符号说明 | 第5-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
1 引言 | 第14-32页 |
1.1 黄曲霉毒素的基本概况 | 第14-17页 |
1.1.1 黄曲霉毒素的研究历史 | 第14页 |
1.1.2 黄曲霉毒素的理化性质 | 第14-15页 |
1.1.3 黄曲霉毒素 Bl 的吸收与代谢 | 第15-17页 |
1.2 黄曲霉毒素的危害 | 第17-20页 |
1.2.1 黄曲霉毒素对细胞凋亡的影响 | 第17页 |
1.2.2 黄曲霉毒素在动物组织中的残留 | 第17-18页 |
1.2.3 黄曲霉毒素 B1 对畜禽生产性能的影响 | 第18-19页 |
1.2.4 黄曲霉毒素对人类健康的影响 | 第19-20页 |
1.3 黄曲霉毒素在食品中的分布 | 第20页 |
1.4 黄曲霉毒素的限量标准 | 第20-21页 |
1.5 黄曲霉毒素在我国造成损失状况 | 第21-22页 |
1.6 黄曲霉毒素的检测方法 | 第22-26页 |
1.6.1 色谱法 | 第23-24页 |
1.6.1.1 薄层层析法(TLC) | 第23页 |
1.6.1.2 高效液相色谱法(HPLC) | 第23-24页 |
1.6.2 免疫化学检测法 | 第24-26页 |
1.6.2.1 酶联免疫吸附法(ELISA) | 第25-26页 |
1.7 黄曲霉毒素的脱毒方法 | 第26-30页 |
1.7.1 物理方法去除黄曲霉毒素 | 第26-28页 |
1.7.1.1 萃取法去除黄曲霉毒素 | 第26页 |
1.7.1.2 吸附法去除黄曲霉毒素 | 第26-27页 |
1.7.1.3 加热法去除黄曲霉毒素 | 第27-28页 |
1.7.1.4 辐射法去除黄曲霉毒素 | 第28页 |
1.7.2 化学方法去毒 | 第28-29页 |
1.7.3 生物方法去毒 | 第29-30页 |
1.7.3.1 细菌生物降解霉菌毒素的研究 | 第29-30页 |
1.8 本课题的研究内容和意义 | 第30-31页 |
1.9 前景展望 | 第31-32页 |
2 材料与方法 | 第32-46页 |
2.1 主要材料试剂与方法 | 第32-33页 |
2.1.1 主要试剂 | 第32页 |
2.1.2 主要仪器 | 第32-33页 |
2.2 主要试剂及培养基制备 | 第33-34页 |
2.3 AFB1 的检测 | 第34-35页 |
2.3.1 AFB1 的提取 | 第34页 |
2.3.1.1 液体类样品提取方法 | 第34页 |
2.3.1.2 固体类样品提取方法 | 第34页 |
2.3.2 AFB1 的净化 | 第34-35页 |
2.3.3 AFB1 的检测 | 第35页 |
2.4 枯草芽孢杆菌降解黄曲霉毒素 B1 作用研究 | 第35-36页 |
2.4.1 枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素 B1 的降解 | 第35页 |
2.4.2 枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素 B1 的降解作用研究 | 第35-36页 |
2.5 细菌分离鉴定 | 第36-42页 |
2.5.1 细菌的分离筛选 | 第36-37页 |
2.5.1.1 制备土壤稀释液 | 第36页 |
2.5.1.2 涂布 | 第36页 |
2.5.1.3 培养 | 第36页 |
2.5.1.4 初筛 | 第36-37页 |
2.5.2 细菌的生化试验鉴定 | 第37-38页 |
2.5.3 细菌的 16S rRNA 鉴定 | 第38-40页 |
2.5.3.1 细菌总 DNA 的提取 | 第38页 |
2.5.3.2 16SrRNA 片段的扩增 | 第38-39页 |
2.5.3.3 16SrRNA 片段的回收 | 第39-40页 |
2.5.4 PCR 产物与载体连接 | 第40页 |
2.5.5 感受态的制备 | 第40-41页 |
2.5.6 转化感受态细胞 | 第41页 |
2.5.7 阳性质粒的提取 | 第41-42页 |
2.5.8 基因序列的测定 | 第42页 |
2.5.9 分离菌株的保藏 | 第42页 |
2.6 降解 AFB1 菌株的筛选及降解 AFB1 条件的优化 | 第42-44页 |
2.6.1 具有 AFB1 降解作用菌株的筛选 | 第42-43页 |
2.6.1.1 具有 AFB1 降解作用菌株的初筛 | 第42-43页 |
2.6.1.2 具有 AFB1 降解作用菌株的复筛 | 第43页 |
2.6.2 不同温度对分离菌降解 AFB1 的影响 | 第43页 |
2.6.3 不同 PH 对分离菌降解 AFB1 的影响 | 第43页 |
2.6.4 不同接种量对分离菌降解 AFB1 的影响 | 第43页 |
2.6.5 不同发酵时间下对分离菌降解 AFB1 的影响 | 第43-44页 |
2.7 分离菌降解 AFB1 机理的研究 | 第44页 |
2.7.1 分离菌各活性组分对黄曲霉毒素降解率的确定 | 第44页 |
2.7.2 蛋白酶 K 处理后解毒活性的确定 | 第44页 |
2.7.3 热处理后解读活性的确定 | 第44页 |
2.8 分离菌降解 AFB1 的应用和安全性试验 | 第44-46页 |
2.8.1 分离菌降解 AFB1 的应用性试验 | 第44-45页 |
2.8.2 分离菌对小鼠的安全性试验 | 第45-46页 |
3 结果与分析 | 第46-55页 |
3.1 枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素 B1 的降解作用研究 | 第46-47页 |
3.1.1 枯草芽孢杆菌对 AFB1 的降解率 | 第46页 |
3.1.2 枯草芽孢杆菌发酵液各活性组分研究 | 第46-47页 |
3.2 细菌的分离与鉴定 | 第47-48页 |
3.3 具有降解 AFB1 作用菌株的确定与命名 | 第48-49页 |
3.4 枯草芽孢杆菌降解 AFB1 条件的优化 | 第49-51页 |
3.4.1 不同温度对分离菌降解 AFB1 的影响 | 第49页 |
3.4.2 不同起始 pH 对分离菌降解 AFB1 的影响 | 第49-50页 |
3.4.3 不同接种量对分离菌降解 AFB1 的影响 | 第50页 |
3.4.4 不同发酵时间时间下对分离菌降解 AFB1 的影响 | 第50-51页 |
3.5 枯草芽孢杆菌泰山株降解黄曲霉毒素活性组分的确定 | 第51-52页 |
3.6 枯草芽孢杆菌泰山株发酵液活性组分性质的研究 | 第52-53页 |
3.7 枯草芽孢杆菌泰山株降解 AFB1 的应用和安全性试验 | 第53-55页 |
3.7.1 枯草芽孢杆菌泰山株发酵液对发霉饲料的作用 | 第53-54页 |
3.7.2 枯草芽孢杆菌泰山株发酵液对小鼠的安全性试验 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
附录 | 第69-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读学位期间论文发表情况 | 第74页 |