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盐芥激活标签突变体库的构建及盐芥转座子标签突变体的筛选

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
第一部分 文献综述第13-31页
 1、耐盐模式植物盐芥(Thellungiella halophila )的相关情况概述第13-18页
 2、构建突变体库的意义和方法第18-29页
   ·构建突变体库的意义第18页
   ·构建突变库的方法第18-29页
     ·自发突变第18-19页
     ·理化诱变第19-20页
     ·插入突变第20-29页
       ·T-DNA 插入法第20-26页
         ·T-DNA 标签的原理概述第21-22页
         ·T-DNA 插入构建突变库的方法第22-26页
           ·基因敲除第22-23页
           ·T-DNA 介导的基因捕获技术第23-24页
           ·激活标签技术第24-26页
       ·转座子标签法第26-29页
       ·获得插入位点侧翼序列的方法第29页
 3、生物信息学概述第29-30页
 4、本研究的意义第30-31页
第二部分 实验论文第31-59页
 第一章 盐芥激活标签突变体库的建立第31-49页
  1. 实验材料及仪器第31-33页
   ·植物材料第31页
   ·菌种及质粒第31页
   ·酶及化学试剂第31-32页
   ·主要仪器设备第32页
   ·培养基第32-33页
   ·软件第33页
  2. 实验方法第33-40页
   ·盐芥的转化(花浸染法)第33-34页
     ·浸染用盐芥的准备第33页
     ·转化用农杆菌的准备第33-34页
       ·四个串联增强子的PCR 检测第33-34页
       ·转化用农杆菌菌液的制备第34页
     ·Floral dip 法转化盐芥第34页
   ·basta 抗性苗的筛选第34页
   ·CTAB 法微量提取DNA第34-35页
   ·basta 抗性苗的PCR 检测第35-36页
   ·侧翼序列的获得第36-37页
     ·TAIL-PCR 法扩增侧翼序列第36-37页
       ·引物设计第36页
       ·TAIL-PCR 反应体系第36-37页
       ·TAIL-PCR 反应程序第37页
   ·GeneClean 方法从琼脂糖凝胶上回收DNA 片段第37-38页
   ·PCR 产物与T-载体的连接第38页
   ·大肠杆菌DH108 感受态细胞的制备和转化第38-39页
   ·质粒的提取及酶切验证第39-40页
   ·PCR 产物测序及序列分析第40页
   ·激活标记突变体种子的收获与保存第40页
  3. 实验结果及分析第40-49页
   ·激活标记载体四个串联增强子的PCR 检测第40-41页
   ·盐芥的萌发与春化第41-42页
   ·Basta 抗性苗的获得第42页
   ·Basta 抗性苗DNA 提取第42-43页
   ·Basta 抗性苗的PCR 检测结果第43页
   ·侧翼序列的获得和分析第43-49页
 第二章 盐芥转座子标签突变体的筛选第49-55页
  1. 实验材料及仪器第49页
   ·植物材料第49页
   ·菌种及质粒第49页
   ·酶及化学试剂第49页
   ·主要仪器设备第49页
  2. 实验方法第49-52页
   ·质粒提取第49-50页
   ·质粒的农杆菌转化第50页
   ·转化用农杆菌菌液的制备第50页
   ·花浸染法转化盐芥第50-51页
   ·抗性苗的筛选第51页
   ·CTAB 微量法提取抗性苗基因组DNA第51页
   ·抗性苗的检测与分子鉴定第51-52页
     ·Ds 转基因苗的PCR 检测第51-52页
       ·Bar 基因的PCR 检测第51-52页
       ·GUS 基因的PCR 检测第52页
  3 结果分析第52-55页
   ·转基因苗的获得第52-53页
     ·Ds 转基因苗的获得第53页
   ·抗性苗基因组DNA 的提取第53-54页
   ·抗性苗的PCR 检测第54-55页
     ·Ds 转基因苗的PCR 检测第54-55页
       ·Bar 基因的PCR 检测第54页
       ·GUS 基因的PCR 检测第54-55页
 第三章 讨论第55-59页
  1. 转化用盐芥的准备第55页
  2. 盐芥的转化效率第55-56页
  3. 侧翼序列的获得第56-57页
  4. T-DNA 标签技术和转座子标签技术的比较第57页
  5. 以后的工作第57-59页
参考文献第59-64页
附录第64-65页
致谢第65-66页
攻读硕士学位期间发表的学术论著第66页

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