中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩写 | 第13-14页 |
第1章 绪论 | 第14-26页 |
1.1 乳腺癌简介 | 第14页 |
1.2 姜黄素简介及其研究现状 | 第14-17页 |
1.2.1 姜黄素的分子结构 | 第14-15页 |
1.2.2 姜黄素的生物学特性 | 第15页 |
1.2.3 姜黄素的抗癌活性 | 第15页 |
1.2.4 姜黄素的潜在抗癌分子机制 | 第15-16页 |
1.2.5 姜黄素对癌细胞中酶的调控 | 第16页 |
1.2.6 姜黄素的使用剂量、体内代谢和生物利用度 | 第16-17页 |
1.2.7 姜黄素的潜在风险和副作用 | 第17页 |
1.3 MIR-21 及其所在信号通路的研究现状 | 第17-25页 |
1.3.1 miRNAs 和 miR-21 的概念 | 第17-20页 |
1.3.2 miR-21 在癌症和其他疾病中的异常表达 | 第20-21页 |
1.3.3 miR-21 的靶位点以及下游信号通路 | 第21-22页 |
1.3.4 miR-21 与肿瘤发生相关的目的基因和下游信号通路 | 第22-23页 |
1.3.5 miR-21 作为诊断和预后的标志物 | 第23-24页 |
1.3.6 miR-21 作为治疗中的靶基因 | 第24-25页 |
1.4 立题依据 | 第25-26页 |
第2章 材料与方法 | 第26-37页 |
2.1 主要试剂与器材 | 第26-27页 |
2.1.1 试剂 | 第26-27页 |
2.1.2 主要器材 | 第27页 |
2.2 细胞培养 | 第27-28页 |
2.3 细胞培养试剂配制 | 第28页 |
2.3.1 DMEM 培养液 | 第28页 |
2.3.2 D-Hank’s 配制 | 第28页 |
2.3.3 小牛血清的配制 | 第28页 |
2.3.4 胰酶配制 | 第28页 |
2.4 细胞冻存、复苏和传代 | 第28-29页 |
2.4.1 细胞冻存 | 第28-29页 |
2.4.2 细胞复苏 | 第29页 |
2.4.3 细胞传代 | 第29页 |
2.5 配制姜黄素试剂及处理细胞 | 第29页 |
2.6 MTT 法检测细胞存活率 | 第29-30页 |
2.7 CASPASE-3 试剂盒检测细胞凋亡 | 第30-31页 |
2.8 细胞周期测定 | 第31页 |
2.9 REALTIME RT-PCR | 第31-33页 |
2.9.1 引物设计 | 第31页 |
2.9.2 细胞总 RNA 提取 | 第31-32页 |
2.9.3 poly(A)加尾反应和反转录反应 | 第32页 |
2.9.4 Realtime RT-PCR | 第32-33页 |
2.10 蛋白质免疫印记法(WESTERN BLOT) | 第33-37页 |
2.10.1 配制试剂 | 第33-34页 |
2.10.2 姜黄素处理细胞以及实验分组 | 第34页 |
2.10.3 BCA 法检测细胞蛋白浓度 | 第34-35页 |
2.10.4 制备待测样品 | 第35页 |
2.10.5 配置 SDS-PAGE 凝胶 | 第35-36页 |
2.10.6 SDS-PAGE 电泳 | 第36页 |
2.10.7 转膜 | 第36页 |
2.10.8 封闭 | 第36页 |
2.10.9 暗室曝光 | 第36页 |
2.10.10 图像分析 | 第36-37页 |
第3章 实验结果 | 第37-43页 |
3.1 MTT 检测细胞存活率 | 第37页 |
3.2 姜黄素对 MCF-7 细胞 CASPASE-3 酶活性检测的影响 | 第37-38页 |
3.3 姜黄素对 MCF-7 细胞周期影响结果 | 第38-41页 |
3.4 姜黄素对乳腺癌 MCF-7 细胞 MIR-21 的 MRNA 表达量的影响 | 第41页 |
3.5 运用 WESTERN BLOT 检测姜黄素对 MCF-7 细胞中 MIR-21 的靶基因 PDCD4 蛋白表达量的影响 | 第41-43页 |
第4章 讨论 | 第43-49页 |
4.1 姜黄素抗乳腺癌 MCF-7 的作用研究 | 第43-45页 |
4.1.1 姜黄素对乳腺癌 MCF-7 细胞的存活率影响 | 第43-44页 |
4.1.2 姜黄素对 MCF-7 细胞 caspase-3 蛋白表达活性的影响 | 第44页 |
4.1.3 姜黄素对 MCF-7 细胞周期影响结果 | 第44-45页 |
4.2 姜黄素抗乳腺癌 MCF-7 的作用机制研究 | 第45-49页 |
4.2.1 姜黄素对乳腺癌 MCF-7 细胞中 miR-21 的表达量影响 | 第45页 |
4.2.2 运用 WESTERN BLOT 检测姜黄素对 MCF-7 细胞中 MIR-21 的靶基因 PDCD4 蛋白表达量的影响 | 第45-47页 |
4.2.3 相关信号通路研究 | 第47-49页 |
第5章 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-60页 |
作者简介 | 第60-61页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |