摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
引言 | 第9-12页 |
第一章 材料 | 第12-18页 |
1.1 主要仪器设备 | 第12页 |
1.2 主要实验试剂及配制 | 第12-16页 |
1.3 组织标本、细胞来源 | 第16-18页 |
第二章 方法 | 第18-35页 |
2.1 复苏人星形胶质细胞 | 第18页 |
2.2 免疫荧光法检测人星形胶质细胞的纯度 | 第18页 |
2.3 HCMV AD169株毒种的制备和定量 | 第18-20页 |
2.4 U-87MG星形胶质瘤细胞传代培养的建立 | 第20-21页 |
2.5 qRT-PCR检测HCMV感染前后星形胶质细胞内IGF2和IE2基因表达水平的变化 | 第21-24页 |
2.6 ELISA测定感染HCMV前后星形胶质细胞分泌IGF2的变化 | 第24-26页 |
2.7 建立星形胶质细胞和胶质瘤细胞的共培养体系的建立 | 第26-27页 |
2.8 共培养体系中U87胶质瘤细胞的IGF-IR,KRAS,BRAF,CREB3L2 and ATF5mRNA表达情况 | 第27-30页 |
2.9 Western Blot检测共培养体系中U87细胞Phospho-IGF-IR,Phospho-ERK1/2,IGF-IR ,ERK1/2 和ATF5蛋白的表达情况 | 第30-32页 |
2.10 CCK-8 比色法检测共培养对U87细胞增殖的影响 | 第32页 |
2.11 Annexin V/ 7-AAD染色及流式细胞仪检测共培养后的U87细胞凋亡 | 第32-33页 |
2.12 免疫荧光检测共培养前后U87细胞表面IGF-IR和Phospho-IGF-IR表达的改变 | 第33-34页 |
2.13 统计学分析 | 第34-35页 |
第三章 结果 | 第35-43页 |
3.1 体外培养的星形胶质细胞表达的GFAP | 第35页 |
3.2 HCMV AD169毒株的定量 | 第35页 |
3.3 选择HCMV AD169毒株感染星形胶质细胞的最适MOI值 | 第35-36页 |
3.4 HCMV AD169毒株感染星形胶质细胞后IGF2基因表达上调,分泌IGF2蛋白增多。 | 第36-37页 |
3.5 HCMV AD169感染星形胶质细胞后使其分泌IGF2蛋白增多 | 第37-38页 |
3.6 感染HCMV的星形胶质细胞和U87胶质瘤细胞共培养引起U87细胞表面受体表达的改变,IGF-IR表达下调,而Phospho-IGF-IR表达上调 | 第38页 |
3.7 与感染了HCMV的星形胶质细胞共培养的U87胶质瘤细胞内ERK/MAPK通路及ATF5的激活 | 第38-41页 |
3.8 与感染了HCMV的星形胶质细胞共培养的U87细胞增殖活力提高 | 第41页 |
3.9 流式细胞术检测各组U87胶质瘤细胞凋亡 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-46页 |
4.1 HCMV感染及胶质瘤细胞中ATF5表达对胶质瘤发生发展起到了至关重要的意义 | 第43-44页 |
4.2 IGF2和IGF-ⅠR的作用功能及其与神经系统的关联 | 第44页 |
4.3 星形胶质细胞在胶质瘤微环境中的重要地位 | 第44-46页 |
第五章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
文献综述 | 第49-63页 |
参考文献 | 第61-63页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |