| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-24页 |
| 第一章 猪链球菌概述、毒力因子研究进展及mmuM基因研究现状 | 第12-24页 |
| 1 猪链球菌概述 | 第12-13页 |
| 1.1 猪链球菌血清分型及生物学特性 | 第12页 |
| 1.2 猪链球菌流行病学 | 第12-13页 |
| 2 猪链球菌毒力因子研究进展 | 第13-18页 |
| 2.1 新发现及新验证的毒力因子 | 第13-14页 |
| 2.2 经典毒力因子 | 第14-18页 |
| 3 本实验室斑马鱼模型的建立 | 第18-19页 |
| 4 强弱毒株比较基因组学研究发现mmuM为强毒株特有 | 第19页 |
| 5 mmuM基因的研究进展 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-24页 |
| 第二篇 试验研究 | 第24-74页 |
| 第二章 mmuM生物信息分析和其在不同猪链球菌2型菌株中的分布 | 第24-34页 |
| 1 材料与方法 | 第24-27页 |
| 1.1 材料 | 第25-27页 |
| 1.2 方法 | 第27页 |
| 2 mmuM生物信息分析 | 第27-28页 |
| 2.1 等电点与分子量预测 | 第27页 |
| 2.2 信号肽预测 | 第27页 |
| 2.3 膜区预测 | 第27-28页 |
| 2.4 亚细胞定位预测 | 第28页 |
| 2.5 操纵子预测 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-31页 |
| 3.1 mmuM基因在猪链球菌2型强毒与弱毒菌株中的分布 | 第28页 |
| 3.2 mmuM基因在猪链球菌其他血清型中的分布 | 第28页 |
| 3.3 mmuM基因生物信息分析结果: | 第28-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 第三章 mmuM基因及ZY05719中ECM结合蛋白IMPDH,OppA的原核表达及它们的细胞粘附性分析 | 第34-46页 |
| 1 材料与方法 | 第35-37页 |
| 1.1 材料 | 第35-36页 |
| 1.2 方法 | 第36-37页 |
| 2 结果 | 第37-39页 |
| 2.1 HMT、OppA和IMPDH重组蛋白的表达和纯化 | 第37页 |
| 2.2 OppA和IMPDH重组蛋白对ECM结合性的ELISA验证 | 第37-38页 |
| 2.3 间接免疫荧光试验对HMT、OppA和IMPDH对Hep-2细胞的粘附性分析 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 第四章 ZY05719 mmuM基因缺失株和互补株的构建及生物学特性分析 | 第46-64页 |
| 1 材料与方法 | 第47-54页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第47页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第47-50页 |
| 1.3 mmuM缺失引物设计 | 第50页 |
| 1.4 基因敲除载体的构建 | 第50-51页 |
| 1.5 ZY05719电转化感受态细胞制备 | 第51页 |
| 1.6 △mmuM基因缺失株的构建和筛选 | 第51-52页 |
| 1.7 C△mmuM互补株的构建和鉴定 | 第52页 |
| 1.8 S. suis 2野生株ZY05719、缺失株△mmuM、互补株C△mmuM的基本生物学性状分析 | 第52-53页 |
| 1.9 斑马鱼毒力试验 | 第53页 |
| 1.10 对HEp-2细胞的粘附试验 | 第53页 |
| 1.11 ZY05719、△mmuM、C△mmuM的全血存活试验 | 第53页 |
| 1.12 荧光定量检测不同菌株中毒力因子的转录水平差异 | 第53-54页 |
| 2 结果 | 第54-58页 |
| 2.1 缺失株的鉴定 | 第54页 |
| 2.2 荧光定量PCR对野生株、缺失株、互补株中mmuM的转录水平检测 | 第54-55页 |
| 2.3 生物学性状分析 | 第55-56页 |
| 2.4 斑马鱼毒力试验 | 第56页 |
| 2.5 对HEp-2细胞的粘附试验 | 第56-57页 |
| 2.7 ZY05719、△mmuM、C△mmuM的全血存活试验 | 第57-58页 |
| 2.8 荧光定量检测不同菌株中毒力因子的转录水平差异 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 第五章 △mmuM和ZY05719差异蛋白组学分析 | 第64-74页 |
| 1 材料与方法 | 第64-66页 |
| 1.1 菌株及材料 | 第64-65页 |
| 1.2 ZY05719和△mmuM全菌蛋白的提取(用于Label free) | 第65页 |
| 1.3 基于label-free的比较蛋白组学分析 | 第65-66页 |
| 2 结果 | 第66-69页 |
| 2.1 基于label-free的比较蛋白组学分析 | 第66-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 全文总结 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 已发表文章 | 第78页 |
