| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第12-28页 |
| 1.1 模式动物——斑马鱼 | 第12-13页 |
| 1.2 丙酮酸激酶(PK) | 第13-18页 |
| 1.2.1 丙酮酸激酶简介 | 第13页 |
| 1.2.2 PKM的可变剪接机制 | 第13页 |
| 1.2.3 PKM2的活性 | 第13-14页 |
| 1.2.4 PKM2在基因转录和肿瘤发生的功能 | 第14-16页 |
| 1.2.5 核定位信号与PKM2的进核机制 | 第16-18页 |
| 1.2.6 PKM2作为治疗肿瘤的新靶点 | 第18页 |
| 1.3 斑马鱼pkm基因 | 第18页 |
| 1.4 缺氧与缺氧诱导因子(HIFs) | 第18-24页 |
| 1.4.1 缺氧 | 第18-19页 |
| 1.4.2 缺氧手段 | 第19页 |
| 1.4.3 生物体对缺氧的应答机制 | 第19-20页 |
| 1.4.4 HIF-1的结构 | 第20页 |
| 1.4.5 HIF-1的活性 | 第20-21页 |
| 1.4.6 缺氧反应元件(Hypoxia Response Elements,HRE) | 第21页 |
| 1.4.7 HIF一1的靶基因 | 第21页 |
| 1.4.8 HIF-1与PKM2的关系 | 第21-23页 |
| 1.4.9 HIF-1α与肿瘤的关系 | 第23-24页 |
| 1.5 CRISPR/Cas9技术 | 第24-25页 |
| 1.6 本论文的立题依据 | 第25-27页 |
| 1.7 本论文的研究意义 | 第27-28页 |
| 2 斑马鱼pkm在早期胚胎发育的研究 | 第28-55页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第28-43页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.1.2 主要化学和生物试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第29-43页 |
| 2.2 实验结果 | 第43-51页 |
| 2.2.1 斑马鱼pkma/pkmb的序列分析 | 第43-44页 |
| 2.2.2 斑马鱼pkma/pkmb的时空表达谱分析 | 第44-45页 |
| 2.2.3 缺氧对斑马鱼成鱼和胚胎pkm mRNA表达水平的影响 | 第45-46页 |
| 2.2.4 斑马鱼Pkma与HIF-1α有相互作用 | 第46-49页 |
| 2.2.5 pkma是HIF-1α的靶基因 | 第49-50页 |
| 2.2.6 利用Cas9技术构建Pkmb敲除的突变体 | 第50-51页 |
| 2.3 总结与讨论 | 第51-55页 |
| 2.3.1 pkma/pkmb在斑马鱼胚胎发育早期有表达 | 第51-52页 |
| 2.3.2 缺氧能上调pkma/pkmb的表达以及Pkma/Pkmb和HIF-1α相互作用 | 第52-53页 |
| 2.3.3 缺氧能诱导Pkma/Pkmb入核 | 第53-54页 |
| 2.3.4 运用Cas9基因敲除技术构建Pkma/Pkmb功能缺失的突变体 | 第54-55页 |
| 3 展望 | 第55-57页 |
| 3.1 确定pkma/pkmb在斑马鱼胚胎发育中的功能及机制 | 第55页 |
| 3.2 探究Pkma/Pkmb是否和HIF-1α相互作用 | 第55-56页 |
| 3.3 Pkma/Pkmb在胚胎发育中的作用是否与HIF信号通路相关 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 个人简历 | 第64页 |
| 发表的学术论文 | 第64页 |
