| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 转基因植物的安全性问题 | 第10-11页 |
| 1.1.1 转基因植物的生物与环境安全性 | 第10-11页 |
| 1.1.2 转基因植物的食品安全性 | 第11页 |
| 1.2 植物安全转基因策略 | 第11-18页 |
| 1.2.1 去除选择标记基因技术 | 第11-17页 |
| 1.2.2 安全选择标记基因 | 第17页 |
| 1.2.3 无选择标记基因的转化系统 | 第17-18页 |
| 1.3 同源转基因技术研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 同源转基因的定义与概述 | 第18-19页 |
| 1.3.2 同源转基因技术的应用 | 第19-20页 |
| 1.3.3 展望 | 第20页 |
| 1.4 FLC基因研究进展 | 第20-22页 |
| 1.4.1 FLC基因对植物开花的调控研究 | 第20-21页 |
| 1.4.2 FLC在转基因植物中的应用 | 第21-22页 |
| 第二章 引言 | 第22-26页 |
| 2.1 研究的目的与意义 | 第22页 |
| 2.2 研究内容 | 第22-24页 |
| 2.2.1 表达载体构建 | 第22-23页 |
| 2.2.2 农杆菌介导法获得转基因芥菜 | 第23页 |
| 2.2.3 Rbcs2启动子、BnPro启动子和RbcsT终止子的表达活性分析 | 第23页 |
| 2.2.4 筛选标记基因的删除分析 | 第23-24页 |
| 2.2.5 同源转基因FLC芥菜的鉴定 | 第24页 |
| 2.2.6 同源转基因FLC芥菜开花时间分析 | 第24页 |
| 2.3 技术路线 | 第24-26页 |
| 第三章 材料与方法 | 第26-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 3.1.2 菌株与质粒 | 第26页 |
| 3.1.3 主要生化试剂 | 第26页 |
| 3.1.4 培养基 | 第26-27页 |
| 3.1.5 主要仪器设备 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-36页 |
| 3.2.1 芥菜同源转基因元件克隆 | 第27页 |
| 3.2.2 载体的连接、转化 | 第27-29页 |
| 3.2.3 质粒转化农杆菌 | 第29-30页 |
| 3.2.4 农杆菌介导法获得转基因芥菜 | 第30页 |
| 3.2.5 转基因植株的分子生物学检测 | 第30-32页 |
| 3.2.6 GUS基因表达活性分析 | 第32-34页 |
| 3.2.7 芥菜筛选标记基因的删除分析 | 第34页 |
| 3.2.8 同源转基因FLC芥菜的鉴定 | 第34页 |
| 3.2.9 同源转基因FLC芥菜开花时间分析 | 第34-36页 |
| 第四章 结果与分析 | 第36-52页 |
| 4.1 植物表达载体的构建 | 第36-42页 |
| 4.1.1 芥菜同源转基因元件的克隆与序列分析 | 第36页 |
| 4.1.2 pCARbcs2GUS、pCABnGUS和pCA35SGUSRT表达载体构建 | 第36-38页 |
| 4.1.3 同源转基因植物表达载体的构建 | 第38-42页 |
| 4.2 转基因植株的获得 | 第42-44页 |
| 4.2.1 除草剂抗性芥菜植株的获得 | 第42-43页 |
| 4.2.2 除草剂抗性芥菜的PCR鉴定 | 第43-44页 |
| 4.3 Rbcs2启动子、BnPro启动子和RbcsT终止子的表达活性分析 | 第44-46页 |
| 4.3.1 GUS组织特异性分析 | 第44-45页 |
| 4.3.2 GUS表达活性分析 | 第45-46页 |
| 4.4 选择标记基因的删除分析 | 第46-49页 |
| 4.4.1 除草剂抗性筛选 | 第46-47页 |
| 4.4.2 选择标记基因的删除效率分析 | 第47-49页 |
| 4.5 同源转基因FLC芥菜的获得 | 第49-52页 |
| 4.5.1 T1代同源转基因FLC芥菜的PCR验证 | 第49-50页 |
| 4.5.2 T1代同源转基因FLC芥菜的除草剂抗性验证 | 第50-52页 |
| 第五章 讨论 | 第52-54页 |
| 第六章 结论 | 第54-56页 |
| 6.1 构建了基于同源转基因的植物表达载体并获得相应的转基因芥菜植株 | 第54页 |
| 6.2 检测了Rbcs2启动子、BnPro启动子和RbcsT终止子的表达活性 | 第54页 |
| 6.3 Napin种子和HTR花粉组织特异启动子控制的Crdhx重组系统能实现标记基因的高效删除 | 第54页 |
| 6.4 获得同源转基因FLC芥菜 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 附录 | 第64-68页 |
| 附录1 缩略词表 | 第64-65页 |
| 附录2 基因序列 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 在学期间所发表的文章 | 第70页 |
