| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-23页 |
| 1 光敏色素蛋白质的结构、特征及光感受特征 | 第12-13页 |
| 2 光敏色素在水稻生长发育中的功能 | 第13-16页 |
| 2.1 光敏色素在水稻苗期中的作用 | 第13-14页 |
| 2.2 光敏色素在水稻成熟期中的作用 | 第14页 |
| 2.3 光敏色素介导的水稻光周期开花及其在育性中的作用 | 第14-15页 |
| 2.4 光敏色素在水稻耐逆境胁迫中的作用 | 第15-16页 |
| 3 PIF转录因子的结构特征 | 第16-17页 |
| 4 PIF转录因子与光信号传导 | 第17-20页 |
| 4.1 光/暗条件下PIF基因的调节机制 | 第18-20页 |
| 4.2 拟南芥PIF基因功能 | 第20页 |
| 5 水稻PIF蛋白研究现状 | 第20-21页 |
| 6 研究意义 | 第21-23页 |
| 第一部分 OsPIL14蛋白质的结构特征 | 第23-34页 |
| 1.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 1.1.1 质粒和菌株 | 第23页 |
| 1.1.2 试剂及试剂盒 | 第23页 |
| 1.1.3 引物设计合成 | 第23-24页 |
| 1.1.4 培养基 | 第24页 |
| 1.1.5 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 1.2 实验方法 | 第25-29页 |
| 1.2.1 OsPIL14基因编码蛋白质的结构分析 | 第25页 |
| 1.2.2 OsPIL14蛋白质的亚细胞定位 | 第25-28页 |
| 1.2.2.1 OsPIL14-p EASY-Blunt3克隆载体构建 | 第25-27页 |
| 1.2.2.2 OsPIL14-p BI221-GFP载体构建 | 第27-28页 |
| 1.2.2.3 OsPIL14-p BI221-GFP质粒大量提取 | 第28页 |
| 1.2.3 酵母双杂交实验分析OsPIL14与phy A、phy B和phy C之间的相互作用 | 第28-29页 |
| 1.2.3.1 酵母感受态的制备 | 第28-29页 |
| 1.2.3.2 酵母转化 | 第29页 |
| 1.3 实验结果 | 第29-34页 |
| 1.3.1 OsPIL14基因编码蛋白质的结构特点 | 第29-30页 |
| 1.3.2 OsPIL14的亚细胞定位 | 第30-31页 |
| 1.3.3 利用酵母双杂交实验分析OsPIL14与Os PHYs的相互作用 | 第31-32页 |
| 1.3.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第二部分 OsPIL14基因的表达模式分析 | 第34-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 2.1.2 试剂及试剂盒 | 第34页 |
| 2.1.3 引物设计合成 | 第34-35页 |
| 2.1.4 培养基 | 第35页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-38页 |
| 2.2.1 OsPIL14组织表达特异性 | 第35-38页 |
| 2.2.1.1 水稻RNA的粗提 | 第35-36页 |
| 2.2.1.2 去除基因组DNA反应 | 第36页 |
| 2.2.1.3 反转录反应 | 第36-37页 |
| 2.2.1.4 荧光定量PCR检测 | 第37-38页 |
| 2.2.2 R对OsPIL14基因表达水平的影响 | 第38页 |
| 2.2.3 FR对OsPIL14基因表达水平的影响 | 第38页 |
| 2.2.4 比较R/FR处理不同时间后的OsPIL14基因表达模式 | 第38页 |
| 2.3 实验结果 | 第38-43页 |
| 2.3.1 OsPIL14基因的组织表达特异性 | 第38-39页 |
| 2.3.2 红光和远红光对OsPIL14基因表达水平的影响 | 第39-41页 |
| 2.3.3 光敏色素介导的远红光对OsPIL14基因表达的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.4 不同光照长度的R和FR对OsPIL14基因表达的影响 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-44页 |
| 第三部分 OsPIL14基因在水稻生长发育中的作用 | 第44-68页 |
| 3.1 植物材料 | 第44页 |
| 3.2 试剂及试剂盒 | 第44页 |
| 3.3 引物设计合成 | 第44-45页 |
| 3.4 仪器设备 | 第45页 |
| 3.5 实验方法 | 第45-50页 |
| 3.5.1 In-Fusion法构建植物过表达载体 | 第45-46页 |
| 3.5.2 带有标签过表达载体的构建及转基因植株的转化 | 第46-47页 |
| 3.5.3 OsPIL14基因过表达转基因水稻植株的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.5.4 利用Southern blot实验检测OsPIL14转基因水稻外源基因插入位点 | 第48页 |
| 3.5.5 OsPIL14转基因表达水平检测 | 第48页 |
| 3.5.6 培育OsPIL14-CRISPR功能缺失突变体转基因植株 | 第48页 |
| 3.5.7 暗生长条件下，OsPIL14转基因株系的幼苗表型 | 第48-49页 |
| 3.5.8 R和FR对OsPIL14-OX株系幼苗表型的影响 | 第49页 |
| 3.5.9 OsPIL14转基因株系大田农艺性状调查 | 第49页 |
| 3.5.10 OsPIL14转基因水稻株系籽粒粒型分析 | 第49-50页 |
| 3.5.11 OsPIL14-CRISPR转基因水稻株系耐盐性分析 | 第50页 |
| 3.6 实验结果 | 第50-68页 |
| 3.6.1 OsPIL14基因过表达转基因植株的培育及鉴定 | 第50-51页 |
| 3.6.2 OsPIL14转基因水稻外源基因插入位点检测及表达水平检测 | 第51-52页 |
| 3.6.3 OsPIL14 CRISPR/Cas9转基因水稻的培育 | 第52-53页 |
| 3.6.4 转基因水稻的光形态建成特征及暗形态建成特征 | 第53-57页 |
| 3.6.4.1 转基因水稻的暗形态建成 | 第53-54页 |
| 3.6.4.2 红光和远红光对OsPIL14转基因水稻幼苗的影响 | 第54-57页 |
| 3.6.5 OsPIL14转基因株系的田间表型分析 | 第57-59页 |
| 3.6.5.1 OsPIL14-CRISPR株系的大田农艺性状分析 | 第58-59页 |
| 3.6.6 OsPIL14-CRISPR株系穗建成分析 | 第59-60页 |
| 3.6.7 OsPIL14转基因株系籽粒粒型分析 | 第60-62页 |
| 3.6.8 OsPIL14转基因株系耐盐性分析 | 第62-64页 |
| 3.6.9 讨论 | 第64-68页 |
| 3.6.9.1 黑暗条件下OsPIL14基因可影响中胚轴及胚芽鞘生长 | 第64-65页 |
| 3.6.9.2 OsPIL14基因参与R和FR介导的光形态建成途径 | 第65页 |
| 3.6.9.3 OsPIL14基因对水稻生长发育各阶段的作用 | 第65-66页 |
| 3.6.9.4 OsPIL14基因影响水稻盐胁迫耐性 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附录 | 第77-83页 |
