| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 目录 | 第11-16页 |
| 缩略词表 | 第16-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-35页 |
| 1.1 BK 通道的结构与功能 | 第17-27页 |
| 1.1.1 BK 通道简述 | 第17页 |
| 1.1.2 BK 通道α亚基的结构 | 第17-18页 |
| 1.1.3 BK 通道β亚基的结构 | 第18页 |
| 1.1.4 BK 通道γ亚基的结构 | 第18-20页 |
| 1.1.5 BK 通道亚型的多样性 | 第20-22页 |
| 1.1.6 BK 通道β亚基的 N-糖基化 | 第22页 |
| 1.1.7 BK 通道的电压和钙依赖性激活机制 | 第22-23页 |
| 1.1.8 BK 通道的生理与病理学特征 | 第23-27页 |
| 1.2 BK 通道的药理学研究 | 第27-32页 |
| 1.2.1 BK 通道激动剂 | 第27-28页 |
| 1.2.2 BK 通道阻断剂 | 第28-30页 |
| 1.2.3 特异性 BK 通道配体：martentoxin | 第30-32页 |
| 1.3 本文主要研究内容 | 第32-35页 |
| 第二章 Martentoxin 对大鼠 PTZ 模型的抗惊厥效应 | 第35-45页 |
| 2.1 引言 | 第35页 |
| 2.2 材料与方法 | 第35-37页 |
| 2.2.1 实验动物和药品 | 第35页 |
| 2.2.2 动物手术 | 第35-36页 |
| 2.2.3 大鼠惊厥行为观察 | 第36-37页 |
| 2.2.4 脑电的采集和分析 | 第37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-43页 |
| 2.3.1 Martentoxin 对于 PTZ 诱发惊厥行为的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.2 Martentoxin 对于 PTZ 诱发癫痫样脑电的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.3 Martentoxin 对于 PTZ 复发惊厥行为的影响 | 第39-41页 |
| 2.3.4 Martentoxin 对于 PTZ 复发癫痫样脑电的影响 | 第41-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-44页 |
| 2.4.1 Martentoxin 抑制 PTZ 诱发的惊厥行为及癫痫样放电的机制 | 第43-44页 |
| 2.4.2 Martentoxin 阻断神经型 BK 通道的药理学意义 | 第44页 |
| 2.5 结论 | 第44-45页 |
| 第三章 Martentoxin 独钟神经型 BK 通道的分子基础 | 第45-63页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 材料与方法 | 第45-53页 |
| 3.2.1 BK 通道质粒的制备 | 第45-46页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第46-47页 |
| 3.2.3 瞬时转染 | 第47-48页 |
| 3.2.4 同源建模 | 第48页 |
| 3.2.5 蛋白对接 | 第48页 |
| 3.2.6 BK 通道突变体和嵌合体的构建 | 第48-51页 |
| 3.2.7 电生理记录 | 第51-52页 |
| 3.2.8 溶液与药品 | 第52-53页 |
| 3.2.9 数据分析和统计 | 第53页 |
| 3.3 实验结果 | 第53-60页 |
| 3.3.1 Martentoxin 对神经型 BK 通道的抑制 | 第53页 |
| 3.3.2 Martentoxin 与 BK 通道模型的分子对接 | 第53-55页 |
| 3.3.3 Martentoxin 锚定 BK 通道（α+β4）靶标上的关键性对接残基 | 第55-56页 |
| 3.3.4 Martentoxin 对 BK 通道亚型（α）的低敏感性 | 第56-58页 |
| 3.3.5 Martentoxin 对嵌合体通道 BK（α+β1Lβ4）及 BK（α+β4Lβ1）的调制 | 第58-60页 |
| 3.4 讨论 | 第60-61页 |
| 3.4.1 神经型 BK 通道（α+β4）与 martentoxin 的相互作用模式 | 第60-61页 |
| 3.5 结论 | 第61-63页 |
| 第四章 Martentoxin 对胶质瘤型 BK 和 BK（α+β1）通道的增强效应 | 第63-83页 |
| 4.1 引言 | 第63页 |
| 4.2 材料与方法 | 第63-67页 |
| 4.2.1 细胞培养及转染 | 第63-64页 |
| 4.2.2 电生理记录 | 第64页 |
| 4.2.3 钙离子荧光成像 | 第64-65页 |
