| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| 1.1 葡萄糖二酸概述 | 第8-9页 |
| 1.1.1 葡萄糖二酸简介 | 第8页 |
| 1.1.2 葡萄糖二酸的应用 | 第8-9页 |
| 1.2 葡萄糖二酸的生产方法 | 第9-14页 |
| 1.2.1 葡萄糖二酸的化学合成方法 | 第9-10页 |
| 1.2.2 葡萄糖二酸的生物合成 | 第10-14页 |
| 1.3 立题背景与意义 | 第14页 |
| 1.4 主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-23页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第15-18页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19-22页 |
| 2.1.4 培养基 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.2.1 分子生物学操作 | 第23-24页 |
| 2.2.2 重组菌的构建 | 第24-28页 |
| 2.2.3 培养方法 | 第28-29页 |
| 2.2.4 测定及分析方法 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第30-56页 |
| 3.1 构建葡萄糖二酸指示系统筛选肌醇加氧酶突变株 | 第30-37页 |
| 3.1.1 葡萄糖二酸指示系统的构建 | 第31-33页 |
| 3.1.2 葡萄糖二酸合成途径与指示系统的耦联 | 第33-35页 |
| 3.1.3 MIOX突变体筛选 | 第35-36页 |
| 3.1.4 MIOX突变体对葡萄糖二酸产量的影响 | 第36-37页 |
| 3.1.5 小结 | 第37页 |
| 3.2 优化MIOX和Udh蛋白的融合表达 | 第37-44页 |
| 3.2.1 MIOX与Udh融合方式的比较 | 第38-41页 |
| 3.2.2 不同类型和强度的启动子对融合蛋白表达的影响 | 第41-44页 |
| 3.2.3 小结 | 第44页 |
| 3.3 肌醇合成途径的强化 | 第44-49页 |
| 3.3.1 过表达途径基因hxk、Ino1和Inm1对葡萄糖二酸产量的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.2 共表达肌醇合成途径基因对葡萄糖二酸产量的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.3 途径酶INO1、INM1、MIOX和Udh的胞内聚集 | 第46-49页 |
| 3.3.4 小结 | 第49页 |
| 3.4 重组菌P.pastorisGS115-UsvM(R171S)-HNM的发酵优化 | 第49-56页 |
| 3.4.1 酵母粉浓度的影响 | 第50页 |
| 3.4.2 葡萄糖浓度的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.3 甘油浓度的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.4 金属离子的影响 | 第52页 |
| 3.4.5 装液量的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.6 温度的影响 | 第53页 |
| 3.4.7 发酵过程pH的影响 | 第53-54页 |
| 3.4.8 重组高产菌分批补料发酵 | 第54-55页 |
| 3.4.9 小结 | 第55-56页 |
| 主要结论与展望 | 第56-58页 |
| 主要结论 | 第56-57页 |
| 展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第66页 |
