| 致谢 | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 文献综述及研究目的 | 第20-38页 |
| 1.1 烟粉虱 | 第20-23页 |
| 1.1.1 烟粉虱概述 | 第20-21页 |
| 1.1.2 烟粉虱在我国发生历史及现状 | 第21-22页 |
| 1.1.3 烟粉虱的危害方式 | 第22-23页 |
| 1.2 双生病毒 | 第23-26页 |
| 1.2.1 双生病毒的危害 | 第23页 |
| 1.2.2 菜豆金黄花叶病毒属分类地位和基本特性 | 第23-26页 |
| 1.2.3 PaLCuCNV的研究现状 | 第26页 |
| 1.3 病毒与介体昆虫的互作机制研究 | 第26-30页 |
| 1.3.1 介体昆虫传播植物病毒的方式 | 第26-28页 |
| 1.3.2 介体昆虫传播非循回型植物病毒的机制 | 第28-29页 |
| 1.3.3 介体昆虫传播循回型植物病毒的机制 | 第29-30页 |
| 1.4 烟粉虱传播双生病毒的特异性及其机制 | 第30-36页 |
| 1.4.1 烟粉虱对双生病毒的获取、存留及传播 | 第30-33页 |
| 1.4.2 烟粉虱传播双生病毒的生理和分子机制 | 第33-36页 |
| 1.4.2.1 烟粉虱传播双生病毒的屏障 | 第33-35页 |
| 1.4.2.2 烟粉虱与双生病毒互作蛋白研究 | 第35页 |
| 1.4.2.3 双生病毒外壳蛋白对传毒特异性的影响 | 第35页 |
| 1.4.2.4 生物信息学在烟粉虱-双生病毒互作中的应用 | 第35-36页 |
| 1.5 本研究目的与主要内容 | 第36-38页 |
| 1.5.1 本研究目的 | 第36-37页 |
| 1.5.2 本研究主要内容 | 第37-38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-50页 |
| 2.1 基本材料 | 第38-42页 |
| 2.1.1 供试昆虫及其试验种群维持 | 第38页 |
| 2.1.2 供试植物 | 第38-39页 |
| 2.1.3 供试病毒及感病植株的获取 | 第39页 |
| 2.1.3.1 供试病毒 | 第39页 |
| 2.1.3.2 感病植株的获取 | 第39页 |
| 2.1.4 生态学试验相关的主要设备和仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.4.1 养虫笼 | 第40页 |
| 2.1.4.2 夹叶笼 | 第40页 |
| 2.1.4.3 吸虫器 | 第40页 |
| 2.1.4.4 人工气候室 | 第40页 |
| 2.1.4.5 烟粉虱解剖装置 | 第40页 |
| 2.1.5 分子生物学相关研究的主要仪器设备与试剂 | 第40-42页 |
| 2.1.5.1 主要仪器设备 | 第40-42页 |
| 2.1.5.2 主要试剂 | 第42页 |
| 2.2 常用基本方法 | 第42-50页 |
| 2.2.1 单头烟粉虱总DNA提取方法 | 第42-43页 |
| 2.2.2 烟粉虱隐种的鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2.2.1 PCR反应体系及程序设置 | 第43页 |
| 2.2.2.2 限制性酶切PCR产物 | 第43页 |
| 2.2.2.3 电泳观察酶切PCR产物 | 第43-44页 |
| 2.2.3 植物及烟粉虱体内病毒DNA的普通PCR和荧光定量PCR检测 | 第44-45页 |
| 2.2.4 农杆菌质粒的电击转化 | 第45页 |
| 2.2.5 PCR产物的纯化 | 第45-46页 |
| 2.2.6 PCR产物连接T载体 | 第46页 |
| 2.2.7 感受态细胞制作 | 第46-47页 |
| 2.2.8 感受态细胞的DNA转化 | 第47页 |
| 2.2.9 大肠杆菌质粒的提取 | 第47-48页 |
| 2.2.10 应用试剂盒提取植物基因组DNA | 第48-50页 |
| 3 比较四个烟粉虱隐种传播中国番木瓜曲叶病毒的能力 | 第50-61页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-53页 |
