摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第12-22页 |
1.1 柑橘黄龙病国内外研究进展 | 第12-16页 |
1.1.1 柑橘黄龙病病原 | 第12-13页 |
1.1.2 柑橘黄龙病症状及危害 | 第13-14页 |
1.1.3 柑橘黄龙病检测技术 | 第14-15页 |
1.1.4 柑橘黄龙病防治方法 | 第15-16页 |
1.2 柑橘黄龙病与寄主互作研究进展 | 第16-17页 |
1.3 植物诱导抗病性 | 第17-20页 |
1.3.1 植物免疫系统 | 第17-18页 |
1.3.2 植物诱导抗病性 | 第18-19页 |
1.3.3 诱导植物抗病性的作用机制 | 第19-20页 |
1.3.4 诱导植物抗病性的应用 | 第20页 |
1.4 蛋白组学和转录组学在植物免疫中的应用 | 第20页 |
1.5 本研究目的和意义 | 第20-22页 |
第二章 植物免疫诱导剂诱导柑橘抗病性 | 第22-45页 |
2.1 实验材料 | 第22-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 试剂耗材与仪器 | 第22-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-36页 |
2.2.1 黄龙病病原菌总DNA提取 | 第25页 |
2.2.2 构建重组质粒 | 第25-27页 |
2.2.3 荧光定量PCR(绝对定量) | 第27-29页 |
2.2.4 植物总RNA提取 | 第29页 |
2.2.5 cDNA合成 | 第29页 |
2.2.6 荧光定量PCR(相对定量) | 第29-30页 |
2.2.7 扫描电子显微镜观察 | 第30-32页 |
2.2.8 根活力检测(TTC法) | 第32-33页 |
2.2.9 柑橘果实指标检测 | 第33-36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-43页 |
2.3.1 诱导剂提高柑橘叶片叶绿素含量 | 第36页 |
2.3.2 诱导剂促进柑橘根系发育 | 第36-37页 |
2.3.3 诱导剂提高果实品质 | 第37-38页 |
2.3.4 诱导剂提高HLB防控效果 | 第38-39页 |
2.3.5 诱导剂处理柑橘后导致黄龙病病原菌含量下降 | 第39-40页 |
2.3.6 诱导剂改善筛管堵塞程度 | 第40-43页 |
2.3.7 诱导剂诱导柑橘植物抗病相关基因的表达 | 第43页 |
2.4 小结与讨论 | 第43-45页 |
第三章 诱导剂诱导柑橘蛋白质组学和转录组学的分析 | 第45-63页 |
3.1 实验材料 | 第45-46页 |
3.1.1 植物材料 | 第45页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第45页 |
3.1.3 试剂配方 | 第45-46页 |
3.2 实验方法 | 第46-48页 |
3.2.1 蛋白提取 | 第46页 |
3.2.2 蛋白浓度测定 | 第46-47页 |
3.2.3 蛋白酶解和TMT标记 | 第47页 |
3.2.4 高pH反相分离 | 第47页 |
3.2.5 低pHNANO-HPLC-MS/MS分析 | 第47页 |
3.2.6 数据库搜索 | 第47-48页 |
3.2.7 蛋白质鉴定标准 | 第48页 |
3.2.8 定量数据分析 | 第48页 |
3.2.9 转录组实验及分析流程 | 第48页 |
3.2.10 基因表达量分析 | 第48页 |
3.2.11 差异基因的生物信息学分析 | 第48页 |
3.3 结果与分析 | 第48-62页 |
3.3.1 蛋白组学数据报告基本信息 | 第48-54页 |
3.3.2 转录组数据报告基本信息 | 第54-55页 |
3.3.3 生物信息学分析 | 第55-61页 |
3.3.4 诱导剂诱导的柑橘差异表达蛋白 | 第61-62页 |
3.3.5 诱导剂诱导的柑橘差异表达基因 | 第62页 |
3.4 小结与讨论 | 第62-63页 |
第四章 诱导剂诱导柑橘差异表达蛋白和基因的验证 | 第63-81页 |
4.1 实验材料 | 第63-65页 |
4.1.1 植物材料 | 第63页 |
4.1.2 仪器与试剂耗材 | 第63-65页 |
4.2 实验方法 | 第65-70页 |
4.2.1 qPCR验证差异表达蛋白和基因 | 第65页 |
4.2.2 抗体制备 | 第65-68页 |
4.2.3 水杨酸茉莉酸含量测定 | 第68-69页 |
4.2.4 Westernblot分析 | 第69-70页 |
4.3 结果与分析 | 第70-79页 |
4.3.1 差异蛋白转录水平验证 | 第70-71页 |
4.3.2 差异基因的qPCR验证 | 第71-72页 |
4.3.3 差异蛋白的重组表达与纯化 | 第72-76页 |
4.3.4 抗体验证 | 第76-77页 |
4.3.5 诱导剂诱导柑橘CsSAMT和CsLOX2.1的上调表达 | 第77-78页 |
4.3.6 诱导剂诱导柑橘SA和JA积累 | 第78-79页 |
4.4 小结与讨论 | 第79-81页 |
第五章 全文结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-93页 |
附录 | 第93-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
作者简历 | 第99页 |