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温度胁迫下番茄叶绿体谷胱甘肽还原酶基因的克隆、表达和功能分析

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
1 前言第14-31页
   ·植物体内活性氧与其清除系统第14-22页
   ·低温胁迫对植物的影响第22-27页
   ·高温胁迫对植物的影响第27-31页
2 材料与方法第31-57页
   ·实验材料第31-32页
     ·植物材料第31页
     ·材料处理第31页
     ·菌株与质粒第31页
     ·酶及生化试剂第31页
     ·PCR 引物第31-32页
   ·实验方法第32-57页
     ·总RNA的提取第32-33页
     ·cDNA 第一条链的合成第33-34页
     ·cDNA纯化第34页
     ·对cDNA进行末端加尾第34页
     ·番茄叶绿体谷胱甘肽还原酶基因全长的克隆第34-37页
     ·Northern杂交分析第37-40页
     ·真核表达载体的构建第40-44页
     ·转基因番茄植株的PCR检测第44-45页
     ·叶绿体谷胱甘肽还原酶的原核表达及Western杂交第45-50页
     ·谷胱甘肽还原酶的叶绿体定位第50-51页
     ·转基因番茄生理指标的测定第51-54页
     ·Southern 杂交分析第54-57页
3 结果与分析第57-78页
   ·LeGR基因的分离及其特征第57-66页
     ·LeGR基因全长的克隆第57-58页
     ·LeGR基因的序列分析第58-61页
     ·LeGR-GFP 融合蛋白的亚细胞定位第61-62页
     ·LeGR基因在番茄中的表达分析第62-63页
     ·LeGR基因在番茄基因组中的存在形式第63-64页
     ·LeGR基因在大肠杆菌中的表达第64-66页
   ·LeGR基因在番茄中的遗传转化第66-68页
     ·正、反义表达载体的构建第66-67页
     ·转LeGR基因植株的鉴定第67-68页
   ·转反义 LeGR 基因对温度胁迫下抗氧化酶活性的影响第68-70页
     ·转反义LeGR基因对低温下GR、APX和SOD酶活性的影响第68-70页
     ·转反义LeGR基因对高温下GR、APX和SOD酶活性的影响第70页
   ·转反义LeGR基因增加了番茄对低温胁迫的敏感性第70-75页
     ·转反义LeGR基因对低温下AsA-Glu循环组分的影响第70-72页
     ·转反义LeGR基因减少了温度胁迫下植株的生长量第72页
     ·LeGR基因表达的抑制增加了低温番茄的光抑制第72-75页
   ·LeGR基因表达的抑制增加了番茄的高温敏感性第75-78页
     ·LeGR基因表达的抑制对高温胁迫下光合速率的影响第75页
     ·LeGR基因表达的抑制增加高温胁迫下PSII的光抑制第75-76页
     ·转反义LeGR基因对高温下H202、MDA含量的影响第76-78页
4 讨论第78-83页
   ·LeGR基因编码一种叶绿体型谷胱甘肽还原酶第78页
   ·LeGR基因表达的抑制增加了番茄对温度胁迫的敏感性第78-80页
   ·Glu代谢对环境胁迫具有复杂的应答机制第80-81页
   ·Glu代谢在植物对环境胁迫的应答中的地位第81-83页
5 结论第83-85页
参考文献第85-96页
致谢第96-97页
攻读学位期间已发表的论文第97页

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