| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-31页 |
| 1、耐盐模式植物盐芥(Thellungiella halophila )的相关情况概述 | 第13-18页 |
| 2、构建突变体库的意义和方法 | 第18-29页 |
| ·构建突变体库的意义 | 第18页 |
| ·构建突变库的方法 | 第18-29页 |
| ·自发突变 | 第18-19页 |
| ·理化诱变 | 第19-20页 |
| ·插入突变 | 第20-29页 |
| ·T-DNA 插入法 | 第20-26页 |
| ·T-DNA 标签的原理概述 | 第21-22页 |
| ·T-DNA 插入构建突变库的方法 | 第22-26页 |
| ·基因敲除 | 第22-23页 |
| ·T-DNA 介导的基因捕获技术 | 第23-24页 |
| ·激活标签技术 | 第24-26页 |
| ·转座子标签法 | 第26-29页 |
| ·获得插入位点侧翼序列的方法 | 第29页 |
| 3、生物信息学概述 | 第29-30页 |
| 4、本研究的意义 | 第30-31页 |
| 第二部分 实验论文 | 第31-59页 |
| 第一章 盐芥激活标签突变体库的建立 | 第31-49页 |
| 1. 实验材料及仪器 | 第31-33页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·菌种及质粒 | 第31页 |
| ·酶及化学试剂 | 第31-32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32-33页 |
| ·软件 | 第33页 |
| 2. 实验方法 | 第33-40页 |
| ·盐芥的转化(花浸染法) | 第33-34页 |
| ·浸染用盐芥的准备 | 第33页 |
| ·转化用农杆菌的准备 | 第33-34页 |
| ·四个串联增强子的PCR 检测 | 第33-34页 |
| ·转化用农杆菌菌液的制备 | 第34页 |
| ·Floral dip 法转化盐芥 | 第34页 |
| ·basta 抗性苗的筛选 | 第34页 |
| ·CTAB 法微量提取DNA | 第34-35页 |
| ·basta 抗性苗的PCR 检测 | 第35-36页 |
| ·侧翼序列的获得 | 第36-37页 |
| ·TAIL-PCR 法扩增侧翼序列 | 第36-37页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| ·TAIL-PCR 反应体系 | 第36-37页 |
| ·TAIL-PCR 反应程序 | 第37页 |
| ·GeneClean 方法从琼脂糖凝胶上回收DNA 片段 | 第37-38页 |
| ·PCR 产物与T-载体的连接 | 第38页 |
| ·大肠杆菌DH108 感受态细胞的制备和转化 | 第38-39页 |
| ·质粒的提取及酶切验证 | 第39-40页 |
| ·PCR 产物测序及序列分析 | 第40页 |
| ·激活标记突变体种子的收获与保存 | 第40页 |
| 3. 实验结果及分析 | 第40-49页 |
| ·激活标记载体四个串联增强子的PCR 检测 | 第40-41页 |
| ·盐芥的萌发与春化 | 第41-42页 |
| ·Basta 抗性苗的获得 | 第42页 |
| ·Basta 抗性苗DNA 提取 | 第42-43页 |
| ·Basta 抗性苗的PCR 检测结果 | 第43页 |
| ·侧翼序列的获得和分析 | 第43-49页 |
| 第二章 盐芥转座子标签突变体的筛选 | 第49-55页 |
| 1. 实验材料及仪器 | 第49页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·菌种及质粒 | 第49页 |
| ·酶及化学试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器设备 | 第49页 |
| 2. 实验方法 | 第49-52页 |
| ·质粒提取 | 第49-50页 |
| ·质粒的农杆菌转化 | 第50页 |
| ·转化用农杆菌菌液的制备 | 第50页 |
| ·花浸染法转化盐芥 | 第50-51页 |
| ·抗性苗的筛选 | 第51页 |
| ·CTAB 微量法提取抗性苗基因组DNA | 第51页 |
| ·抗性苗的检测与分子鉴定 | 第51-52页 |
| ·Ds 转基因苗的PCR 检测 | 第51-52页 |
| ·Bar 基因的PCR 检测 | 第51-52页 |
| ·GUS 基因的PCR 检测 | 第52页 |
| 3 结果分析 | 第52-55页 |
| ·转基因苗的获得 | 第52-53页 |
| ·Ds 转基因苗的获得 | 第53页 |
| ·抗性苗基因组DNA 的提取 | 第53-54页 |
| ·抗性苗的PCR 检测 | 第54-55页 |
| ·Ds 转基因苗的PCR 检测 | 第54-55页 |
| ·Bar 基因的PCR 检测 | 第54页 |
| ·GUS 基因的PCR 检测 | 第54-55页 |
| 第三章 讨论 | 第55-59页 |
| 1. 转化用盐芥的准备 | 第55页 |
| 2. 盐芥的转化效率 | 第55-56页 |
| 3. 侧翼序列的获得 | 第56-57页 |
| 4. T-DNA 标签技术和转座子标签技术的比较 | 第57页 |
| 5. 以后的工作 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论著 | 第66页 |