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拟南芥卵细胞—中央细胞的胞间通讯参与雌配子协同发育

本论文的创新点第6-11页
摘要第11-16页
Abstract第16-21页
縮写符号第22-23页
第一章 前言第23-46页
    1.1 雌配子体的分化及形成第23页
    1.2 雌配子体发育的分子机制第23-28页
        1.2.1 体细胞向生殖细胞命运的转变第24页
        1.2.2 功能大孢子的特化第24-25页
        1.2.3 雌配子有丝分裂进程第25-26页
        1.2.4 胚囊细胞化第26-27页
        1.2.5 胚囊的极性化及雌配子体细胞特化第27-28页
    1.3 中央细胞和卵细胞成熟及其机制研究第28-30页
    1.4 中央细胞和卵细胞协同发育及细胞间的信号互作第30-43页
        1.4.1 细胞间通讯的途径第31-33页
        1.4.2 受精过程中的细胞相互作用第33-38页
        1.4.3 胚、胚乳、珠被细胞之间的相互作用第38-42页
        1.4.4 雌配子体细胞之间的相互调控第42-43页
    1.5 雌配子后熟作用的生物学功能第43-44页
    1.6 本论文的主要目的与意义第44-46页
第二章 材料和方法第46-65页
    2.1 植物材料第46页
    2.2 实验仪器第46-47页
    2.3 实验试剂第47-48页
    2.4 实验方法第48-65页
        2.4.1 Hi-TAIL PCR扩增T-DNA侧翼序列第48-52页
        2.4.2 载体构建第52-57页
        2.4.3 拟南芥转基因第57-59页
        2.4.4 花粉管萌发第59-60页
        2.4.5 GUS染色第60-61页
        2.4.6 胚珠透明第61页
        2.4.7 卵细胞大小测量第61-62页
        2.4.8 胚珠荧光观察第62页
        2.4.9 PI染色第62-63页
        2.4.10 DNA含量测定第63-64页
        2.4.11 透射电子显微镜样品制备第64页
        2.4.12 线粒体染色第64-65页
第三章 gcd1突变体筛选第65-78页
    3.1 gcd1/GCD1突变体的筛选第67-68页
    3.2 q21/Q21突变体筛选第68-76页
        3.2.1 雌配子有丝分裂进程停滞第70-71页
        3.2.2 花粉-柱头相互作用第71-73页
        3.2.3 Q21编码一类新型的WD40结构蛋白第73-74页
        3.2.4 ATQ21基因的表达模式及亚细胞定位第74-76页
    3.3 d1/D1突变体的筛选第76-78页
第四章 GCD1编码一类新型保守家族蛋白第78-83页
    4.1 gcd1/GCD1突变体基因定位第78-79页
    4.2 gcd1/GCD1突变体互补实验第79-81页
    4.3 GCD1蛋白的生物信息学分析第81-83页
第五章 GCD1表达模式分析第83-90页
    5.1 pGCD1::GUS表达模式分析第83-84页
    5.2 pGCD1::H2B_EGFP表达模式分析第84-86页
    5.3 pGCD1::GCD1_EGFP表达模式分析第86-88页
    5.4 GCD1在雄配子体中的表达第88-90页
第六章 GCD1参与雌、雄配子发育调控第90-98页
    6.1 gcd1突变影响了花粉管在花柱中的生长第91-92页
    6.2 gcd1突变影响了中央细胞极核的融合第92-93页
    6.3 gcd1突变影响卵细胞的成熟第93-96页
    6.4 gcd1不成熟的雌配子维持原有的细胞命运第96-98页
第七章 GCD1受精后的功能研究第98-103页
    7.1 gcd1雌配子不影响花粉管导向第98-100页
    7.2 gcd1雌配子能够受精,但是胚胎不能启动分裂第100页
    7.3 gcd1/GCD1合子和胚乳不影响父本基因的表达第100-101页
    7.4 gcd1/GCD1合子和胚乳的特异性不受改变第101-103页
第八章 受精可诱导极核的融合第103-108页
    8.1 gcd1/GCD1胚乳核大小均一第103页
    8.2 gcd1双极核受精前后的比较第103-104页
    8.3 gcd1/GCD1胚乳核倍性分析第104-106页
    8.4 gcd1中央细胞受精的动态观察第106-108页
第九章 雌配子晚期成熟是胚胎发生启动以及早期胚乳发育所必须的第108-112页
    9.1 GCD1父母本基因转录水平表观遗传分析第108-109页
    9.2 GCD1父母本基因蛋白水平表观遗传分析第109-110页
    9.3 gcd1/GCD1突变体受精前后的补偿效应第110-112页
第十章 中央细胞和卵细胞之间的胞间通讯第112-122页
    10.1 卵细胞特异启动子互补实验第113-116页
    10.2 中央细胞特异启动子的互补实验第116-119页
    10.3 DD45和FWA启动子在gcd1雌配子中的特异性鉴定第119-122页
第十一章 中央细胞和卵细胞的胞间通讯是线粒体依赖型的信号调控途径第122-129页
    11.1 GCD1蛋白亚细胞定位第122-123页
    11.2 gcdl突变体雌配子超微结构分析第123-124页
    11.3 人工定点破坏中央细胞线粒体功能第124-127页
    11.4 人工定点破坏卵细胞线粒体功能第127-129页
第十二章 讨论第129-134页
    12.1 GCD1是一类新型的保守蛋白,并且特异参与雌配子的成熟调控第129-130页
    12.2 雌配子的后期成熟是胚胎发生启动和早期胚乳发育的必要前提第130-131页
    12.3 中央细胞-卵细胞之间的胞间通讯调控雌配子的协同发育第131-133页
    12.4 胚囊细胞之间的信号调控第133-134页
参考文献第134-146页
致谢第146页

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