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枯草芽孢杆菌泰山株的分离鉴定及其对黄曲霉毒素的降解作用研究

符号说明第5-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-13页
1 引言第14-32页
    1.1 黄曲霉毒素的基本概况第14-17页
        1.1.1 黄曲霉毒素的研究历史第14页
        1.1.2 黄曲霉毒素的理化性质第14-15页
        1.1.3 黄曲霉毒素 Bl 的吸收与代谢第15-17页
    1.2 黄曲霉毒素的危害第17-20页
        1.2.1 黄曲霉毒素对细胞凋亡的影响第17页
        1.2.2 黄曲霉毒素在动物组织中的残留第17-18页
        1.2.3 黄曲霉毒素 B1 对畜禽生产性能的影响第18-19页
        1.2.4 黄曲霉毒素对人类健康的影响第19-20页
    1.3 黄曲霉毒素在食品中的分布第20页
    1.4 黄曲霉毒素的限量标准第20-21页
    1.5 黄曲霉毒素在我国造成损失状况第21-22页
    1.6 黄曲霉毒素的检测方法第22-26页
        1.6.1 色谱法第23-24页
            1.6.1.1 薄层层析法(TLC)第23页
            1.6.1.2 高效液相色谱法(HPLC)第23-24页
        1.6.2 免疫化学检测法第24-26页
            1.6.2.1 酶联免疫吸附法(ELISA)第25-26页
    1.7 黄曲霉毒素的脱毒方法第26-30页
        1.7.1 物理方法去除黄曲霉毒素第26-28页
            1.7.1.1 萃取法去除黄曲霉毒素第26页
            1.7.1.2 吸附法去除黄曲霉毒素第26-27页
            1.7.1.3 加热法去除黄曲霉毒素第27-28页
            1.7.1.4 辐射法去除黄曲霉毒素第28页
        1.7.2 化学方法去毒第28-29页
        1.7.3 生物方法去毒第29-30页
            1.7.3.1 细菌生物降解霉菌毒素的研究第29-30页
    1.8 本课题的研究内容和意义第30-31页
    1.9 前景展望第31-32页
2 材料与方法第32-46页
    2.1 主要材料试剂与方法第32-33页
        2.1.1 主要试剂第32页
        2.1.2 主要仪器第32-33页
    2.2 主要试剂及培养基制备第33-34页
    2.3 AFB1 的检测第34-35页
        2.3.1 AFB1 的提取第34页
            2.3.1.1 液体类样品提取方法第34页
            2.3.1.2 固体类样品提取方法第34页
        2.3.2 AFB1 的净化第34-35页
        2.3.3 AFB1 的检测第35页
    2.4 枯草芽孢杆菌降解黄曲霉毒素 B1 作用研究第35-36页
        2.4.1 枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素 B1 的降解第35页
        2.4.2 枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素 B1 的降解作用研究第35-36页
    2.5 细菌分离鉴定第36-42页
        2.5.1 细菌的分离筛选第36-37页
            2.5.1.1 制备土壤稀释液第36页
            2.5.1.2 涂布第36页
            2.5.1.3 培养第36页
            2.5.1.4 初筛第36-37页
        2.5.2 细菌的生化试验鉴定第37-38页
        2.5.3 细菌的 16S rRNA 鉴定第38-40页
            2.5.3.1 细菌总 DNA 的提取第38页
            2.5.3.2 16SrRNA 片段的扩增第38-39页
            2.5.3.3 16SrRNA 片段的回收第39-40页
        2.5.4 PCR 产物与载体连接第40页
        2.5.5 感受态的制备第40-41页
        2.5.6 转化感受态细胞第41页
        2.5.7 阳性质粒的提取第41-42页
        2.5.8 基因序列的测定第42页
        2.5.9 分离菌株的保藏第42页
    2.6 降解 AFB1 菌株的筛选及降解 AFB1 条件的优化第42-44页
        2.6.1 具有 AFB1 降解作用菌株的筛选第42-43页
            2.6.1.1 具有 AFB1 降解作用菌株的初筛第42-43页
            2.6.1.2 具有 AFB1 降解作用菌株的复筛第43页
        2.6.2 不同温度对分离菌降解 AFB1 的影响第43页
        2.6.3 不同 PH 对分离菌降解 AFB1 的影响第43页
        2.6.4 不同接种量对分离菌降解 AFB1 的影响第43页
        2.6.5 不同发酵时间下对分离菌降解 AFB1 的影响第43-44页
    2.7 分离菌降解 AFB1 机理的研究第44页
        2.7.1 分离菌各活性组分对黄曲霉毒素降解率的确定第44页
        2.7.2 蛋白酶 K 处理后解毒活性的确定第44页
        2.7.3 热处理后解读活性的确定第44页
    2.8 分离菌降解 AFB1 的应用和安全性试验第44-46页
        2.8.1 分离菌降解 AFB1 的应用性试验第44-45页
        2.8.2 分离菌对小鼠的安全性试验第45-46页
3 结果与分析第46-55页
    3.1 枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素 B1 的降解作用研究第46-47页
        3.1.1 枯草芽孢杆菌对 AFB1 的降解率第46页
        3.1.2 枯草芽孢杆菌发酵液各活性组分研究第46-47页
    3.2 细菌的分离与鉴定第47-48页
    3.3 具有降解 AFB1 作用菌株的确定与命名第48-49页
    3.4 枯草芽孢杆菌降解 AFB1 条件的优化第49-51页
        3.4.1 不同温度对分离菌降解 AFB1 的影响第49页
        3.4.2 不同起始 pH 对分离菌降解 AFB1 的影响第49-50页
        3.4.3 不同接种量对分离菌降解 AFB1 的影响第50页
        3.4.4 不同发酵时间时间下对分离菌降解 AFB1 的影响第50-51页
    3.5 枯草芽孢杆菌泰山株降解黄曲霉毒素活性组分的确定第51-52页
    3.6 枯草芽孢杆菌泰山株发酵液活性组分性质的研究第52-53页
    3.7 枯草芽孢杆菌泰山株降解 AFB1 的应用和安全性试验第53-55页
        3.7.1 枯草芽孢杆菌泰山株发酵液对发霉饲料的作用第53-54页
        3.7.2 枯草芽孢杆菌泰山株发酵液对小鼠的安全性试验第54-55页
4 讨论第55-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-69页
附录第69-73页
致谢第73-74页
攻读学位期间论文发表情况第74页

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