| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-39页 |
| 1.1 狂犬病概述 | 第15页 |
| 1.2 狂犬病流行概况 | 第15-17页 |
| 1.2.1 世界狂犬病流行概况 | 第15-16页 |
| 1.2.2 中国狂犬病流行概况 | 第16-17页 |
| 1.3 狂犬病毒的研究进展 | 第17-31页 |
| 1.3.1 狂犬病毒的分类 | 第17-18页 |
| 1.3.2 狂犬病毒的形态和构成 | 第18-20页 |
| 1.3.3 狂犬病毒的基因组结构及各编码蛋白的功能 | 第20-31页 |
| 1.4 狂犬病的防治措施 | 第31-32页 |
| 1.5 狂犬病疫苗研究现状 | 第32-39页 |
| 1.5.1 人用狂犬病疫苗 | 第32-33页 |
| 1.5.2 兽用狂犬病疫苗 | 第33-35页 |
| 1.5.3 发展中的狂犬病疫苗 | 第35-39页 |
| 第二章 研究的目的及意义 | 第39-40页 |
| 2.1 狂犬病毒街毒株DRV-AH08基因组序列测定分析的研究目的及意义 | 第39页 |
| 2.2 G蛋白免疫原性研究的目的及意义 | 第39-40页 |
| 第三章 材料与方法 | 第40-61页 |
| 3.1 材料 | 第40-44页 |
| 3.1.1 病毒、细胞和菌株 | 第40页 |
| 3.1.2 载体与质粒 | 第40页 |
| 3.1.3 引物、工具酶及主要试剂 | 第40-41页 |
| 3.1.4 免疫反应试验所用抗原及血清 | 第41页 |
| 3.1.5 培养基与抗生素及其配制 | 第41-42页 |
| 3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第42-44页 |
| 3.1.7 其它缓冲液及试剂 | 第44页 |
| 3.1.8 实验动物 | 第44页 |
| 3.2 试验方法 | 第44-61页 |
| 3.2.1 病毒增殖 | 第45页 |
| 3.2.2 鼠脑组织总RNA提取 | 第45-46页 |
| 3.2.3 狂犬病毒核酸RT-PCR检测 | 第46-48页 |
| 3.2.4 PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第48-49页 |
| 3.2.5 酶切产物回收与纯化 | 第49页 |
| 3.2.6 外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第49-50页 |
| 3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第50页 |
| 3.2.8 连接产物的转化 | 第50-51页 |
| 3.2.9 质粒的制备与鉴定 | 第51-52页 |
| 3.2.10 序列分析方法 | 第52页 |
| 3.2.11 重组Bacmid DNA的提取 | 第52-53页 |
| 3.2.12 重组杆状病毒获得 | 第53-54页 |
| 3.2.13 重组杆状病毒转导SF9昆虫细胞/BHK细胞 | 第54页 |
| 3.2.14 蛋白浓度测定 | 第54-55页 |
| 3.2.15 SDS-PAGE电泳和Western Blot检测目的蛋白的体外表达 | 第55-56页 |
| 3.2.16 小鼠的免疫与攻毒保护性试验 | 第56页 |
| 3.2.17 小鼠半数致死量(mLD 50)测定 | 第56-57页 |
| 3.2.18 狂犬病毒CVS-11 TCID50测定 | 第57-58页 |
| 3.2.19 FAVN检测血清中中和抗体水平 | 第58-60页 |
| 3.2.20 试验丢弃物的无害化处理 | 第60页 |
| 3.2.21 统计学方法 | 第60-61页 |
| 第四章 实验结果 | 第61-114页 |
| 4.1 狂犬病毒街毒株DRV-AH08全基因组序列测定 | 第61-67页 |
| 4.1.1 狂犬病毒街毒株DRV-AH08核酸鉴定分析 | 第61-64页 |
| 4.1.2 狂犬病毒街毒株全基因组序列测定 | 第64-67页 |
| 4.2 狂犬病毒街毒株DRV-AH08全基因组序列分析 | 第67-88页 |
| 4.2.1 分析所用序列 | 第67-68页 |
| 4.2.2 DRV-AH08全基因组组成及分析 | 第68-70页 |
| 4.2.3 狂犬病毒野毒株DRV-AH08系统进化分析 | 第70-82页 |
| 4.2.4 clade Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ狂犬病毒进化分析 | 第82-84页 |
| 4.2.5 中国流行亚类China Ⅰ和墨西哥流行株DRV-Mexico比较分析 | 第84-88页 |
| 4.3 讨论 | 第88-93页 |
| 4.3.1 关于狂犬病毒属分类 | 第88页 |
| 4.3.2 关于DRV-AH08全基因组序列测定 | 第88-89页 |
| 4.3.3 关于DRV-AH08全基因组结构分析 | 第89页 |
| 4.3.4 关于DRV-AH08全基因组系统进化分析 | 第89-93页 |
| 4.4 小结 | 第93-94页 |
| 4.5 不同毒力毒株G蛋白免疫原性研究 | 第94-114页 |
| 4.5.1 转移质粒pFastBac-X的构建 | 第94-98页 |
| 4.5.2 穿梭质粒Bacmid-X的构建 | 第98-99页 |
| 4.5.3 重组杆状病毒BAC-X的制备 | 第99-100页 |
| 4.5.4 重组杆状病毒转导Sf9昆虫细胞 | 第100-102页 |
| 4.5.5 重组杆状病毒转导BHK细胞 | 第102页 |
| 4.5.6 各重组杆状病毒囊膜上G蛋白携带量研究 | 第102-103页 |
| 4.5.7 等量重组杆状病毒免疫小鼠实验 | 第103-108页 |
| 4.5.8 等量G蛋白免疫小鼠实验 | 第108-110页 |
| 4.5.9 重组杆状病毒免疫小鼠实验结果分析 | 第110-111页 |
| 4.5.10 讨论 | 第111-113页 |
| 4.5.11 小结 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-129页 |
| 致谢 | 第129-131页 |
| 附录 | 第131-150页 |
