摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
中英文索引 | 第12-17页 |
引言 | 第17-19页 |
第一章 背景 | 第19-25页 |
1. HGFR和HGF的结构和功能 | 第20页 |
2. 分子信号 | 第20-21页 |
3. C-MET表达失调 | 第21-22页 |
4. MET突变 | 第22-23页 |
5. 直接MET抑制剂干扰信号途径 | 第23-25页 |
第二章 研究目的 | 第25-26页 |
第三章 实验材料 | 第26-28页 |
1 实验材料 | 第26-28页 |
第四章 激酶酶谱筛选 | 第28-44页 |
1. 方案概要 | 第28页 |
2. 研究目的 | 第28页 |
3. 材料 | 第28-29页 |
3.1 实验仪器 | 第28-29页 |
3.2 供试品信息 | 第29页 |
4. 实验方法 | 第29-31页 |
4.1 筛选方法 | 第29-30页 |
4.2 筛选方案 | 第30页 |
4.3 溶液及化合物的配制 | 第30页 |
4.4 plate map | 第30-31页 |
5. 实验结果与分析 | 第31-32页 |
5.1 化合物IC50值 | 第31-32页 |
6. 数据质量分析 | 第32-33页 |
6.1 QC分析 | 第32-33页 |
6.2 SIM-89对激酶活性抑制情况 | 第33页 |
7. SIM-89对激酶c-Met、AMPK、TRKA的抑制作用测试 | 第33-36页 |
7.1 测试结果 | 第33-36页 |
7.1.1 MET(c-Met) IC50测试结果 | 第33-34页 |
7.1.2 AMPK IC50 测试结果 | 第34-35页 |
7.1.3 TRKA IC50 测试结果 | 第35-36页 |
8. 化合物对激酶SLK、PAK1激活作用的测试 | 第36-37页 |
8.1 测试结果 | 第36-37页 |
9. 化合物对激酶AMPK、c-Met、TRKA MOA Study | 第37-38页 |
9.1 AMPK MOA Study | 第37页 |
9.2 c-Met MOA Study | 第37页 |
9.3 TRKA MOA Study | 第37-38页 |
10. 读数设置 | 第38页 |
11. 讨论 | 第38-44页 |
第五章 Real-time PCR | 第44-59页 |
1. 实验目的 | 第44页 |
2. 实验方法 | 第44-47页 |
3. 实验结果 | 第47-54页 |
3.1 总数据 | 第47页 |
3.2 Melting curve考察引物质量 | 第47-49页 |
3.3 表达量分析 | 第49-54页 |
4. 讨论 | 第54-59页 |
第六章 蛋白质免疫印迹分析 | 第59-67页 |
1. 实验目的 | 第59-60页 |
1.1 实验原理 | 第59页 |
1.2 样品制备 | 第59页 |
1.3 目标蛋白质 | 第59-60页 |
1.4 样本总数 | 第60页 |
2. 实验方法 | 第60-64页 |
2.1 工作流程图 | 第60页 |
2.2 仪器与试剂 | 第60-61页 |
2.3 蛋白质抽提及浓度测定 | 第61-62页 |
2.3.1 蛋白质抽提 | 第61页 |
2.3.2 蛋白质浓度测定 | 第61-62页 |
2.4 WB实验 | 第62-64页 |
3. 实验结果 | 第64-65页 |
蛋白质表达量的比较图 | 第64-65页 |
4. 讨论 | 第65-67页 |
第七章 ELISA法测定SIM-89作用下肿瘤细胞上清HGF水平 | 第67-71页 |
1. 原理 | 第67页 |
2. 准备工作 | 第67-68页 |
3. 操作步骤 | 第68-69页 |
4. 结果 | 第69-70页 |
5. 讨论 | 第70-71页 |
第八章 CCK8法检测细胞增殖活力 | 第71-81页 |
1. 实验材料 | 第71-72页 |
2. 实验方法 | 第72-73页 |
3. 实验结果 | 第73-81页 |
第九章 Transwell迁移试验 | 第81-90页 |
1. 材料与方法 | 第81-82页 |
2. SIM-89工作溶液准备(5 倍于最终孵育浓度) | 第82页 |
3. 迁移实验 | 第82-83页 |
4. 从transwell膜的底面上分离下的细胞分析 | 第83-84页 |
5. 分析迁移到下层小孔中的细胞 | 第84页 |
6. 台盼蓝法检测细胞生存 | 第84-85页 |
7. 迁移实验中A549-B16F10-H441-H460-H1993-H1299细胞IC50结果 | 第85-87页 |
8. A549-B16F10-H441-H460-H1993-H1299细胞IC50值汇总 | 第87-88页 |
9. Transwell迁移试验图片 | 第88-90页 |
第十章 裸鼠荷瘤实验 | 第90-100页 |
1. 实验材料 | 第90页 |
2. 实验方法 | 第90-93页 |
3.统计方法 | 第93-94页 |
4.实验结果 | 第94-100页 |
第十一章 讨论 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第110-111页 |
综述 C-MET信号通路对肺癌发生发展的作用及其抑制剂的临床应用前景 | 第111-130页 |
参考文献 | 第125-130页 |