摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1. 引言 | 第11-24页 |
·α-法尼烯的代谢途径及其生物学功能 | 第11-17页 |
·α-法尼烯的代谢途径 | 第11-14页 |
·α-法尼烯的生物学功能 | 第14-17页 |
·农杆菌介导的番茄遗传转化的研究进展 | 第17-21页 |
·番茄基因转化的方法及供受体系统 | 第17-18页 |
·影响番茄叶片高效再生的因素 | 第18-20页 |
·影响转化的因素 | 第20-21页 |
·存在的问题及对策 | 第21-22页 |
·外源基因的表达强度不够,难以达到理想效果 | 第21页 |
·转化的目的基因有限 | 第21页 |
·对转化植株的选择不够重视 | 第21-22页 |
·再生和转化的受体系统单一 | 第22页 |
·研究目的意义及前景展望 | 第22-24页 |
·研究目的意义 | 第22-23页 |
·前景展望 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-44页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·酶及生化试剂 | 第24页 |
·PCR 引物 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-44页 |
·Trizol 法提取苹果总RNA | 第25页 |
·RNA 反转录 | 第25-26页 |
·苹果α-法尼烯合成酶表达载体的构建 | 第26-30页 |
·番茄子叶高效再生体系的建立 | 第30-31页 |
·农杆菌介导的番茄离体子叶遗传转化体系的建立 | 第31-33页 |
·PCR 检测转基因植株 | 第33-34页 |
·转基因植株表达量分析 | 第34-35页 |
·转基因植株的Western 检测 | 第35-40页 |
·转基因番茄抗高温指标测定 | 第40-41页 |
·利用原生质体进行的亚细胞定位 | 第41-43页 |
·叶片和果实中挥发物的测定 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-63页 |
·正义表达载体的构建 | 第44-45页 |
·番茄子叶高效再生及遗传转化体系的优化 | 第45-49页 |
·不同激素组合对番茄子叶愈伤组织及芽形成的影响 | 第45-46页 |
·不同浓度生长素对生根的影响 | 第46-47页 |
·卡那霉素选择压的确定 | 第47-48页 |
·头孢霉素(Cef)对子叶再生的影响 | 第48-49页 |
·农杆菌侵染时间的确定 | 第49页 |
·转基因植株的检测及基因的表达分析 | 第49-53页 |
·AFS 基因转化番茄及转基因植株的PCR 检测 | 第49-50页 |
·转基因植株AFS 基因表达分析 | 第50-51页 |
·转基因植株western 的检测 | 第51-53页 |
·高温对转AFS 基因番茄的影响 | 第53-57页 |
·转AFS 基因番茄光合速率对温度的响应 | 第53页 |
·高温胁迫下转AFS 基因番茄净光合速率的变化 | 第53-54页 |
·高温处理后转基因番茄和野生型番茄最大光化学效率的变化 | 第54-55页 |
·高温胁迫下转AFS 基因过表达对番茄叶片中MDA 含量的影响 | 第55-56页 |
·高温胁迫下转基因番茄相对电导率的测定 | 第56-57页 |
·转AFS 基因对番茄叶片中叶绿素和类胡萝卜素的含量影响 | 第57页 |
·α–法尼烯合成酶亚细胞定位的研究 | 第57-60页 |
·pBI-AFS-GFP 亚细胞定位表达载体的构建 | 第57-59页 |
·融合蛋白荧光信号的检测 | 第59-60页 |
·果实及叶片中挥发物的测定 | 第60-63页 |
4 讨论 | 第63-68页 |
·番茄再生及遗传转化 | 第63-64页 |
·AFS 基因在转基因番茄中的表达分析 | 第64页 |
·α-法尼烯合成酶的亚细胞定位与α-法尼烯的释放 | 第64-66页 |
·转基因植株的生理特性 | 第66-68页 |
5 结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-81页 |
附录:常用溶液的配制 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第83页 |