| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 综述 | 第9-18页 |
| 1.1 逆境胁迫对植物的影响 | 第9-13页 |
| 1.1.1 干旱胁迫对植物的影响 | 第9-10页 |
| 1.1.2 低温胁迫对植物的影响 | 第10-11页 |
| 1.1.3 高温胁迫对植物的影响 | 第11页 |
| 1.1.4 高盐胁迫对植物的影响 | 第11-13页 |
| 1.2 逆境条件下植物细胞的信号传导 | 第13-14页 |
| 1.2.1 不依赖 ABA 的信号转导途径 | 第13-14页 |
| 1.2.2 依赖 ABA 的信号转导途径 | 第14页 |
| 1.3 植物 AP2/EREBP 转录因子家族 | 第14-16页 |
| 1.3.1 AP2/EREBP 家族 | 第14-15页 |
| 1.3.2 DREB 类转录因子的结构特点 | 第15页 |
| 1.3.3 DREB 的抗性研究及应用 | 第15-16页 |
| 1.4 本研究的意义 | 第16-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 质粒载体和菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 植物材料的处理 | 第19页 |
| 2.2.2 总 RNA 的提取和 cDNA 第一链的获得 | 第19-20页 |
| 2.2.3 基因 cDNA 部分片段的克隆 | 第20-22页 |
| 2.2.4 基因 3’端的克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.5 基因完整 ORF 的获得 | 第23-24页 |
| 2.2.6 基因的生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.2.7 基因的半定量 RT-PCR 分析 | 第24-25页 |
| 2.2.8 基因的原核表达分析 | 第25-27页 |
| 2.2.9 基因的真核表达分析 | 第27-30页 |
| 3.结果与分析 | 第30-44页 |
| 3.1 小麦总 RNA 的提取和 CDNA 第一链的检测 | 第30-31页 |
| 3.1.1 RNA 检测 | 第30页 |
| 3.1.2 cDNA 第一链的检测 | 第30-31页 |
| 3.2 小麦 TaDREB2 基因的克隆 | 第31-32页 |
| 3.2.1 TaDREB2 基因 cDNA 部分片段的克隆 | 第31页 |
| 3.2.2 TaDREB2 基因 3’端的克隆 | 第31-32页 |
| 3.2.3 TaDREB2 基因完整 ORF 的获得 | 第32页 |
| 3.3 序列分析 | 第32-39页 |
| 3.3.1 不同胁迫下获得序列的多重比较 | 第32-35页 |
| 3.3.2 TaDREB2 基因序列的基本信息 | 第35页 |
| 3.3.3 TaDREB2 基因编码蛋白的亲疏水性分析 | 第35-36页 |
| 3.3.4 TaDREB2 基因编码蛋白的跨膜域预测 | 第36页 |
| 3.3.5 TaDREB2 基因编码蛋白的信号肽分析 | 第36-37页 |
| 3.3.6 TaDREB2 基因编码蛋白的亚细胞定位预测 | 第37-38页 |
| 3.3.7 TaDREB2 基因编码蛋白的功能预测 | 第38页 |
| 3.3.8 TaDREB2 基因与小麦及其他物种的同源性分析 | 第38-39页 |
| 3.4 TaDREB2 基因半定量 RT-PCR 分析 | 第39-40页 |
| 3.4.1 适宜 PCR 循环数 | 第39-40页 |
| 3.4.2 半定量 RT-PCR 分析结果 | 第40页 |
| 3.5 TaDREB2 基因原核表达分析结果 | 第40-42页 |
| 3.5.1 原核载体构建 | 第40-41页 |
| 3.5.2 诱导蛋白表达结果 | 第41-42页 |
| 3.6 TaDREB2 基因真核表达结果 | 第42-44页 |
| 3.6.1 真核载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.6.2 真核重组质粒转化农杆菌 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 4.1 关于基因克隆 | 第44页 |
| 4.2 关于基因的分析 | 第44-45页 |
| 4.3 关于半定量 RT-PCR | 第45页 |
| 4.4 关于常见基因克隆方法的比较 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 在读期间发表论文 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 附录Ⅰ 试验中所用试剂配方 | 第57-58页 |
| 附录Ⅱ 试验所用载体图 | 第58-60页 |
