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凋亡抑制蛋白c-FLIP促进肝癌细胞葡萄糖代谢机制的研究

缩略语表第7-10页
中文摘要第10-13页
英文摘要第13-16页
前言第17-18页
文献回顾第18-29页
    一.c-FLIP 研究进展第18-21页
    二.肿瘤葡萄糖代谢第21-25页
    三.葡萄糖转运体第25-28页
    四.泛素蛋白酶体途径第28-29页
实验一 c-FLIP对肝癌细胞糖酵解糖及葡萄糖摄取的影响第29-43页
    引言第29-30页
    1 材料第30-33页
        1.1 试剂第30页
        1.2 细胞系和动物第30-31页
        1.3 仪器第31页
        1.4 慢病毒载体信息第31-33页
        1.5 引物第33页
        1.6 si RNA序列第33页
    2 方法第33-38页
        2.1 细胞培养第33页
        2.2 慢病毒感染及筛选第33-34页
        2.3 细胞转染第34页
        2.4 免疫印迹实验(Western Blot)第34-35页
        2.5 实时定量PCR(q RT-PCR)第35-36页
        2.6 细胞糖酵解测定第36-37页
        2.7 细胞乳酸测定第37页
        2.8 细胞葡萄糖摄取测定第37页
        2.9 肝癌荷瘤模型构建第37-38页
        2.10小动物PET-CT第38页
        2.11统计分析第38页
    3 结果第38-41页
        3.1 c-FLIPL干涉稳转系构建及鉴定第38-39页
        3.2 c-FLIPL对肝癌细胞葡萄糖代谢的影响第39-40页
        3.3 c-FLIPL对葡萄糖摄取的影响第40-41页
        3.4 c-FLIPL对对肿瘤增殖的影响第41页
    4 讨论第41-43页
实验二 c-FLIP促进肝癌细胞葡萄糖摄取的机制第43-52页
    引言第43页
    1 材料第43-46页
        1.1 细胞第43-44页
        1.2 试剂第44-45页
        1.3 仪器第45页
        1.4 引物及质粒载体信息第45-46页
    2 方法第46-48页
        2.1 细胞培养第46页
        2.2 免疫印迹(Western Blot)第46页
        2.3 RT-q PCR第46页
        2.4 蛋白泛素化检测第46-47页
        2.5 免疫共沉淀第47页
        2.6 间接免疫荧光第47-48页
    3 结果第48-50页
        3.1 c-FLIPL对葡萄糖转运体表达的影响第48-49页
        3.2 c-FLIPL对SGLTI泛素化的影响第49页
        3.3 c-FLIPL与SGLT1相互作用第49-50页
    4 讨论第50-52页
实验三 c-FLIPL通过SGLT1促进肝癌细胞对低糖耐受第52-62页
    引言第52页
    1 材料第52-54页
        1.1 细胞系第52-53页
        1.2 试剂第53页
        1.3 仪器第53-54页
        1.4 引物和载体信息第54页
    2 方法第54-55页
        2.1 细胞培养第54-55页
        2.2 细胞转染第55页
        2.3 免疫印迹实验(Western Blot)第55页
        2.4 RT-q PCR第55页
        2.5 流式细胞仪测细胞凋亡第55页
    3 结果第55-60页
        3.1 肝癌细胞对低糖敏感性的比较第55-56页
        3.2 不同的肝癌细胞系中SGLT1的表达第56-57页
        3.3 SGLT1过表达质粒及干涉质粒的鉴定第57页
        3.4 SGLT1促进肝癌细胞对低糖的耐受第57-58页
        3.5 c-FLIPL促进肝癌细胞对低糖的耐受第58-59页
        3.6 c-FLIPL通过SGLT1促进肝癌细胞低糖耐受。第59-60页
    4 讨论第60-62页
实验四 c-FLIP与SGLT1在肝癌中表达水平与肿瘤临床分期相关性第62-71页
    引言第62页
    1 材料第62-65页
        1.1 试剂第62-63页
        1.2 仪器第63页
        1.3 组织芯片信息第63-65页
    2 方法第65-66页
        2.1 SP免疫组化染色第65页
        2.2 免疫组化评分第65页
        2.3 统计方法第65-66页
    3 结果第66-69页
        3.1 c-FLIP与SGLT1在肝癌组织与癌旁组织的表达差异第66-68页
        3.2 c-FLIP与SGLT1在肝癌中的表达相关性第68页
        3.3 c-FLIP与SGLT1与肝癌临床分期相关性第68-69页
    4 讨论第69-71页
小结第71-72页
参考文献第72-84页
个人简历和研究成果第84-85页
致谢第85页

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