致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
1 引言 | 第12-19页 |
1.1 重金属镉超富集植物研究现状 | 第12-13页 |
1.1.1 重金属镉污染的现状和危害 | 第12页 |
1.1.2 植物修复的应用及优势 | 第12-13页 |
1.1.3 重金属镉超富集植物和油菜 | 第13页 |
1.2 植物对镉富集的分子机制和植物的转基因改造 | 第13-15页 |
1.2.1 植物对镉富集的分子机制 | 第13-14页 |
1.2.2 重金属超富集植物的转基因改造研究进展 | 第14-15页 |
1.2.3 转基因改造的研究方法 | 第15页 |
1.3 毛状根组织在植物修复中的作用 | 第15-18页 |
1.3.1 植物组织在植物修复中的应用研究 | 第15-16页 |
1.3.2 毛状根的遗传转化及鉴定 | 第16-17页 |
1.3.3 毛状根的特性及应用于植物修复中的优势 | 第17-18页 |
1.4 本实验的研究目的和意义 | 第18-19页 |
1.4.1 目的 | 第18页 |
1.4.2 意义 | 第18-19页 |
2 实验材料及方法 | 第19-30页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 生物材料 | 第19页 |
2.1.2 试剂和主要仪器 | 第19-20页 |
2.1.3 培养基 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-30页 |
2.2.1 发根农杆菌的活化及制备 | 第20-21页 |
2.2.2 植物外植体的获得 | 第21页 |
2.2.3 毛状根的诱导及继代培养 | 第21页 |
2.2.4 毛状根的PCR检测 | 第21-22页 |
2.2.5 毛状根培养优化实验设计 | 第22-23页 |
2.2.5.1 不同侵染时间对毛状根诱导的影响 | 第22页 |
2.2.5.2 预培养中NAA浓度对毛状根诱导的影响 | 第22-23页 |
2.2.6 IRT1编码基因的合成 | 第23-25页 |
2.2.7 目的基因IRT1和载体pRI101的扩增 | 第25-26页 |
2.2.7.1 目的基因IRT1的扩增 | 第25页 |
2.2.7.2 载体pRI101的扩增 | 第25-26页 |
2.2.8 重组质粒pRI101-IRT1的构建 | 第26-28页 |
2.2.8.1 pUC57和pRI101单酶切鉴定 | 第26页 |
2.2.8.2 pUC57和pRI101质粒双酶切鉴定 | 第26页 |
2.2.8.3 胶回收IRT1和pRI101片段 | 第26-27页 |
2.2.8.4 IRT1与pRI101的连接 | 第27页 |
2.2.8.5 重组质粒热激法转化大肠杆菌 | 第27-28页 |
2.2.9 重组农杆菌ATCC15834的获得 | 第28页 |
2.2.9.1 农杆菌ATCC15834感受态细胞的制备 | 第28页 |
2.2.9.2 重组质粒热激法转化农杆菌ATCC15834 | 第28页 |
2.2.10 转IRT1基因毛状根的诱导及PCR检测 | 第28-29页 |
2.2.11 转IRT1基因对毛状根富集Cd能力的影响 | 第29-30页 |
2.2.11.1 不同浓度Cd对转IRT1基因毛状根生长状况和生物量的影响 | 第29页 |
2.2.11.2 在不同浓度Cd培养基上培养的转IRT1毛状根富集Cd的测定 | 第29-30页 |
3 实验结果与讨论 | 第30-46页 |
3.1 油菜毛状根的获得和PCR检测 | 第30-32页 |
3.2 毛状根优化实验结果 | 第32-34页 |
3.2.1 不同侵染时间对油菜毛状根、不定根诱导率的影响 | 第32-33页 |
3.2.2 不同激素浓度对农杆菌诱导毛状根及诱导不定根的影响 | 第33-34页 |
3.3 质粒pUC57、pRI101的单、双酶切 | 第34-36页 |
3.4 连接产物电泳及IRT1-pRI101重组质粒的获得 | 第36-38页 |
3.5 转IRT1基因毛状根的诱导和PCR鉴定 | 第38-39页 |
3.6 转IRT1基因对毛状根富集Cd能力的影响 | 第39-46页 |
3.6.1 不同浓度Cd对转IRT1基因毛状根生长状况的影响 | 第39-41页 |
3.6.2 Cd对转IRT1基因毛状根生物量的影响 | 第41-42页 |
3.6.3 转IRT1基因毛状根培养过程中Cd含量的变化 | 第42-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
作者简历及攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第50-52页 |
学位论文数据集 | 第52页 |