| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词(Abbreviations) | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 研究背景 | 第13-14页 |
| 1.2 天然产物的抗肿瘤作用 | 第14页 |
| 1.3 紫杉醇简介 | 第14-15页 |
| 1.4 肿瘤多药耐药机制及解决办法 | 第15-18页 |
| 1.4.1 肿瘤耐药的发生 | 第15-16页 |
| 1.4.2 多药耐药机制 | 第16-17页 |
| 1.4.3 多药耐药解决办法 | 第17-18页 |
| 1.5 体外构建耐药细胞株的方法 | 第18-19页 |
| 1.6 新型抗肿瘤耐药化合物的研究 | 第19页 |
| 1.7 线粒体凋亡通路 | 第19-21页 |
| 1.8 本论文研究意义及内容 | 第21-22页 |
| 2 人胃癌耐药细胞系MGC803/PTX构建及其机制研究 | 第22-53页 |
| 引言 | 第22页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-27页 |
| 2.1.1 药品及细胞株 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.4 主要溶液的配置 | 第25-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第27-28页 |
| 2.2.2 人胃癌耐药细胞株MGC803/PTX的建立 | 第28-29页 |
| 2.2.3 细胞形态学观察 | 第29页 |
| 2.2.4 耐药细胞稳定性测定 | 第29-30页 |
| 2.2.5 CCK8法检测抗癌药物对细胞的抑制率 | 第30页 |
| 2.2.6 Hoechst 33258染色法观察细胞核形态 | 第30页 |
| 2.2.7 AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率 | 第30页 |
| 2.2.8 亲本细胞和耐药细胞生长曲线的比较 | 第30-31页 |
| 2.2.9 克隆形成实验比较两株细胞集落形成能力 | 第31页 |
| 2.2.10 流式细胞仪检测两株细胞周期分布 | 第31页 |
| 2.2.11 Western blot检测MGC803与MGGC803/PTX细胞相关蛋白的表达 | 第31-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-43页 |
| 2.3.1 人胃癌耐药细胞株MGC803/PTX的成功建立 | 第34-35页 |
| 2.3.2 PTX诱导过程中细胞形态学观察 | 第35-36页 |
| 2.3.3 PTX对耐药细胞株的IC50和耐药指数测定 | 第36-37页 |
| 2.3.4 CCK8法测定耐药细胞对多种化疗药物的敏感性 | 第37页 |
| 2.3.5 耐药细胞稳定性测定 | 第37-38页 |
| 2.3.6 细胞核形态学观察 | 第38-39页 |
| 2.3.7 Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡率 | 第39-40页 |
| 2.3.8 细胞生长曲线和倍增时间 | 第40页 |
| 2.3.9 细胞集落形成实验 | 第40-41页 |
| 2.3.10 细胞周期分布 | 第41-42页 |
| 2.3.11 Western blot检测MGC803与MGC803/PTX细胞中相关蛋白的表达 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-47页 |
| 2.5 总结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 3 化合物20对MGC803/PTX耐药株的作用研究 | 第53-70页 |
| 引言 | 第53-54页 |
| 3.1 实验材料 | 第54-56页 |
| 3.1.1 药品及细胞株 | 第54页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第54-55页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第55-56页 |
| 3.1.4 主要溶液的配置 | 第56页 |
| 3.2 实验方法 | 第56-59页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第56-57页 |
| 3.2.2 CCK8法测定化合物20对细胞的生长抑制率 | 第57页 |
| 3.2.3 化合物20作用后细胞的形态学观察 | 第57页 |
| 3.2.4 化合物20对MGC803/PTX细胞克隆形成率的影响 | 第57页 |
| 3.2.5 PI染色结合高内涵法分析细胞周期分布 | 第57-58页 |
| 3.2.6 Hoechst 33258染色观察化合物20作用后细胞核形态变化 | 第58页 |
| 3.2.7 Western blot检测P-gp和凋亡相关蛋白的表达 | 第58-59页 |
| 3.3 实验结果 | 第59-65页 |
| 3.3.1 CCK8法测定化合物20对细胞的生长抑制率 | 第59-60页 |
| 3.3.2 化合物20作用后细胞形态学变化 | 第60-61页 |
| 3.3.3 化合物20对MGC803/PTX细胞克隆形成率的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.4 化合物20对MGC803/PTX对细胞周期分布的影响 | 第62-64页 |
| 3.3.5 化合物20作用后细胞核形态学变化 | 第64页 |
| 3.3.6 Western blot检测P-gp和凋亡相关蛋白的表达 | 第64-65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-67页 |
| 3.5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 个人简历 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