| 4.2.4 溶液与药品 | 第65页 |
| 4.2.5 U251-MG 细胞增殖检测 | 第65-66页 |
| 4.2.6 数据分析 | 第66-67页 |
| 4.3 实验结果 | 第67-77页 |
| 4.3.1 gBK 通道在 U251-MG 胶质瘤细胞的表达丰度 | 第67-68页 |
| 4.3.2 NPPB 敏感的氯离子通道对 martentoxin 不敏感 | 第68-69页 |
| 4.3.3 Martentoxin 剂量依赖性地增强 gBK 通道的活性 | 第69-71页 |
| 4.3.4 Martentoxin 对 gBK 通道的钙依赖及电压依赖性调制 | 第71页 |
| 4.3.5 Martentoxin 对 BK（α+β1）通道的剂量及电压依赖性调制 | 第71-75页 |
| 4.3.6 Martentoxin 对 BK 通道（α+β1）的钙依赖性调制 | 第75页 |
| 4.3.7 Iberiotoxin 抑制 martentoxin 对 BK 通道（α+β1）活性的增强效应 | 第75-77页 |
| 4.4 讨论 | 第77-81页 |
| 4.4.1 Martentoxin 对 BK 通道亚型的选择性 | 第77-78页 |
| 4.4.2 Martentoxin 对 BK 通道亚型的钙依赖性调制 | 第78-79页 |
| 4.4.3 Martentoxin 增加 gBK 和 BK（α+β1）通道活性的机制 | 第79-80页 |
| 4.4.4 Martentoxin 是 BK 通道相关疾病研究的有效工具 | 第80-81页 |
| 4.5 结论 | 第81-83页 |
| 第五章 Martentoxin 对β1 亚基去糖基化 BK 通道的药理调制作用 | 第83-99页 |
| 5.1 引言 | 第83页 |
| 5.2 材料与方法 | 第83-87页 |
| 5.2.1 β1 N80A/N142A 和β1 N80Q/N142Q 的构建 | 第83-86页 |
| 5.2.2 细胞培养及转染 | 第86页 |
| 5.2.3 Western Blot 分析 | 第86-87页 |
| 5.2.4 电生理记录 | 第87页 |
| 5.2.5 溶液及药品 | 第87页 |
| 5.2.6 数据分析 | 第87页 |
| 5.3 实验结果 | 第87-94页 |
| 5.3.1 糖基化的β1 亚基与 hSloα共表达于 HEK293T 细胞 | 第87-89页 |
| 5.3.2 β1 亚基的去糖基化改变了 BK（α+β1）通道的药理学性质 | 第89-92页 |
| 5.3.3 β1 亚基的去糖基化对 BK（α+β1）通道门控性质的影响 | 第92-94页 |
| 5.4 讨论 | 第94-97页 |
| 5.4.1 β亚基的去糖基化对 BK 通道亚型药理性质的调控作用 | 第94-96页 |
| 5.4.2 β1 亚基的去糖基化对 BK 通道亚型动力学性质的调控作用 | 第96-97页 |
| 5.5 结论 | 第97-99页 |
| 第六章 martentoxin 的重组表达与功能鉴定 | 第99-111页 |
| 6.1 引言 | 第99页 |
| 6.2 材料与方法 | 第99-103页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第99页 |
| 6.2.2 pGEX-4T-3-Martentoxin 质粒的构建 | 第99-100页 |
| 6.2.3 rMarTX 的体外表达与纯化 | 第100-101页 |
| 6.2.4 细胞培养及转染 | 第101页 |
| 6.2.5 电生理记录 | 第101-102页 |
| 6.2.6 溶液 | 第102-103页 |
| 6.2.7 多序列比对和 3D 建模 | 第103页 |
| 6.2.8 数据分析 | 第103页 |
| 6.3 实验结果 | 第103-107页 |
| 6.3.1 Martentoxin 的体外表达与纯化 | 第103-106页 |
| 6.3.2 rMarTX 对 BK 通道（α+β4）的抑制效应 | 第106页 |
| 6.3.3 rMarTX 对 Kv 通道的调制作用 | 第106-107页 |
| 6.4 讨论 | 第107-109页 |
| 6.4.1 Martentoxin 的重组表达 | 第107-109页 |
| 6.4.2 MarTX 的 N-末端保守性残基（Phe1） | 第109页 |
| 6.5 结论 | 第109-111页 |
| 第七章 总结与展望 | 第111-113页 |
| 7.1 结论 | 第111页 |
| 7.2 展望 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-131页 |
| 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第131-133页 |
| 作者在攻读博士学位期间所参与的项目 | 第133-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
