| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-20页 |
| 1.1 蛋白质溶解度 | 第10-14页 |
| 1.1.1 p H值、温度对蛋白质溶解性的影响 | 第11页 |
| 1.1.2 盐离子对蛋白质溶解性的影响 | 第11-12页 |
| 1.1.3 溶剂类型对蛋白质溶解性的影响 | 第12页 |
| 1.1.4 沉淀剂 | 第12-13页 |
| 1.1.5 化学结构对蛋白质溶解性的影响 | 第13页 |
| 1.1.6 物理方式对蛋白质溶解性的影响 | 第13-14页 |
| 1.1.7 外加酶对蛋白质溶解性的影响 | 第14页 |
| 1.1.8 测量蛋白质溶解性的方法 | 第14页 |
| 1.2 不溶活性蛋白聚集体 | 第14-15页 |
| 1.3 多肽自组装 | 第15-17页 |
| 1.4 木聚糖酶 | 第17页 |
| 1.5 课题目的与意义 | 第17-18页 |
| 1.6 课题创新点 | 第18-20页 |
| 第2章 不同ELPs-木聚糖酶融合蛋白的设计 | 第20-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验菌种 | 第20页 |
| 2.1.2 培养基配方 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.5 实验溶液及缓冲液的配制方法 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 菌体活化及收集 | 第22页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第22-23页 |
| 2.2.3 质粒的提取 | 第23页 |
| 2.2.4 双酶切反应 | 第23页 |
| 2.2.5 目的基因片段的电泳回收 | 第23-24页 |
| 2.2.6 目的片段与载体的连接 | 第24页 |
| 2.2.7 感受态细胞的制备及质粒转化 | 第24-25页 |
| 2.2.8 重组质粒的酶切验证 | 第25页 |
| 2.2.9 不同克隆载体的构建方案 | 第25-27页 |
| 2.2.10不同表达载体的构建方案 | 第27页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第27-30页 |
| 2.3.1 克隆载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.3.2 表达载体的构建 | 第28-30页 |
| 第3章 不同ELPs-木聚糖酶融合蛋白的制备及酶学性质的研究 | 第30-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-33页 |
| 3.1.1 菌种 | 第30页 |
| 3.1.2 主要培养基 | 第30-31页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第31页 |
| 3.1.5 实验溶液，缓冲液的配制 | 第31-33页 |
| 3.1.6 蛋白质的SDS-PAGE电泳 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-40页 |
| 3.2.1 标准曲线的制作 | 第33-34页 |
| 3.2.2 不同ELPs与木聚糖酶融合蛋白的诱导表达 | 第34-36页 |
| 3.2.3 木聚糖酶活力测定条件的确定 | 第36-37页 |
| 3.2.4 木聚糖酶活力的测定 | 第37-38页 |
| 3.2.5 酶学性质研究 | 第38-39页 |
| 3.2.6 蛋白含量测定 | 第39页 |
| 3.2.7 蛋白质电泳 | 第39-40页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第40-54页 |
| 3.3.1 标准曲线 | 第40-41页 |
| 3.3.2 木聚糖酶活力测定条件的确定 | 第41-44页 |
| 3.3.3 不同ELPs-木聚糖酶融合蛋白的制备及酶活 | 第44-49页 |
| 3.3.4 不同ELPs-木聚糖酶融合蛋白的酶学性质 | 第49-54页 |
| 3.4 小结 | 第54-56页 |
| 第4章 探究木聚糖酶-ELPs不溶性聚集体的成因 | 第56-70页 |
| 4.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1 菌种及质粒 | 第56页 |
| 4.1.2 培养基配方 | 第56页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第56页 |
| 4.1.4 实验溶液配方 | 第56-57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-58页 |
| 4.2.1 考察ELPs长度的影响 | 第57页 |
| 4.2.2 连接肽长度的影响 | 第57页 |
| 4.2.3 盐溶液及p H的影响 | 第57页 |
| 4.2.4 目的蛋白的影响 | 第57-58页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第58-68页 |
| 4.3.1 考察ELPs长度的影响 | 第58-59页 |
| 4.3.2 连接肽长度的影响 | 第59页 |
| 4.3.3 盐溶液及p H的影响 | 第59-61页 |
| 4.3.4 目的蛋白的影响 | 第61-68页 |
| 4.4 小结 | 第68-70页 |
| 第五章 结论与展望 | 第70-72页 |
| 5.1 结论 | 第70页 |
| 5.2 展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 个人简历、在校期间发表的学术论文与研究成果 | 第80页 |
