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发根农杆菌介导IRT1基因转化镉超富集植物油菜的研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
1 引言第12-19页
    1.1 重金属镉超富集植物研究现状第12-13页
        1.1.1 重金属镉污染的现状和危害第12页
        1.1.2 植物修复的应用及优势第12-13页
        1.1.3 重金属镉超富集植物和油菜第13页
    1.2 植物对镉富集的分子机制和植物的转基因改造第13-15页
        1.2.1 植物对镉富集的分子机制第13-14页
        1.2.2 重金属超富集植物的转基因改造研究进展第14-15页
        1.2.3 转基因改造的研究方法第15页
    1.3 毛状根组织在植物修复中的作用第15-18页
        1.3.1 植物组织在植物修复中的应用研究第15-16页
        1.3.2 毛状根的遗传转化及鉴定第16-17页
        1.3.3 毛状根的特性及应用于植物修复中的优势第17-18页
    1.4 本实验的研究目的和意义第18-19页
        1.4.1 目的第18页
        1.4.2 意义第18-19页
2 实验材料及方法第19-30页
    2.1 实验材料第19-20页
        2.1.1 生物材料第19页
        2.1.2 试剂和主要仪器第19-20页
        2.1.3 培养基第20页
    2.2 实验方法第20-30页
        2.2.1 发根农杆菌的活化及制备第20-21页
        2.2.2 植物外植体的获得第21页
        2.2.3 毛状根的诱导及继代培养第21页
        2.2.4 毛状根的PCR检测第21-22页
        2.2.5 毛状根培养优化实验设计第22-23页
            2.2.5.1 不同侵染时间对毛状根诱导的影响第22页
            2.2.5.2 预培养中NAA浓度对毛状根诱导的影响第22-23页
        2.2.6 IRT1编码基因的合成第23-25页
        2.2.7 目的基因IRT1和载体pRI101的扩增第25-26页
            2.2.7.1 目的基因IRT1的扩增第25页
            2.2.7.2 载体pRI101的扩增第25-26页
        2.2.8 重组质粒pRI101-IRT1的构建第26-28页
            2.2.8.1 pUC57和pRI101单酶切鉴定第26页
            2.2.8.2 pUC57和pRI101质粒双酶切鉴定第26页
            2.2.8.3 胶回收IRT1和pRI101片段第26-27页
            2.2.8.4 IRT1与pRI101的连接第27页
            2.2.8.5 重组质粒热激法转化大肠杆菌第27-28页
        2.2.9 重组农杆菌ATCC15834的获得第28页
            2.2.9.1 农杆菌ATCC15834感受态细胞的制备第28页
            2.2.9.2 重组质粒热激法转化农杆菌ATCC15834第28页
        2.2.10 转IRT1基因毛状根的诱导及PCR检测第28-29页
        2.2.11 转IRT1基因对毛状根富集Cd能力的影响第29-30页
            2.2.11.1 不同浓度Cd对转IRT1基因毛状根生长状况和生物量的影响第29页
            2.2.11.2 在不同浓度Cd培养基上培养的转IRT1毛状根富集Cd的测定第29-30页
3 实验结果与讨论第30-46页
    3.1 油菜毛状根的获得和PCR检测第30-32页
    3.2 毛状根优化实验结果第32-34页
        3.2.1 不同侵染时间对油菜毛状根、不定根诱导率的影响第32-33页
        3.2.2 不同激素浓度对农杆菌诱导毛状根及诱导不定根的影响第33-34页
    3.3 质粒pUC57、pRI101的单、双酶切第34-36页
    3.4 连接产物电泳及IRT1-pRI101重组质粒的获得第36-38页
    3.5 转IRT1基因毛状根的诱导和PCR鉴定第38-39页
    3.6 转IRT1基因对毛状根富集Cd能力的影响第39-46页
        3.6.1 不同浓度Cd对转IRT1基因毛状根生长状况的影响第39-41页
        3.6.2 Cd对转IRT1基因毛状根生物量的影响第41-42页
        3.6.3 转IRT1基因毛状根培养过程中Cd含量的变化第42-46页
结论第46-47页
参考文献第47-50页
作者简历及攻读硕士学位期间取得的研究成果第50-52页
学位论文数据集第52页

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