| 3.1.1 供试昆虫、病毒及植物 | 第50-51页 |
| 3.1.2 获毒时间测定 | 第51页 |
| 3.1.3 持毒时间测定 | 第51页 |
| 3.1.4 传毒效率的测定 | 第51页 |
| 3.1.5 定量PCR检测烟粉虱体内PaLCuCNV的相对含量 | 第51-52页 |
| 3.1.6 植物和烟粉虱DNA的提取 | 第52页 |
| 3.1.7 应用PCR和qPCR检测PaLCuCNV DNA | 第52-53页 |
| 3.1.8 数据分析 | 第53页 |
| 3.2 结果与分析 | 第53-57页 |
| 3.2.1 烟粉虱对PaLCuCNV的获取 | 第53页 |
| 3.2.2 烟粉虱对PaLCuCNV的存留 | 第53-54页 |
| 3.2.3 烟粉虱对PaLCuCNV的传播 | 第54-56页 |
| 3.2.4 定量检测烟粉虱体内PaLCuCNV的相对含量 | 第56-57页 |
| 3.3 讨论 | 第57-61页 |
| 4 烟粉虱高效率传播PaLCuCNV的生理和分子机制 | 第61-87页 |
| 4.1 材料与方法 | 第61-70页 |
| 4.1.1 供试昆虫、病毒及植物 | 第61页 |
| 4.1.2 应用普通PCR和荧光定量PCR检测植物和烟粉虱体内的双生病毒 | 第61-62页 |
| 4.1.3 长期在PaLCuCNV带毒番茄上饲养烟粉虱的传毒能力检测 | 第62页 |
| 4.1.4 烟粉虱持续获取和存留PaLCuCNV能力检测 | 第62-63页 |
| 4.1.4.1 烟粉虱持续获取PaLCuCNV的能力 | 第62页 |
| 4.1.4.2 烟粉虱持续存留PaLCuCNV的能力 | 第62-63页 |
| 4.1.5 烟粉虱分泌蜜露中病毒的绝对定量检测 | 第63-64页 |
| 4.1.5.1 蜜露的收集 | 第63页 |
| 4.1.5.2 蜜露中核酸的提取 | 第63页 |
| 4.1.5.3 蜜露中病毒的绝对定量 | 第63-64页 |
| 4.1.6 定量PCR检测PaLCuCNV(TYLCV,mPaLCuCNV,mTYLCV)在MEAM1和MED烟粉虱虫体及各组织的相对含量 | 第64-65页 |
| 4.1.7 免疫荧光检测PaLCuCNV(TYLCV,mPaLCuCNV,mTYLCV)在MEAM1和MED烟粉虱中肠的分布 | 第65页 |
| 4.1.8 PaLCuCNV和TYLCV CP互换的重组病毒的载体构建 | 第65-70页 |
| 4.1.9 数据分析 | 第70页 |
| 4.2 结果与分析 | 第70-84页 |
| 4.2.1 长期在PaLCuCNV带毒番茄上饲养的烟粉虱传毒能力检测 | 第70-71页 |
| 4.2.2 烟粉虱获取和存留PaLCuCNV能力检测 | 第71-73页 |
| 4.2.3 烟粉虱分泌蜜露的病毒绝对定量检测 | 第73-74页 |
| 4.2.4 定量PCR检测PaLCuCNV在MEAM1和MED烟粉虱各个组织的相对含量 | 第74页 |
| 4.2.5 免疫荧光检测PaLCuCNV在MEAM1和MED烟粉虱中肠的分布.. | 第74-78页 |
| 4.2.6 PaLCuCNV、TYLCV、mPaLCuCNV和mTYLCV侵染番茄的能力检测 | 第78页 |
| 4.2.7 烟粉虱MEAM1和MED隐种获取PaLCuCNV、TYLCV、mPaLCuCNV以及mTYLCV的能力比较 | 第78-80页 |
| 4.2.8 定量PCR检测TYLCV、mPaLCuCNV以及mTYLCV在MEAM1和MED烟粉虱各个组织的相对含量 | 第80-81页 |
| 4.2.9 免疫荧光检测TYLCV、mPaLCuCNV以及mTYLCV在MEAM1和MED烟粉虱中肠的分布 | 第81-84页 |
| 4.3 讨论 | 第84-87页 |
| 5 总讨论 | 第87-92页 |
| 5.1 比较四个烟粉虱隐种传播中国番木瓜曲叶病毒的能力 | 第88页 |
| 5.2 烟粉虱高效率传播PaLCuCNV的生理和分子机制 | 第88-90页 |
| 5.3 本研究的特色与创新之处 | 第90页 |
| 5.4 研究中存在的问题 | 第90页 |
| 5.5 值得继续研究的问题 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-107页 |
