| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第16-23页 |
| 1.1 活性氧 | 第16-19页 |
| 1.1.1 活性氧的简介 | 第16-17页 |
| 1.1.2 活性氧的作用 | 第17-18页 |
| 1.1.3 抗氧化防御机制 | 第18-19页 |
| 1.2 谷胱甘肽过氧化物酶 | 第19-22页 |
| 1.2.1 谷胱甘肽过氧化物酶的概述 | 第19-20页 |
| 1.2.2 谷胱甘肽过氧化物酶的分类及功能 | 第20-21页 |
| 1.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶在鱼类中的研究现状 | 第21-22页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 大黄鱼LcGPx1a和LcGPx1b的基因克隆和功能分析 | 第23-47页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1.1 仪器与试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.2 菌株及其培养 | 第25页 |
| 2.1.3 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.4 总RNA提取 | 第25-27页 |
| 2.1.5 cDNA合成 | 第27页 |
| 2.1.6 LcGPx1a和LcGPx1b的cDNA核心序列克隆 | 第27-28页 |
| 2.1.7 PCR产物胶回收 | 第28页 |
| 2.1.8 TA克隆和测序 | 第28-30页 |
| 2.1.9 LcGPx1a和LcGPx1b的cDNA全长序列克隆 | 第30-33页 |
| 2.1.10 序列分析 | 第33-34页 |
| 2.1.11 LcGPx1a和LcGPx1b的组织特异性分布表达 | 第34-35页 |
| 2.1.12 大黄鱼感染副溶血弧菌后LcGPx1a和LcGPx1b的时空表达 | 第35页 |
| 2.1.13 数据分析 | 第35页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第35-46页 |
| 2.2.1 结果 | 第35-43页 |
| 2.2.2 讨论 | 第43-46页 |
| 2.3 本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 大黄鱼LcGPx4a和LcGPx4b的基因克隆和功能分析 | 第47-63页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-52页 |
| 3.1.1 仪器与试剂 | 第47页 |
| 3.1.2 菌株及其培养 | 第47页 |
| 3.1.3 实验材料 | 第47页 |
| 3.1.4 总RNA提取 | 第47-48页 |
| 3.1.5 cDNA合成 | 第48页 |
| 3.1.6 LcGPx4a和LcGPx4b的cDNA核心序列克隆 | 第48-49页 |
| 3.1.7 LcGPx4a和LcGPx4b的cDNA全长序列克隆 | 第49页 |
| 3.1.8 大黄鱼DNA的提取 | 第49-50页 |
| 3.1.9 LcGPx4a和LcGPx4b基因序列的克隆和分析 | 第50页 |
| 3.1.10 序列分析 | 第50-51页 |
| 3.1.11 LcGPx4a和LcGPx4b的组织特异性分布表达 | 第51页 |
| 3.1.12 大黄鱼感染副溶血弧菌后LcGPx1a和LcGPx1b的时空表达 | 第51页 |
| 3.1.13 数据分析 | 第51-52页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第52-61页 |
| 3.2.1 结果 | 第52-59页 |
| 3.2.2 讨论 | 第59-61页 |
| 3.3 本章小结 | 第61-63页 |
| 第四章 大黄鱼半胱氨酸突变型tla和tlb的原核表达和纯化 | 第63-76页 |
| 4.1 材料与方法 | 第63-71页 |
| 4.1.1 仪器与试剂 | 第63-65页 |
| 4.1.2 克隆载体pMD20-T-LcGPx1a、LcGPx1b的构建 | 第65-66页 |
| 4.1.3 质粒提取 | 第66-67页 |
| 4.1.4 Cys突变型表达载体pET-t1a、pET-t1b的构建 | 第67-68页 |
| 4.1.5 原核诱导表达 | 第68-69页 |
| 4.1.6 可溶性蛋白表达 | 第69页 |
| 4.1.7 可溶性蛋白纯化 | 第69-70页 |
| 4.1.8 透析及酶活测定 | 第70-71页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第71-75页 |
| 4.2.1. Cys突变型表达载体pET-t1a、pET-t1b的构建 | 第71页 |
| 4.2.2. 全菌蛋白表达 | 第71-72页 |
| 4.2.3. 可溶性蛋白表达 | 第72-74页 |
| 4.2.4. 酶活性测定 | 第74-75页 |
| 4.2.5. 讨论 | 第75页 |
| 4.3 本章小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第90页 |
