中文摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
目录 | 第9-12页 |
英文缩略词表 | 第12-14页 |
前言 | 第14-20页 |
第一章 LIPIN1抑制CLOCK/BMAL1的转录活性 | 第20-43页 |
1.1 实验材料与试剂 | 第20-26页 |
1.1.1 实验仪器 | 第20-21页 |
1.1.2 主要实验试剂 | 第21-23页 |
1.1.3 主要试剂配制 | 第23-25页 |
1.1.4 实验用细胞和质粒 | 第25-26页 |
1.2 实验方法 | 第26-36页 |
1.2.1 LIPIN1与BMAL1、CLOCK免疫共沉淀 | 第26-29页 |
1.2.2 GST pull down探究LIPIN1与BMAL1、CLOCK结合结构域 | 第29-32页 |
1.2.3 萤光素酶报告系统检测LIPIN1对CLOCK/BMAL1转录活性的影响 | 第32-35页 |
1.2.4 筛选LIPIN1影响CLOCK/BMAL1转录活性的功能结构域 | 第35-36页 |
1.2.5 LIPIN1调节BMAL1的亚细胞定位 | 第36页 |
1.3 实验结果 | 第36-42页 |
1.3.1 LIPIN1与BMAL1、CLOCK之间相互作用 | 第36-37页 |
1.3.2 GST pull down探究LIPIN1的结合结构域 | 第37-39页 |
1.3.3 萤光素酶报告系统检测LIPIN1对CLOCK/BMAL1的抑制作用 | 第39-40页 |
1.3.4 筛选LIPIN1抑制效应的功能结构域 | 第40页 |
1.3.5 LIPIN1调节BMAL1的亚细胞定位 | 第40-42页 |
1.4 分析与讨论 | 第42-43页 |
第二章 LIPIN1敲除小鼠的节律行为和时钟基因表达 | 第43-53页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第44-45页 |
2.1.1 实验仪器 | 第44页 |
2.1.2 主要实验试剂 | 第44页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第44页 |
2.1.4 实验用小鼠 | 第44-45页 |
2.2 实验方法 | 第45-49页 |
2.2.1 免疫共沉淀检测小鼠肝脏中LIPIN1与BMAL1,CLOCK相互作用 | 第45页 |
2.2.2 LIPIN1敲除小鼠行为学实验检测昼夜节律变化 | 第45页 |
2.2.3 LIPIN1敲除小鼠时钟基因表达 | 第45-48页 |
2.2.4 改变进食后LIPIN1小鼠昼夜节律时钟基因的表达 | 第48-49页 |
2.3 实验结果 | 第49-52页 |
2.3.1 小鼠肝脏中LIPIN1与BMAL1,CLOCK相互作用 | 第49-50页 |
2.3.2 LIPIN1敲除小鼠行为学实验检测昼夜节律变化 | 第50页 |
2.3.3 LIPIN1敲除小鼠影响昼夜节律时钟基因表达 | 第50-51页 |
2.3.4 进食影响LIPIN1敲除小鼠昼夜节律时钟基因的表达 | 第51-52页 |
2.4 分析与讨论 | 第52-53页 |
第三章 LIPIN1在果蝇中调节昼夜节律 | 第53-58页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第53-54页 |
3.1.1 实验仪器 | 第53页 |
3.1.2 主要实验试剂与耗材 | 第53页 |
3.1.3 主要试剂的配制 | 第53-54页 |
3.1.4 实验用果蝇 | 第54页 |
3.2 实验方法 | 第54-56页 |
3.2.1 神经系统中LIPIN1 RNAi果蝇的行为学实验 | 第54页 |
3.2.2 神经系统中LIPIN1 RNAi果蝇的时钟基因表达 | 第54-56页 |
3.3 实验结果 | 第56-57页 |
3.3.1 神经系统中LIPIN1 RNAi果蝇的昼夜节律减弱 | 第56页 |
3.3.2 神经系统LIPIN1 RNAi果蝇昼夜节律时钟基因表达下降 | 第56-57页 |
3.4 分析与讨论 | 第57-58页 |
全文总结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
综述 | 第67-77页 |
参考文献 | 第72-77页 |
在读期间主要研究成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |