| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第1章 引言 | 第12-15页 |
| 第2章 CD147 慢病毒载体的构建 | 第15-24页 |
| 2.1 材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第15页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第15-16页 |
| 2.2 方法 | 第16-20页 |
| 2.2.1 双链 DNA Oligo 制备 | 第16页 |
| 2.2.2 构建表达 shRNA 慢病毒载体 | 第16-18页 |
| 2.2.3 阳性克隆 PCR 及测序鉴定 | 第18页 |
| 2.2.4 慢病毒包装 | 第18-19页 |
| 2.2.5 慢病毒滴度测定 | 第19-20页 |
| 2.3 结果 | 第20-22页 |
| 2.3.1 RNA 干扰慢病毒质粒载体的构建和鉴定结果 | 第20-21页 |
| 2.3.2 阳性克隆的 PCR 鉴定 | 第21页 |
| 2.3.3 DNA 测序鉴定 | 第21-22页 |
| 2.3.4 慢病毒载体的包装及滴度测定 | 第22页 |
| 2.4 讨论 | 第22-24页 |
| 第3章 干扰 CD147 表达对 SHI-1 细胞体内外增殖、浸润能力的影响 | 第24-41页 |
| 3.1 材料 | 第24-25页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第25页 |
| 3.2 方法 | 第25-30页 |
| 3.2.1 细胞培养及感染 | 第25-26页 |
| 3.2.2 流式细胞仪检测 SHI-1 细胞 GFP 荧光表达率 | 第26页 |
| 3.2.3 RT-PCR | 第26-27页 |
| 3.2.4 Western blot | 第27-28页 |
| 3.2.5 MTT 检测细胞增殖能力 | 第28-29页 |
| 3.2.6 体外共培养跨 Matrigel 侵袭试验 | 第29页 |
| 3.2.7 裸鼠体内浸润、转移试验 | 第29-30页 |
| 3.2.8 统计学处理 | 第30页 |
| 3.3 结果 | 第30-36页 |
| 3.3.1 SHI-1 细胞 GFP 荧光表达率 | 第30-31页 |
| 3.3.2 CD147、MMP-2、MMP-9 在 SHI-1 细胞中 mRNA 的表达水平 | 第31-32页 |
| 3.3.3 CD147 蛋白的检测; | 第32页 |
| 3.3.4 细胞增殖能力的测定 | 第32-33页 |
| 3.3.5 体外跨 Matrigel 侵袭试验 | 第33-34页 |
| 3.3.6 裸鼠体内浸润、转移试验 | 第34-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-41页 |
| 第4章 结论与展望 | 第41-42页 |
| 4.1 结论 | 第41页 |
| 4.2 实验存在的不足与展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第48-49页 |
| 综述 | 第49-56页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
