| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 R-3-羟基丁酸的性质和用途 | 第13-15页 |
| 1.1.1 R-3-羟基丁酸的结构 | 第13页 |
| 1.1.2 R-3HB的性质 | 第13-14页 |
| 1.1.3 R-3HB用途 | 第14-15页 |
| 1.2 R-3HB的合成方法 | 第15-22页 |
| 1.2.1 化学法合成3HB | 第15页 |
| 1.2.2 降解聚合物法合成R-3HB | 第15-21页 |
| 1.2.3 直接生物合成法合成R-3HB | 第21-22页 |
| 1.3 本论文的研究工作及意义 | 第22-25页 |
| 第二章 R-3HB代谢途径相关基因的克隆与表达 | 第25-53页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-32页 |
| 2.2.1 质粒和菌株 | 第25-27页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第27-29页 |
| 2.2.3 药品与试剂 | 第29-31页 |
| 2.2.4 培养基 | 第31页 |
| 2.2.5 合成基因 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-44页 |
| 2.3.1 phaAB基因簇、ybgC基因,tesB基因的获得 | 第32-34页 |
| 2.3.2 相关质粒的构建 | 第34-39页 |
| 2.3.3 重组质粒的表达 | 第39-41页 |
| 2.3.4 重组酶活的检测 | 第41-44页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第44-51页 |
| 2.4.1 目的基因的分子克隆 | 第44-46页 |
| 2.4.2 阳性转化子的菌落PCR验证 | 第46-47页 |
| 2.4.3 重组质粒的酶切验证 | 第47-49页 |
| 2.4.4 重组质粒的表达 | 第49-51页 |
| 2.5 本章小结 | 第51-53页 |
| 第三章 大肠杆菌中构建R-3HB代谢途径 | 第53-85页 |
| 3.1 引言 | 第53-54页 |
| 3.2 实验材料 | 第54-56页 |
| 3.2.1 质粒和菌株 | 第54-56页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第56页 |
| 3.2.3 药品与试剂 | 第56页 |
| 3.3 实验方法 | 第56-69页 |
| 3.3.1 phaA、phaB的共表达 | 第56-61页 |
| 3.3.2 phaA,phaB与硫酯酶基因的共表达策略 | 第61-66页 |
| 3.3.5 发酵液的参数检测方法 | 第66-68页 |
| 3.3.6 发酵曲线的测定 | 第68-69页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第69-83页 |
| 3.4.1 phaA、phaB基因的共表达 | 第69-71页 |
| 3.4.2 phaAB基因与ybgC基因的单质粒共表达体系的构建 | 第71-72页 |
| 3.4.3 phaAB基因和ybgC基因双质粒表达体系的构建 | 第72-76页 |
| 3.4.4 硫酯酶ybgC和硫酯酶tesB对代谢效果的影响 | 第76-78页 |
| 3.4.5 phaAB基因和tesB基因构建体系的优化 | 第78-82页 |
| 3.4.6 发酵曲线的测定 | 第82-83页 |
| 3.5 本章小结 | 第83-85页 |
| 第四章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 4.1 结论 | 第85页 |
| 4.2 展望 | 第85-87页 |
| 附录1：英文简写表 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-95页 |
