袭第45页
        2.6 姬姆萨染色观察鸭源鸡杆菌对输卵管上皮细胞的黏附第45-47页
        2.7 透射电镜观察鸭源鸡杆菌对输卵管上皮细胞的侵袭结果第47-48页
        2.8 鸭源鸡杆菌感染输卵管上皮细胞后对细胞因子的影响第48-49页
    3 结论与讨论第49-51页
试验四 鸭源鸡杆菌Gtx A毒素蛋白对原代输卵管上皮细胞的作用第51-57页
    引言第51页
    1 材料与方法第51-53页
        1.1 菌株第51-52页
        1.2 主要试剂第52页
        1.3 主要仪器设备第52页
        1.4 重组质粒第52页
        1.5 重组Gtx A毒素蛋白原核表达及蛋白活性鉴定第52页
        1.6 蛋白纯化第52页
        1.7 鸭源鸡杆菌Gtx A毒素蛋白各区域蛋白对原代输卵管上皮细胞毒性试验第52-53页
        1.8 鸡原代输卵管细胞在Gtx A蛋白作用后分泌细胞因子测定第53页
        1.9 数据分析第53页
    2 结果与分析第53-55页
        2.1 Gtx A毒素蛋白的体外表达第53页
        2.2 Gtx A不同结构域对输卵管上皮细胞的毒性试验第53-54页
        2.3 Gtx A不同结构域作用输卵管细胞后对细胞因子的影响第54-55页
    3 结论与讨论第55-57页
全文总结第57-59页
参考文献第59-67页
ABSTRACT第67-69页
附录第71页

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