缩略语表 | 第7-10页 |
中文摘要 | 第10-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
前言 | 第17-18页 |
文献回顾 | 第18-29页 |
一.c-FLIP 研究进展 | 第18-21页 |
二.肿瘤葡萄糖代谢 | 第21-25页 |
三.葡萄糖转运体 | 第25-28页 |
四.泛素蛋白酶体途径 | 第28-29页 |
实验一 c-FLIP对肝癌细胞糖酵解糖及葡萄糖摄取的影响 | 第29-43页 |
引言 | 第29-30页 |
1 材料 | 第30-33页 |
1.1 试剂 | 第30页 |
1.2 细胞系和动物 | 第30-31页 |
1.3 仪器 | 第31页 |
1.4 慢病毒载体信息 | 第31-33页 |
1.5 引物 | 第33页 |
1.6 si RNA序列 | 第33页 |
2 方法 | 第33-38页 |
2.1 细胞培养 | 第33页 |
2.2 慢病毒感染及筛选 | 第33-34页 |
2.3 细胞转染 | 第34页 |
2.4 免疫印迹实验(Western Blot) | 第34-35页 |
2.5 实时定量PCR(q RT-PCR) | 第35-36页 |
2.6 细胞糖酵解测定 | 第36-37页 |
2.7 细胞乳酸测定 | 第37页 |
2.8 细胞葡萄糖摄取测定 | 第37页 |
2.9 肝癌荷瘤模型构建 | 第37-38页 |
2.10小动物PET-CT | 第38页 |
2.11统计分析 | 第38页 |
3 结果 | 第38-41页 |
3.1 c-FLIPL干涉稳转系构建及鉴定 | 第38-39页 |
3.2 c-FLIPL对肝癌细胞葡萄糖代谢的影响 | 第39-40页 |
3.3 c-FLIPL对葡萄糖摄取的影响 | 第40-41页 |
3.4 c-FLIPL对对肿瘤增殖的影响 | 第41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
实验二 c-FLIP促进肝癌细胞葡萄糖摄取的机制 | 第43-52页 |
引言 | 第43页 |
1 材料 | 第43-46页 |
1.1 细胞 | 第43-44页 |
1.2 试剂 | 第44-45页 |
1.3 仪器 | 第45页 |
1.4 引物及质粒载体信息 | 第45-46页 |
2 方法 | 第46-48页 |
2.1 细胞培养 | 第46页 |
2.2 免疫印迹(Western Blot) | 第46页 |
2.3 RT-q PCR | 第46页 |
2.4 蛋白泛素化检测 | 第46-47页 |
2.5 免疫共沉淀 | 第47页 |
2.6 间接免疫荧光 | 第47-48页 |
3 结果 | 第48-50页 |
3.1 c-FLIPL对葡萄糖转运体表达的影响 | 第48-49页 |
3.2 c-FLIPL对SGLTI泛素化的影响 | 第49页 |
3.3 c-FLIPL与SGLT1相互作用 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
实验三 c-FLIPL通过SGLT1促进肝癌细胞对低糖耐受 | 第52-62页 |
引言 | 第52页 |
1 材料 | 第52-54页 |
1.1 细胞系 | 第52-53页 |
1.2 试剂 | 第53页 |
1.3 仪器 | 第53-54页 |
1.4 引物和载体信息 | 第54页 |
2 方法 | 第54-55页 |
2.1 细胞培养 | 第54-55页 |
2.2 细胞转染 | 第55页 |
2.3 免疫印迹实验(Western Blot) | 第55页 |
2.4 RT-q PCR | 第55页 |
2.5 流式细胞仪测细胞凋亡 | 第55页 |
3 结果 | 第55-60页 |
3.1 肝癌细胞对低糖敏感性的比较 | 第55-56页 |
3.2 不同的肝癌细胞系中SGLT1的表达 | 第56-57页 |
3.3 SGLT1过表达质粒及干涉质粒的鉴定 | 第57页 |
3.4 SGLT1促进肝癌细胞对低糖的耐受 | 第57-58页 |
3.5 c-FLIPL促进肝癌细胞对低糖的耐受 | 第58-59页 |
3.6 c-FLIPL通过SGLT1促进肝癌细胞低糖耐受。 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
实验四 c-FLIP与SGLT1在肝癌中表达水平与肿瘤临床分期相关性 | 第62-71页 |
引言 | 第62页 |
1 材料 | 第62-65页 |
1.1 试剂 | 第62-63页 |
1.2 仪器 | 第63页 |
1.3 组织芯片信息 | 第63-65页 |
2 方法 | 第65-66页 |
2.1 SP免疫组化染色 | 第65页 |
2.2 免疫组化评分 | 第65页 |
2.3 统计方法 | 第65-66页 |
3 结果 | 第66-69页 |
3.1 c-FLIP与SGLT1在肝癌组织与癌旁组织的表达差异 | 第66-68页 |
3.2 c-FLIP与SGLT1在肝癌中的表达相关性 | 第68页 |
3.3 c-FLIP与SGLT1与肝癌临床分期相关性 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-71页 |
小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-84页 |
个人简历和研究成果 | 第84-85页 |
致谢 | 第85页 |