| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-15页 |
| 1.1 影响哺乳动物黑色素形成的基因研究现状 | 第9-10页 |
| 1.2 TYRP1基因与毛色关系的研究现状 | 第10-11页 |
| 1.3 PMEL基因与毛色关系的研究现状 | 第11页 |
| 1.4 狐狸TYRP1和PMEL基因与毛色关系的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.5 启动子研究方法 | 第12-13页 |
| 1.5.1 真核生物启动子结构特征 | 第12-13页 |
| 1.5.2 真核生物启动子研究方法 | 第13页 |
| 1.6 转录因子结合位点的研究方法 | 第13-14页 |
| 1.6.1 真核生物转录因子研究 | 第13页 |
| 1.6.2 真核生物转录因子结合位点的研究方法 | 第13-14页 |
| 1.7 主要研究内容和研究意义 | 第14-15页 |
| 1.7.1 研究内容 | 第14页 |
| 1.7.2 研究意义 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-33页 |
| 2.1 材料 | 第15-20页 |
| 2.1.1 狐狸样品采集 | 第15页 |
| 2.1.2 试验菌株来源 | 第15页 |
| 2.1.3 载体和细胞种类 | 第15-17页 |
| 2.1.4 数据分析工具 | 第17页 |
| 2.1.5 主要试验试剂及来源 | 第17-19页 |
| 2.1.6 试验仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-33页 |
| 2.2.1 狐狸样品DNA提取 | 第20页 |
| 2.2.2 狐狸TYRP1基因引物设计 | 第20-22页 |
| 2.2.3 狐狸PMEL基因引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2.4 基因5’侧翼区的PCR扩增 | 第23-25页 |
| 2.2.5 PCR扩增产物检测和纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.6 PCR扩增产物克隆载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.7 连接产物转化和阳性克隆载体的筛选 | 第27页 |
| 2.2.8 阳性质粒的小量提取 | 第27-28页 |
| 2.2.9 阳性质粒和pGL3-Basic质粒的双酶切和片段回收 | 第28页 |
| 2.2.10 酶切目的片段的表达载体构建 | 第28-29页 |
| 2.2.11 无内毒素阳性目的重组质粒的大量提取 | 第29-30页 |
| 2.2.12 转染细胞的培养 | 第30-31页 |
| 2.2.13 细胞的瞬时转染 | 第31-32页 |
| 2.2.14 重组质粒活性检测与数据处理 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-54页 |
| 3.1 狐狸TYRP1和PMEL基因上游序列同源性分析 | 第33-35页 |
| 3.1.1 狐狸TYRP1基因已知上游序列的同源性分析 | 第33-34页 |
| 3.1.2 狐狸PMEL基因已知上游序列的同源性分析 | 第34-35页 |
| 3.2 狐狸TYRP1和PMEL基因上游序列与EPD数据库比对分析 | 第35-36页 |
| 3.2.1 狐狸TYRP1基因已知上游序列比对分析结果 | 第35-36页 |
| 3.2.2 狐狸PMEL基因已知上游序列比对分析结果 | 第36页 |
| 3.3 狐狸TYRP1基因上游序列启动子预测 | 第36-38页 |
| 3.3.1 狐狸TYRP1基因上游序列Promoter2.0预测结果 | 第36页 |
| 3.3.2 狐狸TYRP1基因上游序列Neural Network Promoter Prediction预测结果 | 第36-37页 |
| 3.3.3 狐狸TYRP1基因上游序列GPMiner预测结果 | 第37页 |
| 3.3.4 狐狸TYRP1基因上游序列MethPrimer预测结果 | 第37-38页 |
| 3.4 狐狸PMEL基因上游序列启动子预测 | 第38-40页 |
| 3.4.1 狐狸PMEL基因上游序列Promoter2.0预测结果 | 第38页 |
| 3.4.2 狐狸PMEL基因上游序列Neural Network Promoter Prediction预测结果 | 第38-39页 |
| 3.4.3 狐狸PMEL基因上游序列GPMiner预测结果 | 第39页 |
| 3.4.4 狐狸PMEL基因上游序列MethPrimer预测结果 | 第39-40页 |
| 3.5 狐狸TYRP1和PMEL基因启动子缺失片段的载体构建 | 第40-44页 |
| 3.5.1 狐狸DNA的提取 | 第40页 |
| 3.5.2 狐狸TYRP1和PMEL基因启动子缺失片段的PCR扩增 | 第40-42页 |
| 3.5.3 狐狸TYRP1和PMEL基因启动子缺失片段克隆载体的构建 | 第42页 |
| 3.5.4 狐狸TYRP1和PMEL基因启动子缺失片段报告基因载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.5.5 狐狸TYRP1和PMEL基因启动子缺失片段报告基因载体的测序鉴定 | 第43-44页 |
| 3.6 狐狸TYRP1和PMEL基因启动子缺失片段活性验证 | 第44-48页 |
| 3.6.1 瞬时转染的细胞培养 | 第44页 |
| 3.6.2 瞬时转染的最佳条件确定 | 第44-46页 |
| 3.6.3 狐狸TYRP1基因启动子缺失片段细胞转染活性分析 | 第46-47页 |
| 3.6.4 狐狸PMEL基因启动子缺失片段细胞转染活性分析 | 第47-48页 |
| 3.7 狐狸TYRP1和PMEL基因核心启动子区的转录因子结合位点研究 | 第48-54页 |
| 3.7.1 狐狸TYRP1基因核心启动子区的转录因子结合位点预测 | 第48-49页 |
| 3.7.2 狐狸PMEL基因核心启动子区的转录因子结合位点预测 | 第49页 |
| 3.7.3 狐狸TYRP1基因核心启动子区突变载体的构建与活性验证 | 第49-51页 |
| 3.7.4 狐狸PMEL基因核心启动子区突变载体的构建与活性验证 | 第51-54页 |
| 4 讨论 | 第54-59页 |
| 4.1 启动子片段扩增分析 | 第54页 |
| 4.2 启动子表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 4.3 细胞培养和转染的影响因素 | 第55-56页 |
| 4.4 狐狸TYRP1基因核心启动子区域分析 | 第56-57页 |
| 4.5 狐狸PMEL基因核心启动子区域分析 | 第57页 |
| 4.6 转录因子结合位点分析 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 作者简历 | 第65-66页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 详细摘要 | 第69-70页 |
